P5521
Fosfatasi, alcalina
≥2,000 DEA units/mg protein
Sinonimo/i:
Fosfatasi alcalina, Fosfoidrolasi di monoesteri ortofosforici (alcalino ottimale)
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About This Item
Numero CAS:
Numero MDL:
Codice UNSPSC:
12352204
NACRES:
NA.54
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Stato
aqueous solution
Livello qualitativo
Attività specifica
≥2,000 DEA units/mg protein
PM
dimer ~160 kDa
Concentrazione
≥1.0 mg/mL
Temperatura di conservazione
2-8°C
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Descrizione generale
The enzyme is a glycoprotein containing approximately 12% carbohydrate (6% hexoses and 6% other neutral sugars). Each molecule of alkaline phosphatase contains four zinc atoms and four disulfide bridges. Maximal activity with alkaline phosphatase is achieved in the presence of magnesium. It catalyzes the hydrolysis of phosphate monoesters such as p-nitrophenyl phosphate, phenyl phosphate, phenolphthalein phosphate, α-glycerol phosphate, β-glycerol phosphate, 2-phosphorylglycerate, triosephosphate, glucose-6-phosphate, glucose 1-phosphate, fructose 1-phosphate, fructose 6-phosphate, adenosine 5-phosphate adenosine 3-phosphate, phosphoenolpyruvate, and β-nicotinamide adenine dinucleotide phosphate. Arsenate, cysteine, iodine, inorganic phosphate, pyrophosphate, diisopropyl phosphate, triphenylphosphate, diisopropyl fluorophosphate, and L-phenylalanine are some of the strong inhibitors of alkaline phosphatase.
Applicazioni
Grado di attività altamente specifico consigliato per la coniugazione di anticorpi e proteine.
La fosfatasi alcalina può essere utilizzata per defosforilare la caseina e altre proteine. La fosfatasi alcalina può essere adoperata anche per defosforilare i terminali 5′ del DNA o dell′RNA per prevenire l′auto-legatura. Il DNA e l′RNA possono anche essere marcati con il fosfato radiomarcato (tramite la T4 polinucleotide chinasi) dopo la defosforilazione con la fosfatasi alcalina.
Alkaline phosphatase is used for conjugation to antibodies and other proteins for ELISA, Western blotting, and histochemical detection. It is routinely used to dephosphorylate proteins, such as casein, and nucleic acids. It may be used for protein labeling when high sensitivity is required. Alkaline phosphatase may be also be used to dephosphorylate the 5′-termini of DNA or RNA to prevent self-ligation. DNA or RNA can also be tagged with radiolabeled phosphate (via T4 polynucleotide kinase) after dephosphorylation with alkaline phosphatase. Product P5521 has been used to study GTP hydrolysis .
The enzyme from Sigma has been used in the assay of phosphatidylinositol 4-phosphate and phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate. It has also been used for alkaline phosphatase assays using a Nafion™-modified electrode.
Azioni biochim/fisiol
L′enzima ha un′ampia specificità per gli esteri fosforici di alcoli, ammine, pirofosfato e fenoli. Viene utilizzato abitualmente per defosforilare le proteine e gli acidi nucleici.
Alkaline phosphatase, from bovine intestinal mucosa, is most stable in the pH range 7.5-9.5. The enzyme has a broad specificity for phosphate esters of alcohols, amines, pyrophosphate, and phenols and it requires zinc, and magnesium or calcium divalent ions for activity.
Proprietà fisiche
La fosfatasi alcalina intestinale bovina è una glicoproteina dimerica derivata dalla membrana. Ne esistono almeno tre isoforme, che generalmente possiedono due glicani N-legati e uno o più glicani O-legati per monomero.
La fosfatasi alcalina intestinale bovina è una glicoproteina dimerica derivata dalla membrana. Ne esistono almeno tre isoforme, che generalmente possiedono due glicani N-legati e uno o più glicani O-legati per monomero.2 L′enzima richiede zinco e ioni bivalenti di magnesio o calcio per svolgere l′attività.
Definizione di unità
Un′unità DEA idrolizza 1 μmole di 4-nitrofenil fosfato in un minuto a pH 9,8 e a 37 °C (un′unità di glicina è equivalente a circa 3 unità DEA).
Stato fisico
solution in 3.2 M ammonium sulfate, 1 mM MgCl2 and 0.1 mM ZnCl2, pH 7.0
Nota sulla preparazione
Affinity purified
This product is prepared from bovine intestinal mucosa. Dilutions should be made in 10 mM Tris-HCl, pH 8.0, 1-5 mM magnesium chloride, 0.1-0.2 mM zinc chloride, and 50% glycerol and stored at 2-8 °C.
Risultati analitici
Le dimensioni delle confezioni sono basate su unità DEA.
Protein determined by biuret.
Note legali
Nafion is a trademark of The Chemours Company FC, LLC
Inibitore
Codice della classe di stoccaggio
10 - Combustible liquids
Classe di pericolosità dell'acqua (WGK)
WGK 1
Punto d’infiammabilità (°F)
Not applicable
Punto d’infiammabilità (°C)
Not applicable
Dispositivi di protezione individuale
Eyeshields, Gloves, type N95 (US)
Elenchi normativi
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