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Purificazione di DNA & RNA

Struttura del DNA – Per la purificazione del DNA si possono usare diversi metodi

L'estrazione di DNA e RNA è una metodica di base utilizzata in biologia molecolare. Riuscire ad ottenere degli acidi nucleici di alta qualità e purezza è importante per un'ampia gamma di ricerche e di applicazioni cliniche. La purificazione degli acidi nucleici rappresenta il passaggio iniziale per molte applicazioni di biologia molecolare e genomica.

I campioni di DNA e RNA sono spesso ottenuti da preparazioni grezze. Il DNA genomico, il DNA plasmidico e l'RNA totale possono essere estratti e purificati da una varietà di fonti tra cui cellule batteriche e di mammifero, tessuti vegetali, tessuti fungini, tessuti di mammifero, sangue, plasma, siero, virus, tamponi buccali e nasali, matrici di gel, PCR e altre reazioni enzimatiche. L'isolamento dell'acido nucleico da questi campioni spesso comporta la lisi delle membrane cellulari o l'omogeneizzazione del campione, seguita dalla rimozione di proteine, enzimi, detergenti, sali e lipidi.

Gli approcci comuni includono:

  • estrazione alcalina
  • estrazione in fenolo-cloroformio
  • centrifugazione su gradiente di densità di cloruro di cesio (CsCl)
  • cromatografia su cellulosa con oligo(dT)
  • matrici di silice
  • microsfere di vetro
  • farina fossile
  • cromatografia a scambio anionico
  • cromatografia ad esclusione dimensionale


Il metodo migliore per la purificazione viene scelto in base all’applicazione finale. Le applicazioni possibili includono PCR, qPCR, digestione con enzimi di restrizione, ligazione, clonaggio, genotipizzazione, analisi dell'espressione genica, sequenziamento di nuova generazione (NGS) e Northern e Southern bloting

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