S4438

SYBR^® Green JumpStart^™ Taq ReadyMix^™

for quantitative PCR, MgCI₂ in buffer

• Sinonimo/i: Hot start PCR master mix, sybr green PCR master mix, sybr green qPCR
• Numero MDL: MFCD03458666
• Codice UNSPSC: 41106300
• NACRES: NA.55

Proprietà

• Livello qualitativo: 200
• Forma fisica: liquid
• impiego: sufficient for 100 reactions; sufficient for 20 reactions; sufficient for 500 reactions
• Caratteristiche: dNTPs included; hotstart
• Concentrazione: 1.25 units/reaction (50 μL reaction volume)
• tecniche: qPCR: suitable
• input: purified DNA
• Compatibilità: suitable for (quantitative PCR); ABI 7000; ABI 7300; ABI 7500 Fast; ABI 7500; ABI 7700; ABI 7900 HT Fast; ABI 7900 HT; ABI 7900; ABI StepOne; ABI StepOnePlus; ABI ViiA 7 ; Bio-Rad CFX384; Bio-Rad CFX96; Bio-Rad MJ Chromo4; Bio-Rad MJ Opticon 2 ; Bio-Rad MJ Opticon; Bio-Rad MiniOpticon; Bio-Rad MyiQ; Bio-Rad iCycler iQ; Bio-Rad iQ 5; Cepheid SmartCycler; Eppendorf^® Mastercycler ep realplex ; Eppendorf^® Mastercycler ep realplex2 S; Illumina Eco qPCR; Qiagen Corbett Rotor-Gene 3000; Qiagen Corbett Rotor-Gene 6000; Qiagen Corbett Rotor-Gene Q; Roche LightCycler 480 ; Strategene Mx3000P; Strategene Mx3005P; Strategene Mx4000; for use with ABI 5700
• applicazioni: agriculture
• Metodo di rivelazione: SYBR^® Green
• Condizioni di spedizione: wet ice
• Temperatura di conservazione: −20°C

Descrizione

Descrizione generale

SYBR^® Green I è adatto alla quantificazione di qualsiasi sequenza di DNA. Il colorante si lega al DNA a doppio filamento e il rilevamento viene monitorato misurando l'aumento della fluorescenza dopo i vari cicli di PCR.

SYBR^® Green JumpStart^™ Taq ReadyMix^™ unisce le prestazioni ottimizzate dell′anticorpo JumpStart Taq per PCR hot start con colorante SYBR Green I alla praticità di una soluzione ReadyMix facile da usare. È una miscela pronta all′uso costituita da SYBR Green I, complesso JumpStart Taq DNA polimerasi, desossinucleotidi puri al 99% e tampone di reazione, per maggiore comodità fornita in un concentrato 2×. Basta aggiungere 25 μL della miscela 2× a DNA stampo, primer e acqua. L′anticorpo JumpStart Taq inattiva la DNA polimerasi a temperatura ambiente. Quando la temperatura viene portata oltre i 70 °C, nella prima fase di denaturazione del processo di ciclizzazione, il complesso si dissocia e la polimerasi diviene completamente attiva. Il complesso JumpStart Taq DNA polimerasi impedisce l′amplificazione aspecifica permettendo di ottenere valori di C_T più accurati.

Applicazioni

SYBR^® Green JumpStart^™ Taq ReadyMix^™ è stata usata:

• nella PCR quantitativa (qPCR) per amplificare una singola area conservata in tutte le varianti dei geni della proteina basica della mielina (MBP), di SRY-Box 10 (sox10) e della β-actina
• nella PCR quantitativa real-time per rilevare l'accumulo dei prodotti di PCR a ogni singolo ciclo di amplificazione
• nelle amplificazioni di routine mediante qPCR di DNA stampo e di cDNA
• per amplificare l'RNA mediante PCR quantitativa real-time con trascrittasi inversa (qRT-PCR).

Caratteristiche e vantaggi

• Offre i vantaggi della PCR hot start inattivata da anticorpo con rilevamento tramite colorante SYBR Green in una miscela ReadyMix ideale per applicazioni a produttività elevata; sono richiesti soltanto i primer e lo stampo.
• Il complesso JumpStart^™ Taq DNA polimerasi impedisce l′amplificazione di prodotti aspecifici, con conseguente maggiore efficienza e maggiore resa del target.
• SYBR^® Green JumpStart^™ Taq ReadyMix per qPCR basata su SYBR contiene MgCl₂ nella formulazione oppure in un flaconcino separato, per facilitare l'ottimizzazione della reazione. Le ReadyMix sono compatibili sia con i termociclatori che utilizzano provette, sia piastre.
• Questa master mix garantisce riproducibilità tra una reazione e l'altra.
• Progettata per ridurre al minimo la possibilità di contaminazione.
• Ridotta formazione di dimeri di primer.
• Tempi di allestimento ridotti rispetto alle metodiche HotStart^® manuali o con biglie di cera.
• Consente di allestire la reazione a temperatura ambiente e contiene un colorante fluorescente, il che la rende ideale per le applicazioni di qPCR.

Confezionamento

Il volume di reazione predefinito è di 50 μL.

La confezione di 20RXN è da 1 X 500 μL.
La confezione di 100RXN è da 1 X 2,5 mL.
La confezione di 400RXN è da 1 x 10 mL.
La confezione di 500RXN è da 1 x 12,5 mL.

Principio

SYBR Green JumpStart Taq ReadyMix è consigliata per esperimenti di amplificazione in tempo reale di singoli prodotti e può essere inoltre utilizzata per l′ottimizzazione della PCR prima della produzione di sonde marcate con sostanze fluorescenti. Le sonde marcate con sostanze fluorescenti non sono consigliate per l′uso con il colorante SYBR Green I.

SYBR Green I è un colorante fluorescente legante il DNA di uso comune che lega tutto il DNA a doppio filamento. Il rilevamento viene monitorato misurando l′aumento della fluorescenza nel corso del ciclo. SYBR Green I presenta un limite massimo di eccitazione di 494 nm e un limite massimo di emissione di 521 nm. Le impostazioni dello strumento relative al colorante di riferimento ROX sono soddisfacenti per la misurazione del colorante di riferimento per la PCR quantitativa. La specificità del rilevamento con QPCR basata su SYBR di Sigma è notevolmente migliorata dall′integrazione di una taq polimerasi mediata hot-start, ovvero JumpStart Taq.

Note legali

L′utilizzo di questo prodotto è coperto da uno o più brevetti USA tra i seguenti e dalle corrispondenti richieste di brevetto al di fuori degli USA: 5,994,056 e 6,171,785. L′acquisto di questo prodotto include un′immunità limitata e non trasferibile dalle azioni giudiziarie ai sensi delle suddette rivendicazioni di brevetto per l′utilizzo limitato a questa quantità di prodotto per la ricerca interna dell′acquirente. Non è espresso esplicitamente, implicitamente o per malafede alcun diritto ai sensi di qualsiasi altra richiesta di brevetto (come ad esempio le richieste per apparati o sistemi nel brevetto USA n. 6,814,934), alcun diritto a prestare servizi commerciali di qualsiasi tipo, inclusa senza limitazioni la comunicazione dei risultati delle attività degli acquirenti a fronte di un pagamento o di altro corrispettivo commerciale. Questo prodotto è destinato esclusivamente a scopi di ricerca. Gli usi diagnostici brevettati da Roche richiedono una licenza separata di Roche. Ulteriori informazioni sull′acquisto di licenze possono essere ottenute contattando il Direttore Licenze, Applied Biosystems, 850 Lincoln Centre Drive, Foster City, California 94404, USA.

Eppendorf is a registered trademark of Eppendorf AG

HOTSTART is a registered trademark of Molecular BioProducts, Inc.

JumpStart is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC

ReadyMix is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC

SYBR is a registered trademark of Life Technologies

Informazioni sulla sicurezza

• Pittogrammi: GHS07,GHS09
• Avvertenze: Warning
• Indicazioni di pericolo: H315,H317,H319,H410
• Consigli di prudenza: P261 - P264 - P273 - P280 - P302 + P352 - P305 + P351 + P338
• Classi di pericolo: Aquatic Acute 1 - Aquatic Chronic 1 - Eye Irrit. 2 - Skin Irrit. 2 - Skin Sens. 1
• Codice della classe di stoccaggio: 10 - Combustible liquids
• Punto d’infiammabilità (°F): Not applicable
• Punto d’infiammabilità (°C): Not applicable