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Roche

Biotina-16-dUTP

Sinônimo(s):

Bio-16-dUTP, Uridinas marcadas com biotina, 5-(N-[N-biotinilε-aminocaproilγ-aminobutiril]-3-aminoalil)-2′-desoxiuridina 5′-trifosfato

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About This Item

Fórmula empírica (Notação de Hill):
C32H52N7O18P3S
Número CAS:
Peso molecular:
947.78
Número MDL:
Código UNSPSC:
41116100

Formulário

solution

Nível de qualidade

embalagem

pkg of 50 μL (50 nmol; 1mM)

fabricante/nome comercial

Roche

cor

colorless

solubilidade

water: miscible

temperatura de armazenamento

−20°C

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Descrição geral

A biotina é uma vitamina solúvel em água que funciona como uma coenzima para carboxilases.A biotina-16-dUTP é usada para produzir sondas de DNA biotiniladas que são comumente usadas para detectar sequências específicas de DNA e RNA em diferentes métodos, como Southern e Northern blotting, hibridização in situ e ensaios sanduíche.

Aplicação

A biotina-16-dUTP tem sido usada:
  • Para marcação de DNA não radioativo, como priming randômico, marcação de PCR ou tradução por nick. A biotina-16-dUTP substitui o dTTP na reação de marcação de DNA com primer aleatório ou na tradução de nick em uma proporção de 35% de biotina-16-dUTP e 65% de dTTP, bem como na PCR.
  • como um substrato para transferase terminal, DNA polimerase I (holoenzima e fragmento de Klenow), Taq DNA polimerase e transcriptase reversa (por exemplo, Transcriptor). O nucleotídeo também serve como substrato para a Terminal Transferase na marcação de 3′ extremidades
  • Na hibridização in situ por fluorescência (FISH)

Ações bioquímicas/fisiológicas

A biotina influencia a regulação gênica e a estrutura da cromatina, associando-se com resíduos de lisina em histonas. Ela influencia as ações das células NK e células T de resposta imune adaptativa. A deficiência de biotina em camundongos indicou aumento da inflamação. Estudos também indicaram uma resposta inflamatória maior das células dendríticas humanas em condições de deficiência de biotina.

Qualidade

Análise típica: Pelo menos 85% de desoxinucleotídeo trifosato (Biotina-16-dUTP) (HPLC, % de área).
Observações: Para sua conveniência, a biotina-dUTP também está disponível em misturas de marcação convenientes (solução única com dNTPs convencionais e biotina-16-dUTP), e misturas específicas da técnica (nucleotídeos, tampões e enzimas em um único frasco).

Nota de análise

Absorção: Dados espectrais da biotina-16-dUTP (em pH 7,3):
Emáx.241: E = 10,700;
Emáx.292: E = 7,000;
Emáx.265: E = 4,400;
A292/265: 1,6.

Outras notas

O DNA marcado com biotina pode ser detectado com: Conjugado de estreptavidina-fosfatase alcalina e um substrato quimioluminescente (CSPD, CDP-Star) ou um substrato colorido- Kit de detecção de luminescência de biotina.

Código de classe de armazenamento

12 - Non Combustible Liquids

Classe de risco de água (WGK)

nwg

Ponto de fulgor (°F)

does not flash

Ponto de fulgor (°C)

does not flash


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Biotin-16-dUTP Protocol & Troubleshooting

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