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N8630

Sigma-Aldrich

Nucleasi P1

lyophilized powder, ≥200 units/mg protein (E1%/280, 3′-5′-Phosphodiesterase)

Sinonimo/i:

3′-fosfoidrolasi, Nucleasi 5′-nucleoside idrolasi, Endonucleasi P1

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About This Item

Numero CAS:
Classificazione EC (Enzyme Commission):
Numero MDL:
Codice UNSPSC:
12352204
NACRES:
NA.54

Origine biologica

Penicillium citrinum

Livello qualitativo

Forma fisica

lyophilized powder

Attività specifica

≥200 units/mg protein (E1%/280, 3′-5′-Phosphodiesterase)

secondary activity

≥1,000 units/mg protein 3′-nucleotidase

PM

42-50 kDa

Confezionamento

vial of ≥250 units (using RNA substrate)

tecniche

DNA extraction: suitable
DNA purification: suitable

Compatibilità

suitable for molecular biology

applicazioni

cell analysis

Temperatura di conservazione

2-8°C

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Descrizione generale

La nucleasi P1 è una delle nucleasi specifiche per singolo filamento più note in biologia molecolare. È un′endonucleasi specifica per singolo filamento (di ssDNA o ssRNA). La nucleasi P1 può anche scindere le regioni a singolo filamento degli acidi nucleici a doppio filamento.
La nucleasi P1 da Penicillium citrinum è un′endonucleasi zinco-dipendente che mostra un′aumentata attività in presenza di basse concentrazioni di urea. L′attività selettiva della nucleasi P1 si è rivelata utile negli studi sulla struttura degli acidi nucleici.

Applicazioni

  • La nucleasi P1 consente la scissione del DNA o RNA a singolo filamento in mononucleotidi 5′.
  • La nucleasi P1 è utile nella ricerca sul danneggiamento e la modificazione del DNA.
  • La nucleasi P1 può essere utilizzata per analizzare la composizione e la struttura delle basi degli acidi nucleici.
  • La nucleasi P1 viene utilizzata storicamente per la produzione industriale di mononucleotidi 5′ dall′RNA del lievito.
  • La nucleasi P1 può essere utilizzata per rimuovere gli acidi nucleici mediante la purificazione proteica.
  • La nucleasi P1 è un reagente importante per lo sviluppo di metodi per lo studio della biosintesi degli amminoacidi e della transamidazione t-RNA dipendenti.
  • La nucleasi P1 da Penicillium citrinum è stata utilizzata in uno studio per valutare le strutture cristalline utilizzando il solfato di ammonio o il polietilenglicole 4000 come agente di precipitazione.
  • La nucleasi P1 è stata adoperata in uno studio per indagare un metodo per l′analisi di sequenza diretta di 20-25 nucleotidi ricavati dai terminali dell′RNA marcato con gruppo terminale 5′ o 3′.
  • La nucleasi P1 è stata utilizzata per migliorare la sensibilità di un metodo di marcatura 32P per il rilevamento degli addotti del DNA.
L′enzima ha una temperatura ottimale di circa 70 °C, ma per una lunga incubazione è preferibile una temperatura inferiore a 60 °C. È stabile entro un range del pH di 5-8.
L′enzima ha una temperatura ottimale di circa 70 °C, ma per una lunga incubazione è preferibile una temperatura inferiore a 60 °C. È stabile entro un range del pH di 5-8.

Azioni biochim/fisiol

Catalizza la scissione endonucleolitica non specifica del DNA e dell′RNA a singolo filamento per produrre nucleosidi 5′-fosfato e oligonucleotidi 5′ fosforilati. Non degrada apprezzabilmente gli acidi nucleici a doppio filamento, specialmente in presenza di oltre 400 mM di cloruro di sodio con pH 6,0.

Caratteristiche e vantaggi

La nostra nucleasi P1 altamente attiva è stata testata per l′attività di 3′- e 5′-fosfodiesterasi e per l′attività di 3′-nucleotidasi ed è la nucleasi P1 più attiva del mercato.

Proprietà fisiche

Una glicoproteina zinco-dipendente composta da 270 residui di amminoacidi. Massa molecolare: 42-50 kDa.

Definizione di unità

3′-5′-fosfodiesterasi: Un′unità libera 1,0 μmole di nucleotidi solubili in acido da RNA in un minuto a pH 5,3 e 37 °C.
3′-nucleotidasi: Un′unità idrolizza 1,0 μmole di ortofosfato da 3′-AMP in un minuto a pH 7,2 e 37 °C.

Pittogrammi

Health hazard

Avvertenze

Danger

Indicazioni di pericolo

Consigli di prudenza

Classi di pericolo

Resp. Sens. 1

Codice della classe di stoccaggio

11 - Combustible Solids

Classe di pericolosità dell'acqua (WGK)

WGK 3

Punto d’infiammabilità (°F)

Not applicable

Punto d’infiammabilità (°C)

Not applicable

Dispositivi di protezione individuale

Eyeshields, Gloves, type N95 (US)


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M V Reddy et al.
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Exceedingly sensitive procedures are required to detect the presence of covalent DNA adducts in humans exposed to environmental genotoxicants because of low levels of such derivatives (1 adduct in 10(8)-10(10) DNA nucleotides). A 32P-postlabeling assay for detection and quantitation of
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K Shanmugha Rajan et al.
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A Lahm et al.
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