T9935
Tripsina
essentially salt-free, lyophilized powder, ≥9,000 BAEE units/mg protein, BioReagent, suitable for cell culture
Sinonimo/i:
Serine Protease 1
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About This Item
Prodotti consigliati
Nome Commerciale
BioReagent
Livello qualitativo
Forma fisica
essentially salt-free, lyophilized powder
Attività specifica
≥9,000 BAEE units/mg protein
PM
23.8 kDa
Composizione
protein, ≥80%
tecniche
cell culture | mammalian: suitable
Solubilità
hydrochloric acid: soluble 1 mM
Temperatura di conservazione
−20°C
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Applicazioni
Per la digestione di peptidi con la tripsina, utilizzare un rapporto compreso all′incirca tra 1:100 e 1:20 per tripsina:peptide. L′impiego tipico di questo prodotto consiste nella rimozione delle cellule aderenti da una superficie di coltura. La concentrazione di tripsina necessaria per staccare le cellule dal relativo substrato dipende principalmente dal tipo di cellule e dall′età della coltura. Le tripsine sono state adoperate anche per la ri-sospensione delle cellule durante la coltura cellulare, nella ricerca proteomica per la digestione delle proteine e in varie digestioni in gel. Ulteriori applicazioni comprendono la valutazione della cristallizzazione con tecniche basate su membrana e l′impiego in uno studio per stabilire se i tassi e la resa del folding proteico possono essere limitati dalla presenza di trappole cinetiche.
Trypsin from bovine pancreas has been used for enzymatic digestion of nucleus pulposus (NP) cells during human NP cells isolation. It has also been used as a immunopanning reagent for purification of cells.
Azioni biochim/fisiol
La tripsina scinde i peptidi sul lato C-terminale dei residui di lisina e arginina. La velocità di idrolisi di questa reazione viene rallentata se su uno dei lati del sito di scissione è presente un residuo acido. L′idrolisi si arresta se sul lato carbossile del sito di scissione è presente un residuo di prolina. Il pH ottimale per l′attività della tripsina è 7-9. La tripsina può anche scindere i legami esterei e ammidici dei derivati sintetici degli amminoacidi. L′EDTA viene aggiunto alle soluzioni di tripsina come agente chelante che neutralizza gli ioni di calcio e magnesio che oscurano i legami peptidici su cui agisce la tripsina. La rimozione di questi ioni aumenta l′attività enzimatica.
Gli inibitori delle serin proteasi, tra cui ad esempio DFP, TLCK, APMSF, AEBSEF e aprotinina, inibiscono la tripsina.
Gli inibitori delle serin proteasi, tra cui ad esempio DFP, TLCK, APMSF, AEBSEF e aprotinina, inibiscono la tripsina.
Componenti
Trypsin consists of a single chain polypeptide of 223 amino acid residues, produced by the removal of the N-terminal hexapeptide from trypsinogen which is cleaved at the Lys - lle peptide bond. The sequence of amino acids is cross-linked by 6 disulfide bridges. This is the native form of trypsin, beta-trypsin. BETA-trypsin can be autolyzed, cleaving at the Lys - Ser residue, to produce alpha-trypsin. Trypsin is a member of the serine protease family.
Avvertenza
Solutions in 1 mM HCl are stable for 1 year in aliquots and stored at -20°C. The presence of Ca2+ will also diminish the self-autolysis of trypsin and maintain its stability in solution. Trypsin will also retain most of its activity in 2.0 M urea, 2.0 M guanidine HCl, or 0.1% (w/v) SDS.
Definizione di unità
Un′unità BAEE produce una A253 di 0,001 al minuto a pH 7,6 a 25°C usando il BAEE come substrato.
Nota sulla preparazione
This product is from pancreas sourced from New Zealand. It is soluble in 1 mM HCl at 1 mg/mL.
For applications that involve EDTA, solubilizing trypsin should be done with a buffered salt solution containing no Ca2+ or Mg2+.
For applications that involve EDTA, solubilizing trypsin should be done with a buffered salt solution containing no Ca2+ or Mg2+.
Avvertenze
Danger
Indicazioni di pericolo
Consigli di prudenza
Classi di pericolo
Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
Organi bersaglio
Respiratory system
Codice della classe di stoccaggio
11 - Combustible Solids
Classe di pericolosità dell'acqua (WGK)
WGK 1
Dispositivi di protezione individuale
dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves
Certificati d'analisi (COA)
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Protocolli
This procedure is for products with a specification for Trypsin activity using Na-Benzoyl-L-arginine ethyl ester (BAEE) as a substrate. The procedure is a continuous spectrophotometric rate determination (A253, Light path = 1 cm).
Il team dei nostri ricercatori vanta grande esperienza in tutte le aree della ricerca quali Life Science, scienza dei materiali, sintesi chimica, cromatografia, discipline analitiche, ecc..
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