COLLA-RO
Roche
Collagénase A
from Clostridium histolyticum
About This Item
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Source biologique
Clostridium histolyticum
Niveau de qualité
Stérilité
non-sterile
Forme
lyophilized
Activité spécifique
>0.15 U/mg lyophilizate (Collagenase activity)
Conditionnement
pkg of 100 mg (10103578001)
pkg of 2.5 g (11088793001)
pkg of 500 mg (10103586001)
Fabricant/nom de marque
Roche
Concentration
1 mg/mL (0.1%, w/v)
Couleur
brown
pH optimal
6.0-8.0
Solubilité
water: soluble
Adéquation
suitable for PCR
Numéro d'accès NCBI
Numéro d'accès UniProt
Application(s)
cell analysis
life science and biopharma
sample preparation
Activité étrangère
Clostripain 9.489 U/mg
Proteases 6.067 U/mg (Azocoll )
Trypsin 0.144 U/mg (with BAEE)
Température de stockage
2-8°C
Informations sur le gène
Clostridium histolyticum ... COLA_1(1668506084)
Description générale
Spécificité
Activité enzymatique :
Activité collagénase : >0,15 U/mg (selon Wünsch) (à +25 °C, substrat : 4-phényl-azobenzyl-oxycarbonyl-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg)
Activités d'enzymes contaminantes : activité trypsine, clostripaïne et protéase neutre.
La collagénase A présente un ratio équilibré d'activités enzymatiques.
Application
- désagrégation de nombreux types de tissus (poumon, cœur, muscle, os, tissu adipeux, foie, rein, cartilage, glande mammaire, placenta, vaisseaux sanguins, cerveau, tumeurs, cordon ombilical par exemple).
- préparation de suspensions unicellulaires destinées à la mise en place de systèmes de culture de cellules primaires. Il est recommandé d'utiliser la collagénase A lorsque le rendement, la viabilité et la fonctionnalité revêtent un caractère critique.
- préparation de cellules de nombreux types de tissus différents, notamment des hépatocytes, des adipocytes, des ilôts de Langerhans, des cellules épithéliales, des cellules musculaires, des cellules endothéliales, etc. Il convient néanmoins de déterminer empiriquement la capacité de chaque lot de l'enzyme à s'attaquer à un tissu particulier.
Définition de l'unité
Lyophilisat, non stérile
L'activité de la collagénase est fréquemment indiquée en unités Mandl (1 μmol de leucine libérée par du collagène en 5 heures à +37 °C).
Malheureusement, il n'existe aucun facteur de conversion cohérent entre les deux unités d'activité, car l'unité Mandl dépend en partie de la concentration en protéases contaminantes dans la préparation de collagénase, variable impossible à définir. Comparativement à une préparation brute, une préparation de collagénase pure donnerait une activité spécifique en unités Mandl plus faible. Les préparations de Clostridium donnent habituellement des facteurs de conversion d′environ 1/1800 (par exemple, un lot particulier de collagénase de Clostridium contenait environ 0,15 U Wünsch/mg et 250 U Mandl/mg).
Notes préparatoires
Inhibiteurs :
Inhibiteurs de la collagénase : EDTA, EGTA, Cys, His, DTT, 2-mercaptoéthanol
La collagénase n'est pas inhibée par le sérum.
Inhibiteurs de la clostripaïne : TLCK
Inhibiteurs de la trypsine : aprotinine, inhibiteur de trypsine (blanc d'œuf, soja), sérum
Concentration de travail : 0,5 à 2,5 mg/ml
Conditions de stockage (solution de travail) : -15 à -25 °C
Roche recommande de ne reconstituer que la quantité de lyophilisat nécessaire à une utilisation immédiate. La solution reconstituée peut être conservée jusqu'à une semaine entre -15 et -25 °C. Éviter les congélations et décongélations répétées, car l'activité diminue après reconstitution.
Reconstitution
Stockage et stabilité
Autres remarques
Mention d'avertissement
Danger
Mentions de danger
Conseils de prudence
Classification des risques
Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
Organes cibles
Respiratory system
Code de la classe de stockage
11 - Combustible Solids
Classe de danger pour l'eau (WGK)
WGK 1
Point d'éclair (°F)
does not flash
Point d'éclair (°C)
does not flash
Certificats d'analyse (COA)
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