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Mezcla lista para usar de inicio en caliente KAPA2G Fast

2 ×, with dye

• Sinónimos: PCR
• Código UNSPSC: 41106300
• NACRES: NA.55

Propiedades

• Nivel de calidad: 100
• uso: sufficient for 100 reactions; sufficient for 500 reactions
• caducidad: ≤18 mo.
• Características: Fast PCR; Multiplex PCR; dNTPs included; hotstart
• envase: kit of 1.25 mL (100 x 25 μL rxn; KK5608); kit of 6.25 mL (500 x 25 μL rxn; KK5609)
• fabricante / nombre comercial: Roche
• concentración: 2 ×
• técnicas: PCR: suitable
• entrada: purified DNA
• temp. de almacenamiento: −20°C

Descripción

Descripción general

La ADN polimerasa KAPA2G Fast es una enzima de segunda generación (2G) diseñada mediante genotecnología para conseguir mayor procesividad y velocidad, ofreciendo tasas de extensión significativamente más rápidas que la polimerasa Taq natural. Además de la velocidad, la KAPA2G Fast proporciona un rendimiento y una sensibilidad superiores a las manifestadas por las enzimas de la competencia en una amplia variedad de muestras.
Los kits de ADN polimerasa KAPA2G Fast están diseñados para una PCR rápida, en la que los tiempos de reacción totales son un 20-70 % más cortos que los de las PCR convencionales realizadas con la ADN polimerasa Taq natural. Esto puede conseguirse sin sacrificar el rendimiento de la reacción y no requiere fungibles ni termocicladores especializados para PCR.
La ADN polimerasa KAPA2G Fast HotStart^® se suministra en un práctico formato de mezcla lista para utilizar ReadyMix 2X y exenta de cebadores y plantilla. La mezcla ReadyMix contiene ADN polimerasa KAPA2G Fast HotStart (0,5 U por 25 μl de reacción) en un tampón de reacción patentado que contiene dNTP (0,2 mM de cada dNTP a 1X), MgCl₂ (1,5 mM a 1X) junto con estabilizadores.

Aplicación

La mezcla KAPA2G Fast HotStart^® ReadyMix^™ se ha utilizado en:

• PCR habitual
• PCR rápida
• Genotipado
• PCR múltiple de colonia específica de alelo (MASC-PCR)
• Genotipado mediante reacción en cadena de la polimerasa (PCR)

Acciones bioquímicas o fisiológicas

El ADN generado por la ADN polimerasa KAPA2G Fast HotStart^® puede utilizarse en análisis o aplicaciones sistemáticos posteriores, como la digestión mediante enzimas de restricción, la clonación y la secuenciación. Igual que la Taq natural , la KAPA2G Fast tiene actividades 5′→3 polimerasa′ y 5′→3′ exonucleasas, pero no actividad 3′→5′ exonucleasa (corrección de errores). La fidelidad de la KAPA2G Fast es similar a la de la Taq natural; tiene una tasa de error de aproximadamente 1 error por cada 1,7 x 10⁵ nucleótidos incorporados.

Características y beneficios

Reduce los tiempos de ciclado en hasta un 75 %:

• Tiempos de extensión de tan sólo 1 segundo por kilobase
• Amplia cobertura de plantillas ricas en AT y en GC.

Alta velocidad, mayor rendimiento:

• Sensibilidad de copia única de muestras complejas
• Mayor producción

Notas rápidas:

• Los kits para PCR KAPA2G Fast HotStart ReadyMix contienen la ADN polimerasa de inicio en caliente KAPA2G Fast diseñada para una PCR rápida.
• Utilice un tiempo de extensión de 1 segundo para amplicones de <1 kb y 15 segundos/kb para amplicones más largos, y ahorre entre un 20 y un 70 % de tiempo de reacción total.
• Sin necesidad de equipos ni fungibles de PCR especializados.
• El sistema amortiguador optimizado ofrece mejores rendimientos, especificidad y sensibilidad, facilitando una hibridación eficiente del cebador en una amplia variedad de longitudes de cebador, contenido de GC y temperaturas de fusión.
• Para una elevada eficiencia de reacción, no deben superarse los volúmenes de reacción de 25 μl.
• La mezcla de reacción KAPA2G Fast HotStart ReadyMix contiene MgCl₂ 1,5 mM a concentración 1X.
• La mezcla KAPA2G Fast HotStart ReadyMix con colorante incluye dos colorantes de seguimiento inertes para permitir la carga directa en geles de agarosa.
• Los productos de reacción tienen una cola de 3′-dA y pueden clonarse en vectores de clonación TA.

Calidad

Se confirma que cada lote de ADN polimerasa KAPA2G Fast contiene <2 % de proteínas contaminantes (valoración Agilent Protein 230). La mezcla lista para usar KAPA2G Fast ReadyMix está sometida a estrictas pruebas de control de calidad, carece de actividad exonucleasa y endonucleasa contaminante y cumple estrictos requisitos con respecto a los niveles de contaminación por ADN.

Nota de preparación

Verifique siempre que el producto se ha descongelado por completo y se ha mezclado bien antes de su uso. Los reactivos pueden conservarse a 4°C durante poco tiempo (hasta 1 mes). Para un almacenamiento prolongado, retornar a -20°C. Siempre que todos los componentes se hayan manipulado con cuidado y no se hayan contaminado, no cabe esperar que el kit se altere si se deja (accidentalmente) a temperatura ambiente un breve espacio de tiempo (hasta 3 días). No se recomienda su conservación prolongada a temperatura ambiente y a 4°C. Tenga en cuenta que los reactivos conservados por encima de -20°C son más propensos a la degradación cuando se contaminan durante su uso y, por consiguiente, la conservación a esas temperaturas es por cuenta y riesgo del usuario.

Otras notas

*Para uso exclusivo en investigación. No indicada para procedimientos diagnósticos.

Información legal

HOTSTART is a registered trademark of Molecular BioProducts, Inc.

ReadyMix is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC

Información de seguridad

• Pictogramas: GHS08
• Palabra de señalización: Warning
• Frases de peligro: H371
• Consejos de prudencia: P260 - P264 - P270 - P308 + P311 - P405 - P501
• Clasificaciones de peligro: STOT SE 2
• Código de clase de almacenamiento: 12 - Non Combustible Liquids
• Clase de riesgo para el agua (WGK): WGK 1
• Punto de inflamabilidad (°F): does not flash
• Punto de inflamabilidad (°C): does not flash