HGECKO2A

Gecko2 Human Whole Genome CRISPR Pool, All-in-one^™ Lenti Particles（Gecko2 ヒト全ゲノム CRISPR プール、オールインワンレンチ粒子）(Gecko2 ベクター)

• 別名: Gecko2 CRISPR Pool, Gecko2 Lenti Particles, Human CRISPR Pool
• UNSPSCコード: 41106609
• NACRES: NA.51

特性

• 包装: pkg of 8x25 μL (vials)
• 品質水準: 200
• 濃度: 5x10⁸ VP/ml (via p24 assay)
• アプリケーション: CRISPR
• 輸送温度: dry ice
• 保管温度: −70°C

詳細

詳細

ヒトGeCKO v2（オールインワンベクター）は、ブロード研究所のFeng Zhangのラボによって開発され、ヒトゲノムにおける遺伝子ノックアウト用の、100,000以上のユニークなgRNAで構成されています。バージョン２ベクターの場合、Cas9とピューロマイシン選択マーカーを持ったgRNAを共発現する、オールインワンのレンチCRISPRベクターを使用することで、バージョン1と比べてタイターが約10倍高いウイルスを生成できます。ヒトシングルベクターシステムGeCKOプールは、最小タイターが5X10^8 TU/mL（p24アッセイで測定）で、8 x 25 μLの小分けの状態で提供されます。GeCKOヒトライブラリーは、2つの半分のライブラリー（AおよびB）として提供されます。遺伝子あたり6つのsgRNA（各ライブラリーあたり3つのsgRNA）を含むAおよびBライブラリーの両方を、一緒にスクリーニングすることをお勧めします。両ライブラリーは、1000個の非ターゲットコントロールsgRNAを含みます。また「A」ライブラリーは、miRNAをターゲットにします（miRNAあたり4つのsgRNA）。

アプリケーション

機能ゲノミクス／スクリーニング／標的バリデーション

特徴および利点

• ノックアウトしたタンパク質をコードする遺伝子の機能を調べるために、CRISPRヌクレアーゼを使用してくださいロボットや特別な装置を必要とせずに、ベンチトップで、全ヒトゲノム（16,000以上の遺伝子）を
• 効率良くスクリーニングできます
• 多数の内蔵型のエンリッチメントおよびデプレッションコントロールが、プールされたスクリーニング実験を高い信頼度で測定します
• レンチウイルスのCRISPRは、哺乳類のコドンに最適化されたCas9ヌクレアーゼと、遺伝子ノックアウトを促進するシングルガイドRNA（sgRNA）の共発現により、幅広い哺乳類細胞に使用できます。
• Cas9がヒト細胞（一次細胞においてなど）に導入されないアプリケーションにおいては、ヒトGeCKOバージョン2ライブラリー用の1ベクターシステムを使用してください。
• 導入後のセレクションには、ピューロマイシンを使用してください。

調製ノート

1 mLあたりのPuro Kill CurveおよびCFU（コロニー形成単位）測定。ライブラリースケールのスクリーニングを実施する前に、2つの予備実験を行う必要があります。Sigma.com/pooledscreeningをご参照ください。

その他情報

本製品はR&Dのみに使用でき、医薬品用、家庭用、または他の用途には使用できません。毒性や安全な取り扱いに関する情報については、化学物質安全性データシートをご参照ください。生産されたレンチウイルス導入粒子は複製能力がありませんが、ラボでの扱いにおいては、リスクグループレベル2（RGL-2）微生物として処理することをお勧めします。ラボでの扱いおよび廃棄除去に関しては、公開されているすべてのRGL-2ガイドラインに従ってください。

法的情報

CRISPR使用許諾契約

レンチウイルス使用許諾契約

All-in-One is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC

安全性情報

• 保管分類コード: 12 - Non Combustible Liquids
• WGK: WGK 3
• 引火点(°F): Not applicable
• 引火点(℃): Not applicable