Purificazione di anticorpi
Gli anticorpi monoclonali e policlonali sono comunemente usati nella ricerca di base e nella scoperta di nuovi farmaci. Inoltre i farmaci biologici a base di anticorpi rappresentano una frazione sempre crescente delle nuove terapie. La cromatografia di affinità basata su resine reticolate con proteina A, proteina G e proteina L svolge un ruolo importante nell'isolamento e nella produzione di anticorpi purificati, per i flussi di lavoro su scala di laboratorio, di processo e industriale.
Microsfere di agarosio e gel di affinità
Le microsfere di agarosio e i gel di affinità consentono la purificazione dell'anticorpo utilizzando la proteina A o la proteina G legate a microsfere di agarosio. Adatte alla purificazione su piccola e larga scala, queste resine sono usate per purificazione su colonna a flusso di gravità, centrifugazione a bassa velocità nel processamento in modalità in discontinuo (batch) e procedure di cromatografia a bassa pressione. I gel di affinità EZview™ incorporano un colorante rosso che consente all'utente di differenziare facilmente il pellet dal surnatante, con conseguente minore perdita di proteine durante la purificazione in batch. I kit di immunoprecipitazione includono gel di affinità, mini colonnine da microcentrifuga e reagente di lisi e sono progettati specificamente per consentire il massimo recupero di proteine dagli immunoprecipitati.
Resine di agarosio Fast Flow Sepharose™ e Fast Flow
Le resine Fast Flow Sepharose™ e Fast flow agarose utilizzano microsfere di agarosio o gel di agarosio altamente reticolati in grado di resistere a pressioni più elevate rispetto alle resine di microsfere di agarosio tradizionali. Ciò rende queste resine adatte ai metodi di purificazione mediante cromatografia liquida rapida delle proteine. Queste resine sono consigliate per la purificazione di anticorpi su scala medio-grande.
Sistema di microsfere magnetiche PureProteome™
Le microsfere magnetiche PureProteome™ con proteina A, proteina G e proteina A/G forniscono un modo rapido e riproducibile per purificare le immunoglobuline da miscele complesse come campioni di siero, plasma o surnatante di colture cellulari. Gli anticorpi vengono purificati utilizzando un rack o una piattaforma magnetici che separano le microsfere dalle frazioni di lavaggio e di eluizione. Questa procedura è adatta sia per basse processività, utilizzando provette da microcentrifuga singole, che per processività maggiori mediante automazione.
Colonne e resine per cromatografia Cytiva™ Amersham
È disponibile un'ampia gamma di resine per cromatografia Cytiva™ Amersham per la purificazione di anticorpi monoclonali e policlonali da diverse fonti.
- Le colonne GraviTrap™ sono colonne a flusso per gravità preimpaccate progettate per la purificazione manuale rapida ed efficiente di anticorpi monoclonali e policlonali e frammenti di anticorpi da surnatante di cellule e fluidi biologici
- Le colonne SpinTrap™ sono colonnine da microcentrifuga monouso preimpaccate per la purificazione su piccola scala di anticorpi o per l'arricchimento in proteine specifiche.
- Le colonne HiTrap™ HP sono preimpaccate con resina Sepharose™ High Performance con proteina A o proteina G, per la purificazione preparativa di routine di anticorpi monoclonali e policlonali come le IgG umane. Le colonne HiTrap™ MabSelect sono preimpaccate con resina MabSelect, una resina per bioprocesso per la cattura di anticorpi monoclonali (Mabs) da grandi volumi di campione.
- Le piastre filtranti MultiTrap™ a 96 pozzetti costituiscono un formato rapido e affidabile per la purificazione di anticorpi su piccola scala o per l’arricchimento di proteine d’interesse. Queste piastre filtranti preimpaccate possono essere sottoposte a centrifugazione o a filtrazione col vuoto, manualmente o con sistemi robotici automatizzati.
- Le colonne HiScreen™ Capto L sono preimpaccate con Capto L, una resina per cromatografia di affinità per bioprocesso per la cattura di anticorpi e frammenti di anticorpi come frammenti Fab, frammenti variabili a catena singola (scFv) e anticorpi di dominio (Dabs). Le colonne HiScreen™ Capto L fanno parte della piattaforma di sviluppo del processo. Queste colonne rappresentano una scelta eccellente per l'ottimizzazione del metodo e lo screening dei parametri.
- Le colonne HiScreen™ MabSelect™ sono preimpaccate con resina MabSelect™ e fanno parte della piattaforma di sviluppo del processo disponibile da Cytiva. La resina MabSelect™ è una resina per bioprocesso per la cattura di anticorpi monoclonali da grandi volumi di campioni. Queste colonne rappresentano una scelta eccellente per l'ottimizzazione del metodo e lo screening dei parametri per la cattura di anticorpi monoclonali.
- Le resine Mag Sepharose™ con proteina A e proteina G sono costituite da sfere magnetiche a base di sefarosio progettate per semplificare l'arricchimento in proteinebersaglio mediante immunoprecipitazione o applicazioni pull-down e possono essere utilizzate per la purificazione rapida e su piccola scala e lo screening di anticorpi monoclonali e policlonali da siero e surnatanti cellulari.
- GammaBind e GammaBind Plus Sepharose™ sono resine per cromatografia di affinità con proteinaG per la purificazione di immunoglobuline (IgG) da una varietà di specie e vengono utilizzate per analizzare e purificare classi, sottoclassi e frammenti di immunoglobuline da qualsiasi fluido biologico o terreno di coltura cellulare. Questa resina è particolarmente adatta per le procedure di immunoprecipitazione.
- Le resine Sepharose™, Sephaose™ Fast Flow, Capto L e MabSelect™, con proteina A e proteina G, sono disponibili anche separatamente per i passaggi di scala.
Tabella: affinità delle immunoglobuline per proteina A/proteina G/proteina L |
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