ELONG-RO

Sistema de PCR de molde longo Expand^™

suitable for PCR, optimum reaction temp. 68 °C

• Sinônimo(s): pcr de longo alcance, pcr de molde longo
• Número da licença da enzima: 2.7.7.7 (BRENDA, IUBMB)
• Código UNSPSC: 41106300

Propriedades

• uso: sufficient for ≤190 reactions (11681842001); sufficient for ≤38 reactions (11681834001); sufficient for ≤950 reactions (11759060001)
• Nível de qualidade: 100
• embalagem: pkg of 3,600 U (11759060001 [10x360 U]); pkg of 150 U (11681834001); pkg of 720 U (11681842001 [2x360 U])
• fabricante/nome comercial: Roche
• Parâmetros: 68 °C optimum reaction temp.
• técnica(s): PCR: suitable
• temperatura de armazenamento: −20°C

Descrição

Descrição geral

O sistema de PCR de molde longo Expand é uma mistura enzimática que contém Taq DNA polimerase termoestável e uma DNA polimerase termoestável com atividade de detecção de erros (“proofreading”). Esta poderosa mistura de polimerases produz um alto rendimento de produto de PCR a partir de DNA genômico. O sistema de PCR de molde longo Expand permite a amplificação de fragmentos de DNA de até 20 kb a partir de DNA genômico humano e 40 kb a partir de λDNA.
O sistema de PCR de molde longo Expand copia o DNA com precisão três vezes maior que a da Taq DNA polimerase.
Incorporações errôneas fazem com que a Taq DNA polimerase se separe da fita de DNA. A atividade da exonuclease 3′→ 5′ da mistura de reação de polimerase de detecção de erros (“proofreading”) amplifica o DNA com precisão três vezes maior que a Taq DNA polimerase sozinha.
Produtos longos de PCR exigem um tampão especial e protocolo otimizado. Este kit tem três tampões para amplificar fragmentos de 0,5 a 9 kb, 9 a 12 kb e acima de 12 kb. Para alta qualidade de molde, use o kit High Pure Template Preparation da Roche para preparar moldes de DNA genômico.

Aplicação

A principal aplicação do sistema de PCR de molde longo Expand é a amplificação precisa de sequências-alvo muito longas, mesmo de DNA genômico. Use esta mistura enzimática otimizada e o conjunto especialmente desenvolvido de três tampões para gerar produtos de PCR com 5 a 20 kb de comprimento.
Escolha o sistema de PCR de molde longo Expand de 1^a geração para obter reações de PCR longas e precisas. Use esta mistura enzimática otimizada e o conjunto especialmente desenvolvido de três tampões para gerar produtos de PCR com 5 a 20 kb de comprimento. Use o produto para:

• PCR
• RT-PCR ou PCR de longo alcance
• Amplificação de fragmentos grandes
• Mapeamento e sequenciamento de genoma
• Construção de contigs
• Caracterização de sequências clonadas em fagos lambda ou cosmídeos
• Rápida identificação e clonagem de genes completos a partir de DNA genômico ou sequência de cDNA como material de partida

Com uma alternativa econômica, recomendamos a atualização para o Expand de longo alcance de 2^a geração, dNTPack.
Para tamanhos de amplicon de 20 a 35 kb, escolha o sistema de PCR Expand 20kb^PLUS, dNTPack.

Características e benefícios

O sistema de PCR de molde longo Expand é ideal para mapeamento e sequenciamento de genoma, construção contigs, caracterização de sequências clonadas em fagos lambda ou cosmídeos e clonagem e análise de genes eucarióticos.

• Amplifique moldes mais longos: Este conjunto de 3 tampões amplifica produtos de 5 a 20 kb.
• Alcance rendimentos melhores e fidelidade 3 vezes maior em comparação com a Taq DNA polimerase.
• Melhore seu PCR: A obtenção de mais produtos de PCR de comprimento total é ideal nos processos a jusante.

Embalagem

1 kit contendo 4 componentes

Qualidade

Cada lote é testado quanto à função de PCR usando DNA genômico humano e primers específicos para fragmentos de 9, 12 e 15 kb. A mistura enzimática é testada quando à ausência de qualquer atividade contaminante, incluindo endonucleases ou exonucleases e atividades de corte (“nicking”), conforme os procedimentos atuais de controle de qualidade.

Definição da unidade

Atividade por volume: 5 U/μl

Nota de preparo

Concentração de trabalho: A concentração enzimática ideal varia de 0,5 a 5,0 U por 50 μl de reação. A concentração enzimática padrão é de 3,75 U por 50 μl de reação.

Outras notas

Somente para fins de pesquisas biológicas. Não é destinado ao uso em procedimentos diagnósticos.

Informações legais

O uso deste produto é coberto por reivindicações de patente dos EUA e reivindicações de patente correspondentes fora dos EUA. A compra deste produto inclui imunidade limitada e não transferível contra ações legais nos termos dos pedidos de patente supracitados para utilização apenas desta quantidade de produto para pesquisas internas do próprio comprador. Nenhum direito é transmitido expressamente, implícito ou por embargo sob nenhuma outra reivindicação de patente, bem como nenhum direito realizar qualquer método patentado e nenhum direito de realizar serviços comerciais de qualquer natureza, inclusive, mas não limitado a relato remunerado ou passível de outra consideração comercial dos resultados das atividades do comprador. Este produto é destinado somente para uso em pesquisa. Usos diagnósticos nos termos dos pedidos de patente da Roche exigem uma licença separada da Roche. Mais informações sobre a compra de licenças podem ser obtidas junto ao Diretor de licenças (Director of Licensing), Applied Biosystems, 850 Lincoln Centre Drive, Foster City, Califórnia 94404, EUA.</ br>AVISO AO COMPRADOR: LICENÇA LIMITADA<br />O uso deste produto está coberto pela patente N.º 6.127.155 dos EUA e pelos pedidos de patente correspondentes fora dos EUA.  A compra deste produto inclui imunidade limitada e não transferível contra ações legais nos termos dos pedidos de patente supracitados para utilização apenas desta quantidade de produto para pesquisas internas do próprio comprador.  Nenhum direito nos termos de nenhum outro pedido de patente e nenhum direito a realizar serviços comerciais de nenhum tipo, incluindo sem limitações a apresentação dos resultados das atividades do comprador em troca de remuneração ou outra contraprestação comercial, é expresso explicitamente, por implicação ou preclusão.  Este produto destina-se apenas ao uso em pesquisa. Usos em diagnósticos humanos e veterinários nos termos dos pedidos de patente da Roche exigem uma licença separada da Roche.  Todos os usos, exceto para pesquisa interna e uso diagnóstico humano e veterinário, nos termos dos pedidos de patente da Roche, exigem uma licença separada da Thermo Fisher Scientific. Mais informações sobre a compra de licenças da Roche podem ser obtidas junto ao Licensing Department (Departamento de licenças) da Roche Molecular Systems, Inc., 4300 Hacienda Drive, Pleasanton, Califórnia 94588, EUA ou Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, 68305 Mannheim, Alemanha.  Mais informações sobre a compra de licenças da Thermo Fisher Scientific podem ser obtidas junto ao Departamento de licenças (Licensing Department) da  Thermo Fisher Scientific, 5791 Van Allen Way, Carlsbad, Califórnia 92008, EUA.

Expand is a trademark of Roche

Somente componentes do kit

• Expand Long Template Enzyme Mix
• Expand Long Template Buffer 1, with 17.5 mM MgCl₂ 10x concentrated
• Expand Long Template Buffer 2, with 27.5 mM MgCl₂ 10x concentrated
• Expand Long Template Buffer 3, with 27.5 mM MgCl₂ and detergents 10x concentrated

Informações de segurança

• Frases de perigo: H412
• Declarações de precaução: P273 - P501
• Classificações de perigo: Aquatic Chronic 3
• Código de classe de armazenamento: 12 - Non Combustible Liquids
• Classe de risco de água (WGK): WGK 2
• Ponto de fulgor (°F): does not flash
• Ponto de fulgor (°C): does not flash