MABS1254

Anticorpo anti-O-GlcNAc, clone CTD110.6

clone CTD110.6, from mouse

• Sinonimo/i: O-GlcNAc, beta-O-GlcNAc, O-Linked N-Acetylglucosamine, beta-O-linked N-acetylglucosamine
• Codice UNSPSC: 12352203
• eCl@ss: 32160702
• NACRES: NA.41

Proprietà

• Origine biologica: mouse
• Livello qualitativo: 100
• Forma dell’anticorpo: purified immunoglobulin
• Tipo di anticorpo: primary antibodies
• Clone: CTD110.6, monoclonal
• Reattività contro le specie (prevista in base all’omologia): all
• tecniche: ELISA: suitable; immunoprecipitation (IP): suitable; western blot: suitable
• Isotipo: IgMκ
• modifica post-traduzionali bersaglio: glycosylation
• Informazioni sul gene: human ... OGT(8473)

Descrizione

Descrizione generale

La modifica post-traduzionale delle proteine mediante l′aggiunta di N-acetilglucosammina β-linked (β-GlcNAc) sugli idrossili dei residui di serina o treonina è chiamata β-GlcNAc O-linked o semplicemente O-GlcNAc. O-GlcNAc rappresenta una delle modificazioni post-traduzionali più frequenti all′interno dei compartimenti nucleo-citoplasmatici di tutte le specie animali e vegetali. Diversamente da altri tipi di glicosilazioni proteiche, la modificazione O-GlcNAc avviene esclusivamente all′interno dei compartimenti nucleare e citoplasmatico e generalmente la proteina non subisce ulteriori modifiche che ne allunghino la struttura. Inoltre, la O-GlcNAcilazione è un processo reversibile e altamente dinamico. La O-GlcNAc transferasi (OGT) attacca O-GlcNAc su specifici residui di serina o treonina della proteina, mentre la O-GlcNAcasi catalizza la rimozione/idrolisi di O-GlcNAc dalle proteine. Infatti, la mutua interazione dinamica tra O-GlcNAcilazione e fosforilazione di serina/treonina svolge un ruolo importante nella regolazione della trasduzione del segnale cellulare. Tau e RNA polimerasi II (Pol II) sono due proteine ben note che vanno incontro a O-GlcNAcilazione. Nel cervello di pazienti affetti da malattia di Alzheimer, la proteina tau diventa estensivamente fosforilata e meno O-GlcNAcilata. Analogamente, quando durante la trascrizione inizia la fase dell′allungamento, O-GlcNAc viene rimossa dal dominio C-terminale (CTD) della DNA polimerasi II e sostituita con O-fosfato.

Specificità

Il clone CTD110.6 ha permesso di rilevare in modo specifico i residui di serina e treonina con beta-O-GlcNAc O-linked ma non quelli con alfa-O-GlcNAc O-linked. La presenza di GlcNAc, ma non quella di GalNAc, ha impedito la rivelazione della modificazione di interesse. Il clone CTD110.6 non ha riconosciuto i peptidi contenenti residui di serina e treonina non modificati (Comer, F.I., et al. (2001). Anal. Biochem. 293(2): 169-177).

La modificazione di interesse non è specie-specifica.

Immunogeno

Epitopo: beta-GlcNAc O-linked.

Peptide coniugato con KLH e avente un residuo di serina modificato con O-GlcNAc.

Applicazioni

Categoria di ricerca
Trasduzione del segnale

L′anticorpo anti-O-GlcNAc, clone CTD110.6, è un anticorpo mirato contro O-GlcNAc per l′uso nei saggi di Western blotting, ELISA e immunoprecipitazione.

Sottocategoria di ricerca
Modificazioni post-traduzionali generali

Western blotting: un lotto rappresentativo alla concentrazione di 1,0 µg/mL ha permesso di rivelare le proteine O-GlcNAcilate in 7,5-15 µg di lisato di fibroblasti embrionali di topo (MEF) wild-type, ma non di lisato di MEF con deficit di O-GlcNAc transferasi (OGT) (per gentile concessione di Dr. Natasha Zachara e Gokben Yildirir, M.S.).
Saggio ELISA: con un lotto rappresentativo è stato rivelato il peptide (YSPTSPS) del dominio C-terminale (CTD) della RNA polimerasi II che presenta una singola serina o treonina O-GlcNAcilata ma non il corrispondente peptide non modificato (Comer, F.I., et al. (2001). Anal. Biochem. 293(2):169-177.)
Immunoprecipitazione: un lotto rappresentativo ha determinato l'immunoprecipitazione delle proteine O-GlcNAcilate da cellule staminali totipotenti umane (hPSC) (Maury, J.J., et al. (2013). Stem Cell Res. 11(2):926-937.)
Immunoprecipitazione: un lotto rappresentativo ha determinato l'immunoprecipitazione delle proteine O-GlcNAcilate da estratti di cellule HeLa (Comer, F.I., et al. (2001). Anal. Biochem. 293(2):169-177).
Saggio di Western blotting: un lotto rappresentativo ha permesso di rivelare livelli paragonabili di O-GlcNAcilazione in cellule staminali totipotenti umane (hPSC) indifferenziate, in fase di differenziamento e differenziate in modo terminale (Maury, J.J., et al. (2013). Stem Cell Res. 11(2):926-937).
Saggio di Western blotting: con un lotto rappresentativo è stato rivelato il peptide (YSPTSPS) del dominio C-terminale (CTD) della RNA polimerasi II BSA-coniugato e con beta-O-GlcNAc ma non con alfa-O-GlcNAc né con il corrispondente peptide non modificato. La presenza di GlcNAc, ma non quella di GalNAc, ha impedito la rivelazione delle bande di interesse (Comer, F.I., et al. (2001). Anal. Biochem. 293(2):169-177).
Saggio di Western blotting: un lotto rappresentativo ha permesso di rivelare le proteine O-GlcNAcilate nell'estratto nucleare di cellule HeLa e le proteine O-GlcNAcilate nell'estratto nucleare e citosolico di cellule HeLa purificate mediante colonna di agglutinina di germe di grano (WGA). Bloccando gli anticorpi con il peptide immunogeno prima dell'immunoblotting non è stato possibile rivelare le bande di interesse (Comer, F.I., et al. (2001). Anal. Biochem. 293(2):169-177).
Saggio di Western blotting: un lotto rappresentativo ha permesso di rivelare la modulazione positiva (up-regulation) delle proteine O-GlcNAcilate in cellule Jurkat trattate con PUGNAc, un inibitore della glucosamminidasi, e con glucosammina, il prodotto intermedio della via dell'esosammina (Comer, F.I., et al. (2001). Anal. Biochem. 293(2): 169-177).

Qualità

Valutata mediante Western blotting su lisato di cellule HeLa.

Saggio di Western blotting: questo anticorpo alla concentrazione di 4,0 µg/mL ha permesso di rivelare le proteine O-GlcNAcilate in 10 µg di lisato di cellule HeLa.

Descrizione del bersaglio

Variabile, dipendente dalle dimensioni della(e) proteina(e) O-GlcNAcilata(e).

Stato fisico

Formato: purificato

IgMκ monoclonali purificate di topo in PBS contenente azoturo di sodio 0,05%.

Stoccaggio e stabilità

Stabile per 1 anno a 2-8 °C dalla data di ricevimento.

Altre note

Concentrazione: fare riferimento alla scheda tecnica specifica del lotto.

Esclusione di responsabilità

Salvo diversa indicazione nel nostro catalogo o in altra documentazione fornita dall′azienda insieme al prodotto, i nostri prodotti sono destinati esclusivamente a scopi di ricerca e non devono essere utilizzati per altre finalità, inclusi a titolo esemplificativo ma non esaustivo, fini commerciali non autorizzati, applicazioni diagnostiche in vitro, usi terapeutici ex vivo o in vivo o qualsiasi altro tipo di assunzione o applicazione rivolta agli esseri umani o agli animali.

Informazioni sulla sicurezza

• Codice della classe di stoccaggio: 10 - Combustible liquids
• Classe di pericolosità dell'acqua (WGK): WGK 2
• Punto d’infiammabilità (°F): Not applicable
• Punto d’infiammabilità (°C): Not applicable