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品質水準
化学種の反応性
human, mouse, rat
メーカー/製品名
Upstate®
テクニック
activity assay: suitable
affinity binding assay: suitable (G-protein)
NCBIアクセッション番号
UniProtアクセッション番号
輸送温度
wet ice
遺伝子情報
human ... RAC1(5879)
詳細
Rac1/Cdc42活性化アッセイ(カタログ番号17-441)は、細胞ライセート中のRacおよびCdc42活性を検出する効率の良い方法です。 このアッセイでは、Rac/Cdc42の下流エフェクターであるp21活性化タンパク質キナーゼ(PAK1)を用いて、サンプルから活性GTP結合型のRac/Cdc42を分離します。 PAK1のp21結合ドメイン(PBD)はGST融合タンパク質として発現され、アガロースビーズに結合します。 沈殿後、イムノブロットを行い、活性化Rac/Cdc42を、特異的なモノクローナル抗体と、HRP標識二次抗体およびECL試薬で検出します。
特異性
動物種の交差反応性: ヒトおよびマウスすべての哺乳類種と交差反応すると予測されています
抗Rac1、クローン23A8:動物種の交差反応性:ヒト、マウス、ラット他の動物種の交差反応性は不明です。
抗cdc42動物種の交差反応性: ヒト、マウス、ラット、イヌ 他の動物種の交差反応性は不明です。
抗Rac1、クローン23A8:動物種の交差反応性:ヒト、マウス、ラット他の動物種の交差反応性は不明です。
抗cdc42動物種の交差反応性: ヒト、マウス、ラット、イヌ 他の動物種の交差反応性は不明です。
構成
Rac/cdc42アッセイ試薬(PAK-1 PBD、アガロース)、カタログ番号14-325:150 μLのグルタチオンアガロースビーズに結合させた300 μgのPAK-1 PBDを含むバイアル1本、50%グリセロールを含む20 mM PBS、pH 7.4中の50%スラリーとして提供、最終容量300 μL。
抗Rac1、クローン23A8、カタログ番号05-389:250 μLの保存バッファー(0.1 Mトリス-グリシン、pH 7.4、0.15 M NaCl、0.05%アジ化ナトリウムを含む)中に250 μgのプロテインG精製マウスIgG2bを含むバイアル1本。
抗cdc42(マウスモノクローナルIgG1)、カタログ番号05-542:200 μLの50%保存バッファー(20 mM リン酸ナトリウム、pH 7.5、150 mM NaCl、1.5 mMアジ化ナトリウム、1 mg/mL BSA)と50%グリセロール中に50 μgの精製マウスIgG1を含むバイアル1本。
Mg2+溶解/洗浄バッファー、5X、カタログ番号20-168:それぞれ18 mLの5X MLBを含むバイアル2本:125 mM HEPES、pH 7.5、750 mM NaCl、5% Igepal CA-630、50 mM MgCl2、5 mM EDTA、10%グリセロール。
100X GTPγS、10 mM、カタログ番号20-176:50 mM Tris-HCl、pH 7.8、加水分解されないGTPアナログ中に、50 μLの10 mM GTPγS、100Xストックを含むバイアル1本。 5 mLの細胞ライセートを十分に標識できます
100X GDP、100 mM、カタログ番号20-177:50 mM Tris-HCl、pH 7.8中に50 μLの100 mM GDP、100Xストックを含むバイアル1本。 不活性型Gタンパク質のin vitro標識のためのGDP(グアノシン5′-二リン酸)。 5 mLの細胞ライセートを十分に標識できます。
抗Rac1、クローン23A8、カタログ番号05-389:250 μLの保存バッファー(0.1 Mトリス-グリシン、pH 7.4、0.15 M NaCl、0.05%アジ化ナトリウムを含む)中に250 μgのプロテインG精製マウスIgG2bを含むバイアル1本。
抗cdc42(マウスモノクローナルIgG1)、カタログ番号05-542:200 μLの50%保存バッファー(20 mM リン酸ナトリウム、pH 7.5、150 mM NaCl、1.5 mMアジ化ナトリウム、1 mg/mL BSA)と50%グリセロール中に50 μgの精製マウスIgG1を含むバイアル1本。
Mg2+溶解/洗浄バッファー、5X、カタログ番号20-168:それぞれ18 mLの5X MLBを含むバイアル2本:125 mM HEPES、pH 7.5、750 mM NaCl、5% Igepal CA-630、50 mM MgCl2、5 mM EDTA、10%グリセロール。
100X GTPγS、10 mM、カタログ番号20-176:50 mM Tris-HCl、pH 7.8、加水分解されないGTPアナログ中に、50 μLの10 mM GTPγS、100Xストックを含むバイアル1本。 5 mLの細胞ライセートを十分に標識できます
100X GDP、100 mM、カタログ番号20-177:50 mM Tris-HCl、pH 7.8中に50 μLの100 mM GDP、100Xストックを含むバイアル1本。 不活性型Gタンパク質のin vitro標識のためのGDP(グアノシン5′-二リン酸)。 5 mLの細胞ライセートを十分に標識できます。
品質
GTPγSを負荷した3T3/A31およびHeLa細胞ライセートからRac1-GTPおよびcdc42-GTPを沈降させることにより定期的に評価済み(ライセートにin vitroでcdc42-GTPのためにGTPγSを負荷)。 沈殿したRac1-GTPおよびcdc42-GTPは、抗Rac抗体(1 μg/mL)を用いたイムノブロッティングにより検出しました。
保管および安定性
-20℃で出荷日から1年間。
法的情報
UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
免責事項
メルクのカタログまたは製品に添付されたメルクのその他の文書に記載されていない場合、メルクの製品は研究用途のみを目的としているため、他のいかなる目的にも使用することはできません。このような目的としては、未承認の商業用途、in vitroの診断用途、ex vivoあるいはin vivoの治療用途、またはヒトあるいは動物へのあらゆる種類の消費あるいは適用などがありますが、これらに限定されません。
シグナルワード
Danger
危険有害性情報
危険有害性の分類
Aquatic Acute 1 - Aquatic Chronic 2 - Eye Dam. 1
保管分類コード
10 - Combustible liquids
適用法令
試験研究用途を考慮した関連法令を主に挙げております。化学物質以外については、一部の情報のみ提供しています。 製品を安全かつ合法的に使用することは、使用者の義務です。最新情報により修正される場合があります。WEBの反映には時間を要することがあるため、適宜SDSをご参照ください。
Jan Code
17-441:
試験成績書(COA)
製品のロット番号・バッチ番号を入力して、試験成績書(COA) を検索できます。ロット番号・バッチ番号は、製品ラベルに「Lot」または「Batch」に続いて記載されています。
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