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Merck

17-441

Sigma-Aldrich

Rac1/Cdc42活性化アッセイキット

The Rac1/Cdc42 Activation Assay provides an effective method for detecting Rac & Cdc42 activity in cell lysates.

別名:

Rac1 activation assay

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About This Item

UNSPSCコード:
12161503
eCl@ss:
32161000
NACRES:
NA.84

品質水準

化学種の反応性

human, mouse, rat

メーカー/製品名

Upstate®

テクニック

activity assay: suitable
affinity binding assay: suitable (G-protein)

NCBIアクセッション番号

UniProtアクセッション番号

輸送温度

wet ice

遺伝子情報

human ... RAC1(5879)

詳細

Rac1/Cdc42活性化アッセイ(カタログ番号17-441)は、細胞ライセート中のRacおよびCdc42活性を検出する効率の良い方法です。 このアッセイでは、Rac/Cdc42の下流エフェクターであるp21活性化タンパク質キナーゼ(PAK1)を用いて、サンプルから活性GTP結合型のRac/Cdc42を分離します。 PAK1のp21結合ドメイン(PBD)はGST融合タンパク質として発現され、アガロースビーズに結合します。 沈殿後、イムノブロットを行い、活性化Rac/Cdc42を、特異的なモノクローナル抗体と、HRP標識二次抗体およびECL試薬で検出します。

特異性

動物種の交差反応性: ヒトおよびマウスすべての哺乳類種と交差反応すると予測されています
抗Rac1、クローン23A8:動物種の交差反応性:ヒト、マウス、ラット他の動物種の交差反応性は不明です。
抗cdc42動物種の交差反応性: ヒト、マウス、ラット、イヌ 他の動物種の交差反応性は不明です。

構成

Rac/cdc42アッセイ試薬(PAK-1 PBD、アガロース)、カタログ番号14-325:150 μLのグルタチオンアガロースビーズに結合させた300 μgのPAK-1 PBDを含むバイアル1本、50%グリセロールを含む20 mM PBS、pH 7.4中の50%スラリーとして提供、最終容量300 μL。

抗Rac1、クローン23A8、カタログ番号05-389:250 μLの保存バッファー(0.1 Mトリス-グリシン、pH 7.4、0.15 M NaCl、0.05%アジ化ナトリウムを含む)中に250 μgのプロテインG精製マウスIgG2bを含むバイアル1本。

抗cdc42(マウスモノクローナルIgG1)、カタログ番号05-542:200 μLの50%保存バッファー(20 mM リン酸ナトリウム、pH 7.5、150 mM NaCl、1.5 mMアジ化ナトリウム、1 mg/mL BSA)と50%グリセロール中に50 μgの精製マウスIgG1を含むバイアル1本。

Mg2+溶解/洗浄バッファー、5X、カタログ番号20-168:それぞれ18 mLの5X MLBを含むバイアル2本:125 mM HEPES、pH 7.5、750 mM NaCl、5% Igepal CA-630、50 mM MgCl2、5 mM EDTA、10%グリセロール。

100X GTPγS、10 mM、カタログ番号20-176:50 mM Tris-HCl、pH 7.8、加水分解されないGTPアナログ中に、50 μLの10 mM GTPγS、100Xストックを含むバイアル1本。 5 mLの細胞ライセートを十分に標識できます

100X GDP、100 mM、カタログ番号20-177:50 mM Tris-HCl、pH 7.8中に50 μLの100 mM GDP、100Xストックを含むバイアル1本。 不活性型Gタンパク質のin vitro標識のためのGDP(グアノシン5′-二リン酸)。 5 mLの細胞ライセートを十分に標識できます。

品質

GTPγSを負荷した3T3/A31およびHeLa細胞ライセートからRac1-GTPおよびcdc42-GTPを沈降させることにより定期的に評価済み(ライセートにin vitroでcdc42-GTPのためにGTPγSを負荷)。 沈殿したRac1-GTPおよびcdc42-GTPは、抗Rac抗体(1 μg/mL)を用いたイムノブロッティングにより検出しました。

保管および安定性

-20℃で出荷日から1年間。

法的情報

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

免責事項

メルクのカタログまたは製品に添付されたメルクのその他の文書に記載されていない場合、メルクの製品は研究用途のみを目的としているため、他のいかなる目的にも使用することはできません。このような目的としては、未承認の商業用途、in vitroの診断用途、ex vivoあるいはin vivoの治療用途、またはヒトあるいは動物へのあらゆる種類の消費あるいは適用などがありますが、これらに限定されません。

ピクトグラム

CorrosionEnvironment

シグナルワード

Danger

危険有害性情報

危険有害性の分類

Aquatic Acute 1 - Aquatic Chronic 2 - Eye Dam. 1

保管分類コード

10 - Combustible liquids


適用法令

試験研究用途を考慮した関連法令を主に挙げております。化学物質以外については、一部の情報のみ提供しています。 製品を安全かつ合法的に使用することは、使用者の義務です。最新情報により修正される場合があります。WEBの反映には時間を要することがあるため、適宜SDSをご参照ください。

Jan Code

17-441:


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