SCM133

Solução Dispase-II PluriSTEM^®

Dispase-II has proven to be a rapid and effective, yet gentle, agent for separating many tissues and cells grown in vitro.

• Sinônimo(s): Dispase, Dispase 2
• Código UNSPSC: 12352204
• eCl@ss: 32160801
• NACRES: NA.75

Propriedades

• Nível de qualidade: 100
• forma: liquid
• fabricante/nome comercial: PluriSTEM^®
• concentração: 1 mg/mL in sterile DMEM/F-12
• técnica(s): cell culture | mammalian: suitable; cell culture | stem cell: suitable
• Condições de expedição: dry ice

Descrição

Descrição geral

Enzimas proteolíticas como a tripsina, colagenase e pronase são comumente usadas para dispersar tecidos e células. No entanto, essas enzimas muitas vezes danificam as células, são instáveis durante a incubação, podem ser heterogêneas e também uma fonte de contaminação por micoplasma. A dispase-II é usada para preparar células provenientes de uma ampla variedade de tecidos e órgãos. A dispase-II provou ser um agente rápido, eficaz e delicado para separar muitos tecidos e células cultivados in vitro. A dispase é especialmente adequada para procedimentos de desagregação e subcultivo de tecidos, pois ela não danifica as membranas celulares.

A dispase-II PluriSTEM foi validada para uso em conjunto com o meio para CTE/CTPi humanas PluriSTEM (SCM130) para a cultura e repicagem de células-tronco pluripotentes embrionárias e induzidas humanas.

A enzima dispase-II é produzida em Bacillus polymyxa.

Aplicação

A técnica de repicagem ideal deve ser determinada pelo usuário final e varia dependendo do tipo celular e das condições de cultivo.

1. Revestir placas de 6 poços com o revestimento Matrigel 1:20 (1,5 ml por poço). Incubar a 2-8ºC de um dia para o outro ou revestir em temperatura ambiente durante pelo menos 30 minutos a 1 hora antes do uso.
2. Remover o revestimento matrigel. Adicionar 2 ml de meio completo por poço.
3. Remover as áreas de diferenciação da cultura.
4. Aspirar o meio.
5. Lavar uma vez com 2 ml de PBS.
6. Adicionar 1,5 ml de dispase II por poço. Incubar a 37 ºC por 7 minutos.
7. Lavar 2X com 2 ml de PBS, sem Mg e Ca.
8. Adicionar 2 ml de meio completo a cada poço e usar um raspador de células para desprender as colônias.
9. Coletar as células raspadas em um tubo cônico de 15 ml.
10. Centrifugar a 800 rpm por 5 minutos
11. Ressuspender no volume apropriado de meio completo. A razão de divisão típica é de 1:5 – 1:6, dependendo da densidade celular. As células devem estar prontas para a repicagem em 5 a 6 dias usando o meio de CTE/CTPi humanas PluriSTEM.

Categoria de pesquisa
Pesquisa com células-tronco

Subcategoria de pesquisa
Enzimas e Bioquímica

Qualidade

A solução é vermelha, sem a presença de particulados. A solução é estéril e adequada para aplicações em cultura celular.

forma física

O produto é apresentado em DMEMF12 estéril a 1 mg/ml. O produto é filtrado através de um filtro de 0,2 mícron antes de congelar.
A enzima dispase-II é produzida em Bacillus polymyxa.

O produto é apresentado em DMEMF12 estéril a 1 mg/ml. O produto é filtrado através de um filtro de 0,2 mícron antes de congelar.

Armazenamento e estabilidade

Mantenha a –20 °C por até 4 meses a partir da data de recebimento. Uma vez descongelado, separe em alíquotas em volumes de trabalho menores e armazene a –20ºC. Evite vários ciclos de congelamento e descongelamento para manter a atividade enzimática em níveis adequados.

Informações legais

PLURISTEM is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Exoneração de responsabilidade

Exceto quando indicado em contrário em nosso catálogo ou em outros documentos da empresa que acompanham o(s) produto(s), os nossos produtos destinam-se somente ao uso em pesquisa e não devem ser usados para qualquer outra finalidade, o que inclui, dentre outros, usos comerciais não autorizados, usos para diagnóstico in vitro, usos terapêuticos ex vivo ou in vivo, ou qualquer tipo de consumo ou aplicação em humanos ou animais.

Informações de segurança

• Código de classe de armazenamento: 10 - Combustible liquids
• Classe de risco de água (WGK): WGK 1
• Ponto de fulgor (°F): Not applicable
• Ponto de fulgor (°C): Not applicable