TAQ-RO

Taq DNA polimerase, 5 U/μl

optimum pH ~9.0 (20 °C), optimum reaction temp. 72 °C

• Sinônimo(s): PCR, alongamento de primer, amplificação de DNA, polimerase, pcr, alongamento de primer, amplificação de dna
• Número da licença da enzima: 2.7.7.7 (BRENDA, IUBMB)
• Código UNSPSC: 41106300

Propriedades

• fonte biológica: bacterial (Thermus aquaticus)
• Nível de qualidade: 100
• recombinante: expressed in E. coli
• grau: Molecular Biology
• forma: liquid
• uso: sufficient for ≤1,000 reactions (11146173001); sufficient for ≤10,000 reactions (11435094001); sufficient for ≤2,000 reactions (11418432001); sufficient for ≤5,000 reactions (11596594001); sufficient for ≤200 reactions (11146165001)
• atividade específica: 5 U/μL
• peso molecular: 95 kDa
• embalagem: pkg of 1,000 U (11418432001 [4 x 250 U]); pkg of 2,500 U (11596594001 [10 x 250 U]); pkg of 5,000 U (11435094001 [20 x 250 U]); pkg of 100 U (11146165001); pkg of 500 U (11146173001 [1 x 500 U])
• fabricante/nome comercial: Roche
• Parâmetros: 72 °C optimum reaction temp.
• técnica(s): DNA sequencing: suitable; PCR: suitable
• cor: colorless
• pH ideal: ~9.0 (20 °C)
• solubilidade: water: miscible
• adequação: suitable for molecular biology
• nº de adesão NCBI: AAA27507
• nº de adesão UniProt: P19821
• aplicação(ões): genomic analysis; life science and biopharma
• atividade externa: Nicking activity 30 units, none detected; Ribonuclease 30 units, none detected; Unspecific endonucleases 30 units, none detected
• temperatura de armazenamento: −20°C

Descrição

Descrição geral

A Taq DNA polimerase é uma 5′→3′ DNA polimerase altamente processiva sem atividade de exonuclease 3′→5′. É uma cadeia única de polipeptídeos com um peso molecular de cerca de 95 kDa.
A Taq DNA polimerase foi isolada originalmente da eubactéria termofílica Thermus aquaticus BM, uma cepa que não contém a endonuclease de restrição Taq I. A enzima foi clonada em E.coli.

Aplicação

A Taq DNA polimerase pode ser usada em PCR simples de rotina. A Taq DNA polimerase da Roche Applied Science atende a padrões rigorosos de pureza e qualidade. Esta preparação de Taq DNA polimerase recombinante pode ser usada para:

• PCR
• RT-PCR
• qPCR
• Outras reações de extensão de primers, como sequenciamento e marcação

Características e benefícios

Resultados confiáveis e reprodutíveis:
Alta consistência lote entre lotes.
Não é preciso testar cada lote:
A Taq DNA polimerase é rigorosamente testada.
Evite a transferência na PCR:
a combinação da incorporação de dUTP com uracil DNA glicosilase impede a contaminação cruzada na PCR.

Embalagem

1 kit contendo 2 componentes

Qualidade

Ensaios de rotina com amplicons de tamanho médio e teor de GC de 50%. A Taq DNA polimerase não tem capacidade de correção de erros cometidos (“proofreading”) nem “hot start”. Ela tem atividade ideal a +75 °C e pH 9.
Ausência da endonuclease de restrição:
A enzima isolada originalmente de T. aquaticus BM não tem atividade de endonuclease de restrição da Taq I. Cada lote é testado por PCR usando λDNA. Cada lote também é testado quanto à ausência de exonucleases e endonucleases, bem como atividades de corte (“nicking”) conforme os procedimentos atuais de controle de qualidade.

Definição da unidade

Uma unidade de Taq DNA polimerase é definida como a quantidade de enzima que incorpora 10 nmol de desoxirribonucleosídeos trifosfato totais em DNA precipitável em ácido em 60 min a +65 °C nas condições de ensaio definidas acima.

Teor de unidades: Tampão de incubação:
Tris/HCl 67 mM; pH 8,3/25 °C, MgCl₂ 5 mM, mercaptoetanol 10 mM, polidocanol 0,2%, 0,2 mg/ml de gelatina, dATP, dGTP, dTTP 0,2 mM cada e dCTP 0,1 mM.

Procedimento de incubação:
M13mp9ss, primer M13 (17mer) e 1 μCi (α^-32P) dCTP são incubados em diluições adequadas de Taq DNA polimerase em 50 μl de tampão de incubação a +65 °C por 60 minutos. A quantidade de dNTPs incorporados é determinada por precipitação de ácido tricloroacético.

Atividade por volume: 5 U/μl

Outras notas

Somente para fins de pesquisas biológicas. Não é destinado ao uso em procedimentos diagnósticos.

Informações legais

O uso deste produto é coberto por reivindicações de patente dos EUA e reivindicações de patente correspondentes fora dos EUA. A compra deste produto inclui imunidade limitada e não transferível contra ações legais nos termos dos pedidos de patente supracitados para utilização apenas desta quantidade de produto para pesquisas internas do próprio comprador. Nenhum direito nos termos de nenhum outro pedido de patente, nenhum direito de executar nenhum método patenteado e nenhum direito a realizar serviços comerciais de nenhum tipo, incluindo, entre outros, a apresentação dos resultados das atividades do comprador em troca de remuneração ou outra contraprestação comercial, é expresso explicitamente, por implicação ou preclusão. Este produto destina-se apenas ao uso em pesquisa. Usos diagnósticos nos termos dos pedidos de patente da Roche exigem uma licença separada da Roche. Mais informações sobre a compra de licenças podem ser obtidas junto ao Diretor de licenças (Director of Licensing), Applied Biosystems, 850 Lincoln Centre Drive, Foster City, Califórnia 94404, EUA.

Somente componentes do kit

• Taq DNA Polymerase 5 U/μl
• PCR Buffer with MgCl₂ 10x concentrated
• MgCl₂ Stock Solution
• PCR Buffer without MgCl₂

Informações de segurança

• Frases de perigo: H412
• Declarações de precaução: P273 - P501
• Classificações de perigo: Aquatic Chronic 3
• Código de classe de armazenamento: 12 - Non Combustible Liquids
• Classe de risco de água (WGK): WGK 2
• Ponto de fulgor (°F): does not flash
• Ponto de fulgor (°C): does not flash