DUO92005
Sonda in situ PLA® Duolink® Anti-coniglio MINUS
Sinonimo/i:
in situ Proximity Ligation Assay reagent, Protein Protein Interaction Assay reagent
About This Item
Prodotti consigliati
Origine biologica
donkey (polyclonal)
Livello qualitativo
Forma dell’anticorpo
affinity purified immunoglobulin (secondary antibody)
Tipo di anticorpo
primary antibodies
Nome Commerciale
Duolink®
Reattività contro le specie
rabbit
tecniche
immunofluorescence: suitable
proximity ligation assay: suitable
Compatibilità
suitable for brightfield
suitable for fluorescence
Condizioni di spedizione
wet ice
Temperatura di conservazione
2-8°C
Applicazioni
A seconda dei reagenti di rilevamento usati, si può applicare il prodotto al Protocollo di fluorescenza in situ Duolink® e al Protocollo in campo chiaro in situ Duolink®.
Per informazioni su come eseguire un esperimento Duolink®, per le applicazioni, la risoluzione dei problemi e altro, visitare il Centro risorse PLA Duolink®.
Per eseguire un esperimento PLA in situ Duolink® completo saranno necessari due anticorpi primari (convalidati per PLA, IHC, ICC o IF) che riconoscano due epitopi bersaglio. Altri reagenti necessari sono un paio di sonde PLA da specie differenti (una PLUS e una MINUS), reagenti di rivelazione, tamponi di lavaggio e un terreno di montaggio. Tenere presente che gli anticorpi primari devono provenire dalla stessa specie delle sonde PLA Duolink®. L′analisi si effettua con un′attrezzatura standard per prove di immunofluorescenza. Per la rilevazione in campo chiaro è disponibile anche l′HRP.
Specificità
La sonda PLA anti-coniglio reagisce con la molecola intera di IgG di coniglio e con le catene leggere di altre immunoglobuline′di coniglio. La sonda PLA anti-coniglio ha una minima reattività incrociata con le proteine seriniche bovine, di pollo, capra, cavie, criceto siriano, cavallo, umane, di topo, ratto e pecora. Insieme con questo prodotto si deve usare una sonda PLUS di una specie differente. Per maggiori informazioni visitare la Guida alla scelta dei prodotti.
Nota applicativa
Sono necessari due anticorpi primari prodotti in specie diverse. Analizzare gli anticorpi primari (classe IgG, mono o policlonali) in un saggio standard di immunofluorescenza (IF), immunoistochimica (IHC) o immunocitochimica (ICC) per determinare la fissazione, il blocco e le condizioni di titolazione ottimali. I reagenti PLA in situ Duolink® sono idonei all′uso su cellule fissate, cellule da centrifuga, cellule cresciute su vetrino, fissate in formalina, incluse in paraffina (FFPE), o su tessuto (fresco o congelato). Non è richiesto un numero minimo di cellule.
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La sonda per PLA anti-coniglio reagisce con l′intera molecola di IgG di coniglio e con le catene leggere di altre immunoglobuline di coniglio. La sua reattività crociata con le proteine sieriche bovine, di pollo, capra, cavia, criceto siriano, cavallo, umane, di topo, ratto e pecora è minima. Contemporaneamente a questo prodotto si deve usare una sonda PLUS di una specie differente. Per maggiori informazioni, si rimanda alla Guida alla scelta del prodotto.
Suggerimenti in merito alle applicazioni
Sono necessari due anticorpi primari ottenuti in specie diverse. Testare gli anticorpi primari (IgG, mono o policlonali) mediante un saggio standard di immunofluorescenza (IF), immunoistochimica (IHC) o immunocitochimica (ICC) per determinare le condizioni ottimali di fissazione, blocking e titolo. I reagenti per PLA in situ Duolink® sono idonei all′uso su cellule fissate, preparazioni cytospin, cellule cresciute su vetrino, fissate in formalina, incluse in paraffina (FFPE) oppure su tessuti (freschi o congelati). Non è necessario disporre di un numero minimo di cellule.
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Caratteristiche e vantaggi
- Non è necessaria alcuna sovraespressione o manipolazione genetica
- Elevata specificità (meno falsi positivi)
- Sensibilità alla singola molecola grazie alla replica a cerchio rotante.
- Possibile quantifica relativa
- Non richiede apparecchiatura speciale
- Più rapida e più semplice della FRET
- Maggiore accuratezza rispetto alla co-immunoprecipitazione (co-IP)
- Risultati pronti per la pubblicazione
Componenti
- Sonde 5x PLA Anti-coniglio MINUS - Anticorpo asinino secondario anti-coniglio coniugato con oligonucleotide MINUS
- 1 soluzione di blocco, reagente per bloccare il campione
- 1 diluente dell′anticorpo - per la diluizione delle sonde PLA e degli anticorpi primari
Note legali
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Codice della classe di stoccaggio
10 - Combustible liquids
Certificati d'analisi (COA)
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Things to consider for preparation, setup and execution of the Duolink® assay protocol
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Protocolli
This protocol describes the use of Duolink® PLA reagents for the brightfield detection, visualization, and quantification of individual proteins, protein modifications, and protein interactions in tissue and cell samples.
Protocol for use of Duolink® PLA reagents for the detection of individual proteins, protein modifications, and protein-protein interactions within cell populations by flow cytometry.
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