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Merck

Glykosidasen

Glykosidasen für die Anforderungen an Ihren glykobiologischen Arbeitsablauf

Glykosidasen, darunter Endoglykosidasen und Exoglykosidasen, werden in erster Linie in der Glykomikforschung für die Sequenzierung von Glykanen, die Freisetzung von N- und O-gebundenen Glykanen aus Glykoproteinen und die Herstellung von Glykoproteinen verwendet. Beispiele:

  • Glykosidasen wie unsere rekombinante Peptid-N-Glykosidase F, PNGase Fast, ermöglichen die vollständige und schnelle Deglykosylierung von Antikörpern und Immunglobulin-Fusionsproteinen sowie anderer Glykoproteine, die für die nachgeschaltete Chromatographie oder Massenspektrometrie-Analyse vorbereitet werden sollen.
  • Polysaccharidlyasen und Kohlenhydratesterasen werden zum Abbau von Glykosaminoglykanen (Mucopolysacchariden) und zur Herstellung von Polysaccharidkomponenten verwendet.
  • Glykosyltransferasen werden für den Einsatz in selektiven Glykosylierungstechniken untersucht, um die therapeutischen Eigenschaften von Proteinen und Antikörpern zu verbessern und die Immunogenität xenogener Gewebe zu verringern.

Um Ihren Anforderungen an den Arbeitsablauf in der Glykobiologie gerecht zu werden, bieten wir eine breite Produktpalette für die funktionelle und strukturelle Analyse von Glykanen an, darunter Glykoprozessenzyme, Glykoproteine, Proteoglykane, Glykolipide und freie Oligosaccharide. Hierzu gehört unser Angebot an Glykanerkennungsproteinen, einschließlich Lektinen und Galectinen, und unsere Kohlenhydrat-aktiven Enzyme, die Exoglykosidasen, Endoglykosidasen, Glykosyltransferasen und viele mehr umfassen. Da die Glykosylierung eine der häufigeren und komplexeren posttranslationalen Modifikationen ist, wurden unsere GlycoProfile™ Kits für die einfache und schnelle Markierung und Analyse von N-Glykanen und O-Glykanen von Glykoproteinen entwickelt.

Entdecken Sie nachstehend weitere innovative Produkte in Form von Reagenzien, Kits und Ressourcen für die Glykomik.


Kit für die enzymatische Protein-Deglykosylierung

Die Kits für die enzymatische Protein-Deglykosylierung (wie die Produkte EDEGLY und NDEGLY) enthalten alle Enzyme und Reagenzien, die zur vollständigen Entfernung aller N- und einfachen O-gebundenen Kohlenhydrate aus Glykoproteinen benötigt werden. Dazu gehören O-gebundene Glykoformen, die Galaktose, N-Acetylglukosamin und Sialinsäure enthalten. Weitere Leistungsmerkmale und Vorteile:

  • Deglykosylate mit bis zu 2 mg Glykoprotein –Geeignet für Downstream-Prozesse
  • Einzelreaktion bei neutralem pH-Wert – Beibehaltung der ursprünglichen Peptidstruktur
  • Kein Proteinabbau – Auslesen der Peptidstruktur
  • Exoglykosidasen eingeschlossen – Verarbeitet O-Glykoformen für die Freisetzung
  • Entfernt O-gebundene Zucker, die Polysialinsäure enthalten – Erhalten Sie genauere Peptidanalysenergebnisse
  • Kontroll-Glykoprotein bereitgestellt – Überprüfung erhöht Vertrauen und verbessert Konsistenz

GlycoProfile™ I Kit für die enzymatische In-Gel-N-Deglykosylierung

Das GlycoProfile™ I Kit für die enzymatische In-Gel-N-Deglykosylierung entfernt wirksam N-gebundene Glykane und verdaut Proteinproben aus 1D- oder 2D-Polyacrylamidgelen für die MS- oder HPLC-Analyse. Das Kit eignet sich bei ordnungsgemäßer Entfärbung gut für Coomassie-Brillantblau, kolloidale Coomassie- und silbergefärbte Gele. Das glykolytische Enzym PNGase F (Peptid-N-Glykosidase F) erbringt eine hervorragende Leistung, wenn es für die N-gebundene In-Gel-Deglykosylierung von Glykoproteinen und Glykopeptiden verwendet wird. Trypsin in Proteomik-Qualität verdaut effektiv das verbleibende Protein. Die entsalzten Proben werden dann für die Analyse durch MS konzentriert, wobei am häufigsten Ionisationsmethoden wie MALDI oder ESI und Analysemethoden wie TOF oder Quadrupol verwendet werden. Das Kit bietet Eigenschaften und Vorteile wie:

  • In-Gel-Deglykosylierung und Verdau – Minimieren die Probenmanipulation
  • Hochreine Enzyme – Verhindern unerwünschte Aktivitäten und Nebenprodukte
  • Niedriger Puffer-Salzgehalt – Eliminiert Interferenzen mit der MS-Analyse
  • Entfärbungsreagenz enthalten – Zeitersparnis durch Reduzierung der zusätzlichen Reagenzvorbereitung

Weitere Enzyme für die Glykobiologie

Ergänzend zu unseren Kits für die Deglykosylierung bieten wir glykolytische Enzyme zur Entfernung oder teilweisen Degradation von Glykanen an. Die Verwendung zusätzlicher Enzyme kann für bestimmte Glykanstrukturen nützlich sein, die universellen Deglykosylierungsstrategien widerstehen, wie z. B. Strukturen, die PNGase F nicht spaltet. Darüber hinaus kann die sequentielle Hydrolyse einzelner Monosaccharide aus Glykanen für die Analyse der Struktur und Funktion der Glykankomponente verwendet werden.





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