MAB5266
Anti-Neurofilament H (200 kDa) Antibody
CHEMICON®, mouse monoclonal, N52
Sinônimo(s):
Anti-CMT2CC, Anti-NFH
Faça loginpara ver os preços organizacionais e de contrato
About This Item
Código UNSPSC:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.41
Produtos recomendados
Nome do produto
Anticorpo antineurofilamento de 200 kDa, clone N52, clone N52, Chemicon®, from mouse
fonte biológica
mouse
Nível de qualidade
100
300
forma do anticorpo
purified immunoglobulin
tipo de produto de anticorpo
primary antibodies
clone
N52, monoclonal
reatividade de espécies
human, mouse, monkey, rat, pig
fabricante/nome comercial
Chemicon®
técnica(s)
immunohistochemistry: suitable
western blot: suitable
Isotipo
IgG1
nº de adesão NCBI
nº de adesão UniProt
Condições de expedição
wet ice
modificação pós-traducional do alvo
unmodified
Informações sobre genes
human ... NEFH(4744)
mouse ... Nefh(380684)
pig ... Nefh(100156492)
rat ... Nefh(24587)
rhesus monkey ... Nefh(717705)
Descrição geral
Os neurofilamentos são um tipo de filamento intermediário que atuam como elementos importantes no citoesqueleto para conferir sustentação ao axoplasma. Eles são os componentes fibrilares mais abundantes do axônio sendo, em média, 3 a 10 vezes mais frequentes que os microtúbulos axonais. Os neurofilamentos (10 nm de diâmetro) são formados a partir de três protofibrilas entrelaçadas que, por sua vez, são compostas por dois complexos de protofilamentos tetraméricos de proteínas monoméricas. As proteínas tripleto de neurofilamentos (68/70, 160 e 200 kDa) ocorrem tanto no sistema nervoso central quanto periférico e geralmente são específicas para os neurônios. A proteína NF-L de 68/70 kDa pode se auto-organizar em uma estrutura filamentosa, no entanto as proteínas NF-M de 160 kDa e NF-H de 200 kDa requerem a presença da proteína NF-L de 68/70 kDa para se co-organizarem. Neuromas, ganglioneuromas, gangliogliomas, ganglioneuroblastomas e neuroblastomas coram positivamente para neurofilamentos. Embora tipicamente restritos aos neurônios, os neurofilamentos foram detectados em paragangliomas e feocromocitomas adrenais e extra-adrenais. Tumores carcinoides, carcinomas neuroendócrinos cutâneos e carcinoma de células do tipo grão de aveia também expressam neurofilamentos. Para obter mais informações sobre neurofilamentos, vide a tabela de marcadores específicos para tipos de células do sistema nervoso online na seção de suporte técnico da CHEMICON.
Especificidade
O MAB5266 reage com a cadeia H fosforilada e desfosforilada do neurofilamento 200 kDa (NF-H) em tecidos/extratos normais (Shaw, 1986). O MAB5266 pode ser usado para detectar células de origem neuronal por imuno-histoquímica e western blot. Foi relatado que a reatividade do MAB5266 com NF-H é bloqueada em células que superexpressam cdk-5 (Guidato, 1996).
Imunogênio
Segmento com extremidade carboxila da cadeia de H suína enzimaticamente desfosforilada.
Aplicação
Categoria de pesquisa
Neurociência
Neurociência
Este anticorpo antineurofilamento de 200 kDa, clone N52, é validado para uso em WB, IH para detectar o neurofilamento de 200 kDa.
Subcategoria de pesquisa
Metabolismo de neurofilamentos e neurônios
Marcadores neuronais e gliais
Metabolismo de neurofilamentos e neurônios
Marcadores neuronais e gliais
Western blot: 5−10 μg/ml
Imuno-histoquímica: 5−10 μg/ml
As diluições de trabalho ideais devem ser determinadas pelo usuário final.
Imuno-histoquímica: O anticorpo N52 reage com um fragmento do ramo lateral do NF-200 localizado na extremidade do domínio MPR KSP e que contém a sequência consenso do sítio de fosforilação da cdk-5, entretanto, essa reatividade desaparece se o fragmento NF-200 for fosforilado pela cdk-5 {Guidato et al, 1996}. Dessa forma, para maximizar a coloração e reatividade, inclusive em western blots, recomenda-se que as amostras sejam tratadas com fosfatase alcalina antes da coloração dos anticorpos. O protocolo de tratamento a seguir é sugerido:
Protocolo para preparo de soluções:
I. TBS: Tris-HCl, 0,1 mol/l; NaCl, 0,1 mol/l′ pH 8,0.
II. Misture 1 mg/ml de fosfatase alcalina com 1 mol/l de ZnSO4, 1 mol/l de MgCl2 e 1 mmol/l de PMSF; e dissolva em TBS.
OBSERVAÇÃO: É necessário dialisar a fosfatase alcalina contra a solução I antes do uso.
Procedimento:
Cortes congelados de amostras de tecido congeladas por choque térmico são secos ao ar e, em seguida, fixados com acetona por 10 min a –20 °C. O excesso de acetona é deixado evaporando em temperatura ambiente. Incube os cortes em soluções II por 4 horas a +30 °C e lave 3 vezes com TBS por 5 minutos em cada lavagem. Os cortes de controle negativo são incubados em solução II sem fosfatase alcalina. Tratamento adicional conforme segue:
- Cubra o preparado com 10-20 μl de solução de anticorpos e incube por 1 h em uma câmara úmida.
- Submerja a lâmina em TBS e lave 3 vezes em TBS por 5 minutos em cada lavagem.
- Cubra o preparado com 10-20 μl de uma solução de anticorpos Ig anticamundongo, marcados com isotiocianato de fluoresceína e incube em uma câmara úmida a 37 °C por 1 hora.
- Lave a lâmina em TBS 3 vezes por 5 minutos em cada lavagem.
Imuno-histoquímica: 5−10 μg/ml
As diluições de trabalho ideais devem ser determinadas pelo usuário final.
Imuno-histoquímica: O anticorpo N52 reage com um fragmento do ramo lateral do NF-200 localizado na extremidade do domínio MPR KSP e que contém a sequência consenso do sítio de fosforilação da cdk-5, entretanto, essa reatividade desaparece se o fragmento NF-200 for fosforilado pela cdk-5 {Guidato et al, 1996}. Dessa forma, para maximizar a coloração e reatividade, inclusive em western blots, recomenda-se que as amostras sejam tratadas com fosfatase alcalina antes da coloração dos anticorpos. O protocolo de tratamento a seguir é sugerido:
Protocolo para preparo de soluções:
I. TBS: Tris-HCl, 0,1 mol/l; NaCl, 0,1 mol/l′ pH 8,0.
II. Misture 1 mg/ml de fosfatase alcalina com 1 mol/l de ZnSO4, 1 mol/l de MgCl2 e 1 mmol/l de PMSF; e dissolva em TBS.
OBSERVAÇÃO: É necessário dialisar a fosfatase alcalina contra a solução I antes do uso.
Procedimento:
Cortes congelados de amostras de tecido congeladas por choque térmico são secos ao ar e, em seguida, fixados com acetona por 10 min a –20 °C. O excesso de acetona é deixado evaporando em temperatura ambiente. Incube os cortes em soluções II por 4 horas a +30 °C e lave 3 vezes com TBS por 5 minutos em cada lavagem. Os cortes de controle negativo são incubados em solução II sem fosfatase alcalina. Tratamento adicional conforme segue:
- Cubra o preparado com 10-20 μl de solução de anticorpos e incube por 1 h em uma câmara úmida.
- Submerja a lâmina em TBS e lave 3 vezes em TBS por 5 minutos em cada lavagem.
- Cubra o preparado com 10-20 μl de uma solução de anticorpos Ig anticamundongo, marcados com isotiocianato de fluoresceína e incube em uma câmara úmida a 37 °C por 1 hora.
- Lave a lâmina em TBS 3 vezes por 5 minutos em cada lavagem.
forma física
Formato: Purificado
Imunoglobulina purificada (cromatografia de troca iônica). Líquido em tampão fosfato 0,02 M, NaCl 0,25 M com azida sódica 0,1%, pH 7,6
Armazenamento e estabilidade
Mantenha a 2−8 °C em alíquotas não diluídas por até 6 meses. Evite ciclos repetidos de congelamento/descongelamento.
Outras notas
Concentração: Vide a concentração específica do lote no certificado de análise.
Informações legais
CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Exoneração de responsabilidade
Exceto quando indicado em contrário em nosso catálogo ou em outros documentos da empresa que acompanham o(s) produto(s), os nossos produtos destinam-se somente ao uso em pesquisa e não devem ser usados para qualquer outra finalidade, o que inclui, dentre outros, usos comerciais não autorizados, usos para diagnóstico in vitro, usos terapêuticos ex vivo ou in vivo, ou qualquer tipo de consumo ou aplicação em humanos ou animais.
Não está encontrando o produto certo?
Experimente o nosso Ferramenta de seleção de produtos.
recomendado
Código de classe de armazenamento
10 - Combustible liquids
Classe de risco de água (WGK)
WGK 2
Ponto de fulgor (°F)
Not applicable
Ponto de fulgor (°C)
Not applicable
Certificados de análise (COA)
Busque Certificados de análise (COA) digitando o Número do Lote do produto. Os números de lote e remessa podem ser encontrados no rótulo de um produto após a palavra “Lot” ou “Batch”.
Já possui este produto?
Encontre a documentação dos produtos que você adquiriu recentemente na biblioteca de documentos.
Os clientes também visualizaram
Ami V Patel et al.
Developmental biology, 340(2), 419-429 (2010-02-04)
In mice lacking functional brain-derived neurotrophic factor (BDNF), the number of geniculate ganglion neurons, which innervate taste buds, is reduced by one-half. Here, we determined how and when BDNF regulates the number of neurons in the developing geniculate ganglion. The
Phosphorylation of neurofilament H subunit as related to arrangement of neurofilaments.
Gotow, T and Tanaka, J
Journal of Neuroscience Research, 37, 691-713 (1994)
Sheona Watson-Scales et al.
PLoS genetics, 14(5), e1007383-e1007383 (2018-05-11)
Down Syndrome (DS) is caused by trisomy of chromosome 21 (Hsa21) and results in a spectrum of phenotypes including learning and memory deficits, and motor dysfunction. It has been hypothesized that an additional copy of a few Hsa21 dosage-sensitive genes
Jake A Robinson et al.
The American journal of pathology, 190(7), 1530-1544 (2020-04-05)
HIV-associated sensory neuropathy is a common neurologic comorbidity of HIV infection and prevails in the post-antiretroviral therapy (ART) era. HIV infection drives pathologic changes in the dorsal root ganglia (DRG) through inflammation, altered metabolism, and neuronal dysfunction. Herein, we characterized
Effects of spinal nerve ligation on immunohistochemically identified neurons in the L4 and L5 dorsal root ganglia of the rat.
Hammond, Donna L, et al.
The Journal of Comparative Neurology, 475, 575-589 (2004)
Nossa equipe de cientistas tem experiência em todas as áreas de pesquisa, incluindo Life Sciences, ciência de materiais, síntese química, cromatografia, química analítica e muitas outras.
Entre em contato com a assistência técnica