DUO92007
Reagenti arancioni di rilevamento in situ Duolink®
Sinonimo/i:
in situ Proximity Ligation Assay reagent, Protein Protein Interaction Assay reagent
About This Item
Prodotti consigliati
Nome Commerciale
Duolink®
Livello qualitativo
tecniche
proximity ligation assay: suitable
Fluorescenza
λex 554 nm; λem 576 nm (Cyanine 3; Zeiss Filter set 20)
Compatibilità
suitable for fluorescence
Condizioni di spedizione
dry ice
Temperatura di conservazione
−20°C
Applicazioni
Per usare il prodotto, seguire il Protocollo per la fluorescenza in situ Duolink®. È disponibile anche una serie di istruzioni brevi.
Per informazioni su come eseguire un esperimento Duolink®, per le applicazioni, la risoluzione dei problemi e altro, visitare il Centro risorse PLA Duolink®.
Per eseguire un esperimento PLA in situ Duolink® completo saranno necessari due anticorpi primari (convalidati per PLA, IHC, ICC o IF) che riconoscano due epitopi target. Altri reagenti necessari sono un paio di sonde PLA da specie differenti (una PLUS e una MINUS), reagenti di rilevamento, tamponi di lavaggio e un terreno di montaggio. Tenere presente che gli anticorpi primari devono provenire dalla stessa specie delle sonde PLA Duolink®. L′analisi si effettua con un′attrezzatura standard per saggio di immunofluorescenza.
Specificità
I reagenti per il rilevamento della fluorescenza arancione sono spesso utilizzati con il filtro cianina 3.
Nota applicativa
Sono necessari due anticorpi primari prodotti in specie diverse. Analizzare gli anticorpi primari (classe IgG, mono o policlonali) in un saggio standard di immunofluorescenza (IF), immunoistochimica (IHC) o immunocitochimica (ICC) per determinare la fissazione, il blocco e le condizioni di titolazione ottimali. I reagenti in situ Duolink® sono idonei all′uso su cellule fissate, cellule cytospin, cellule cresciute su vetrino, fissate in formalina, incluse in paraffina (FFPE), o su tessuto (fresco o congelato). Non è richiesto un numero minimo di cellule.
Facciamo volentieri il lavoro al posto tuo: per velocizzare i tuoi progetti Duolink®, troverai ulteriori informazioni nel Programma di assistenza ai clienti.
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Testare gli anticorpi primari (IgG, mono o policlonali) mediante un saggio standard di immunofluorescenza (IF), immunoistochimica (IHC) o immunocitochimica (ICC) per determinare le condizioni ottimali di fissazione, blocking e titolo. I reagenti per PLA in situ Duolink® sono idonei all′uso su cellule fissate, cytospin, cresciute su vetrino, fissate in formalina, incluse in paraffina (FFPE) o su tessuto (fresco o congelato).
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Caratteristiche e vantaggi
- Non è necessaria alcuna sovraespressione o manipolazione genetica
- Elevata specificità (meno falsi positivi)
- Sensibilità alla singola molecola grazie all′amplificazione a cerchio rotante
- Possibile quantificazione relativa
- Non richiede un′apparecchiatura particolare
- Più rapida e più semplice della FRET
- Maggiore accuratezza rispetto alla co-immunoprecipitazione (co-IP)
- Risultati pronti per la pubblicazione
Componenti
- Legatura, 5 pz. - Contiene oligonucleotidi che si ibridano con le sonde PLA e tutti i componenti necessari per la legatura fatta eccezione per la ligasi.
- Ligasi, 1 pz. (1 unità/μL)
- Polimerasi, 1 pz (10 unità/μL)
- Arancio amplificazione, 5 pz. - Contiene tutti i componenti necessari all′amplificazione a cerchio rotante (RCA) fatta eccezione per la polimerasi. Contiene anche le sonde per gli oligonucleotidi marcate con un fluoroforo che si ibridano con il prodotto della RCA.
Non inclusi nel kit per il rilevamento:
Anticorpi primari, sonde PLA, tamponi di lavaggio, terreno di montaggio
Note legali
Avvertenze
Danger
Indicazioni di pericolo
Consigli di prudenza
Classi di pericolo
Resp. Sens. 1
Codice della classe di stoccaggio
10 - Combustible liquids
Certificati d'analisi (COA)
Cerca il Certificati d'analisi (COA) digitando il numero di lotto/batch corrispondente. I numeri di lotto o di batch sono stampati sull'etichetta dei prodotti dopo la parola ‘Lotto’ o ‘Batch’.
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Protocolli
This page details the Duolink® In Situ Short Protocol for fluorescence detection
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