C9263

Collagénase from Clostridium histolyticum

Type V, ≥1 FALGPA units/mg solid, >125 CDU/mg solid

• Synonyme(s) : Clostridiopeptidase A
• Numéro CAS: 9001-12-1
• Numéro de classification (Commission des enzymes): 3.4.24.3 (BRENDA, IUBMB)
• Numéro CE : 232-582-9
• Numéro MDL: MFCD00130830
• Code UNSPSC : 12352204
• Nomenclature NACRES : NA.54

Propriétés

• Niveau de qualité: 200
• Forme: powder
• Activité spécifique: ≥1 FALGPA units/mg solid; >125 CDU/mg solid
• Poids mol.: 113-114 kDa
• Solubilité: TESCA buffer (50 mM TES, 0.36 mM Calcium chloride, pH 7.4): soluble 1-2 mg/mL
• Application(s): diagnostic assay manufacturing
• Température de stockage: −20°C

Description

Description générale

Les collagénases de Clostridium histolyticum (CCH) sont classées en deux types : I et II. Ces deux types sont des polypeptides simples ayant un poids moléculaire de respectivement 114 kDa et 113 kDa. La CCH I contient des domaines en tandem tandis que la CCH II contient un seul domaine pour la fixation du collagène.

Application

La collagénase a été utilisée dans la préparation de tissus artériels pour l'étude des produits finaux de glycosylation avancée (AGE). Cette enzyme a également été utilisée, en association avec d'autres protéases, pour la désagrégation de différents tissus : tissus tumoraux humains, tissus rénaux de souris, tissus cérébraux humains, tissus épithéliaux pulmonaires, etc. Elle se révèle efficace dans des études de perfusion hépatique et rénale, la digestion de pancréas et l'isolement d'hépatocytes non parenchymateux. Ce produit a été employé pour digérer des biopsies de peau d'avant-bras réalisées chez des patients atteints de la maladie de Parkinson pour réaliser des primocultures de fibroblastes de peau humaine. Cette enzyme Sigma a été utilisée pour isoler des îlots pancréatiques de rongeur dans une étude sur les fonctions de la glucokinase.

La collagénase de Clostridium histolyticum a été utilisée dans une étude portant sur la dégradation du collagène par la bactérie cariogène Streptococcus mutans. La collagénase de Clostridium histolyticum a également été utilisée pour étudier la capacité de survie de microréseaux de collagène en présence de collagénase.

Actions biochimiques/physiologiques

La collagénase de Clostridium histolyticum (CCH) est une enzyme de digestion qui agit principalement sur le collagène. Elle est utile dans le traitement de la maladie de Dupuytren (pathologie fibroproliférative).

La collagénase est activée à l′aide de quatre atome-grammes de calcium par mole d′enzyme. Elle est inhibée par l′acide éthylèneglycol-bis(bêta-aminoéthyléther)-N,N,N′,N′-tétraacétique, le bêta-mercaptoéthanol, le glutathion, l′acide thioglycolique et la 8-hydroxyquinoline.

Définition de l'unité

Une unité de digestion de collagène (UDC) libère une quantité de peptides à partir du collagène d′un tendon d′Achille de bovin équivalant, en termes de couleur avec la méthode à la ninhydrine, à 1,0 μmole de leucine en 5 heures à pH 7,4 et à 37 °C en présence d′ions calcium. Une unité d′hydrolyse de FALGPA hydrolyse 1,0 μmole de furylacryloyl-Leu-Gly-Pro-Ala par minute à 25 °C. Une unité de protéase neutre hydrolyse la caséine et produit une couleur équivalente à 1,0 μmole de tyrosine en 5 heures à pH 7,5 et à 37 °C. Une unité de clostripaïne hydrolyse 1,0 μmole de BAEE par minute à pH 7,6 et à 25 °C en présence de DTT.

Remarque sur l'analyse

Cette enzyme possède également des activités clostripaïne, protéase neutre non spécifique et tryptique.

Informations sur la sécurité

• Pictogrammes: GHS08
• Mention d'avertissement: Danger
• Mentions de danger: H334
• Conseils de prudence: P261 - P284 - P501
• Classification des risques: Resp. Sens. 1
• Code de la classe de stockage: 11 - Combustible Solids
• Classe de danger pour l'eau (WGK): WGK 1
• Point d'éclair (°F): Not applicable
• Point d'éclair (°C): Not applicable
• Équipement de protection individuelle: dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves