DN25

Desossiribonucleasi I

lyophilized powder, Protein ≥85 %, ≥400 Kunitz units/mg protein

• Sinonimo/i: Desossiribonucleasi, DNasi I, Desossi-ribonucleato 5′-oligonucleotido-idrolasi
• Numero CAS: 9003-98-9
• Classificazione EC (Enzyme Commission): 3.1.21.1 (BRENDA, IUBMB)
• Numero CE: 232-667-0
• Numero MDL: MFCD00130918
• Codice UNSPSC: 12352204
• NACRES: NA.54

Proprietà

• Origine biologica: bovine pancreas
• Livello qualitativo: 300
• Forma fisica: lyophilized powder
• Attività specifica: ≥400 Kunitz units/mg protein
• PM: ~31 kDa
• Composizione: Protein, ≥85%
• tecniche: DNA extraction: suitable
• Solubilità: 0.15 M NaCl: soluble 5.0 mg/mL, hazy
• Compatibilità: suitable for molecular biology
• applicazioni: diagnostic assay manufacturing; diagnostic assay manufacturing
• Attività estranea: RNase ≤0.02%
• Condizioni di spedizione: wet ice
• Temperatura di conservazione: −20°C

Descrizione

Descrizione generale

DNase I, or Deoxyribonuclease I, is an endonuclease isolated from bovine pancreas.

• Our DNase I Digests double str and single stranded DNA into oligo and mononucleotides.
• La DNasi pancreatica bovina esiste sotto forma di quattro isozimi con punti isoelettrici (per A, B, C e D): 5,2, 4,96, 5,06 e 4,78. La forma predominante è la A, con quantità minori di B e C e minime di D.
• DNase I structure resembles the structure of to exonuclease III. It includes two central ß sheets. ββ Questa struttura è circondata dalle regioni dell′ansa estesa e dell′α-elica. La struttura di questo enzima è simile a quella dell′esonucleasi III.^[1]

Applicazioni

• Decreases viscosity providing better yields by removing DNA in primary cell isolation:
• Incorporating labelled bases into DNA: DNA nick
• Radioactive labelling
• Bioprocessing applications: DNA removal
• Eliminating genomic DNA from RNA preparations before RT-PCR
• Nick translation
• DNase footprinting
• Actin regulation of actin polymerization in cells, and cell apoptosis
• UV crosslinking of proteins to nucleic acids

Usato per rimuovere DNA da campioni di proteine.

Azioni biochim/fisiol

La DNasi I è un′endonucleasi che agisce sui legami fosfodiesterici adiacenti alle pirimidine per produrre polinucleotidi con fosfati 5′-terminali. In presenza di Mg²⁺, la DNasi taglia ciascun filamento di DNA indipendentemente e i siti di clivaggio sono casuali. Invece, in presenza di Mn²⁺ i due filamenti di DNA vengono tagliati approssimativamente alla stessa altezza. Cationi bivalenti come Mn²⁺, Ca²⁺, Co²⁺, e Zn²⁺ sono attivatori dell′enzima. Una concentrazione di Ca²⁺ 5 mM stabilizza l′enzima contro la digestione proteolitica. Il pH ottimale è fra 7 e 8. La DNasi I da pancreas bovino consiste di quattro componenti, A, B, C, e D, distinguibili cromatograficamente, i primi tre in rapporto molare 4:1:1. Si trova solo una piccola quantità di D. 2-Mercaptoetanolo, chelanti, sodio dodecilsolfato (SDS) e actina sono noti inibitori dell′attività enzimatica.

Caratteristiche e vantaggi

Our Deoxyribonuclease DNAse I,is essentially RNAse free product, which support the product application.

Definizione di unità

Un′unità Kunitz produrrà una variazione in A₂₆₀ pari a 0,001 per minuto per mL a pH 5,0 e 25 °C, usando DNA tipo I o III come substrato.

Stato fisico

Preparazione grezza, contiene cloruro di calcio

Nota sulla preparazione

Una soluzione di DNAsi I 10 mg/mL in NaCl 0,15 M può perdere <10% della sua attività quando conservata per una settimana in aliquote a −20 °C. Le stesse soluzioni conservate a 2-8 °C possono perdere circa il 20% dell′attività. Rimane attiva fino a cinque ore a 60 °C a pH fra 5 e 7 e perde la sua attività in <10 minuti a 68 °C. L′attività decade del 6% all′ora in tampone acetato (a pH 5,0) e tris (a pH 7,2) alla concentrazione di 1 mg/mL.

Risultati analitici

Proteine determinate con il metodo del biureto.

Informazioni sulla sicurezza

• Pittogrammi: GHS08
• Avvertenze: Danger
• Indicazioni di pericolo: H334
• Consigli di prudenza: P261 - P284 - P501
• Classi di pericolo: Resp. Sens. 1
• Codice della classe di stoccaggio: 11 - Combustible Solids
• Classe di pericolosità dell'acqua (WGK): WGK 3
• Punto d’infiammabilità (°F): Not applicable
• Punto d’infiammabilità (°C): Not applicable
• Dispositivi di protezione individuale: Eyeshields, Gloves, type N95 (US)