推荐产品
重組細胞
expressed in E. coli
品質等級
形狀
liquid
包裝
vial of 50 μL
濃度
20 ng/μL in TE buffer; DNA (1μg of plasmid DNA)
啟動子
Promoter name: CMV
報告基因
GFP
選擇
kanamycin
運輸包裝
dry ice
儲存溫度
−20°C
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一般說明
共表达GFP的Cas9-D10A切口酶表粒使用CMV启动子,可获得较强的Cas9-D10A 瞬时表达。您可以使用MluI和NheI酶切将CMV替换为其它启动子。同时,使用XbaI酶切可使Cas9D10A表达质粒线性化,得到基于T7的mRNA产物。
應用
功能基因组
使用配对Cas9 切口酶+GFP 用于:
使用配对Cas9 切口酶+GFP 用于:
- 在多种细胞系中进行基因敲除
- 对不适合于RNAi的基因进行完全敲除
- 建立基因敲入细胞系,将启动子、融合标签或报告基因整合到内源性基因中
CMV-CAS9D10A-2A-GFP Plasmid has been used in CRISPR-Cas9 mutagenesis to truncate the forkhead box O3 (FOXO3) gene in the mammalian cell.
成分
每管包含1μg的 Cas9-D10A 切口酶-GFP质粒。
请注意,该产品不含向导RNA序列。向导RNA必须通过定制CRISPR配对切口酶产品选项卡单独购买。
请注意,该产品不含向导RNA序列。向导RNA必须通过定制CRISPR配对切口酶产品选项卡单独购买。
外觀
1μg Sigma Cas9-D10A 切口酶-GFP 质粒
其他說明
来自酿脓链球菌的II型CRISPR/Cas系统经过包含两种分子元件,即一个Cas9蛋白和一个非编码向导RNA(gRNA),该系统经过基因改造而被用于真核系统中。Cas9核酸内切酶可在单个gRNA的引导下,在指定基因组位置上引入DNA双链断裂(DSB)。与锌指核酸酶(ZFN)诱导的DSB相似,细胞随后会激活内源性DNA修复程序,即非同源性末端接合(NHEJ)或同源重组修复机制(HDR),对目标DSB进行修复。GFP通过2A肽段连接,与Cas9切口酶蛋白的相同mRNA共表达,实现了对转染效率的追踪,也能通过荧光激活细胞分选术(FACS)对基因组编辑活性进行富集。
法律資訊
CRISPR专利正在申请中
儲存類別代碼
10 - Combustible liquids
水污染物質分類(WGK)
nwg
閃點(°F)
Not applicable
閃點(°C)
Not applicable
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A protocol for custom CRISPR Cas9 donor vector construction to truncate genes in mammalian cells using pcDNA3 backbone
BMC Molecular Biology, 19(1), 3-3 (2018)
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