SFABIKB

KAPA SYBR^® FAST

suitable for qPCR, 2 ×, ABI PRISM^®

• Synonym(e): qPCR
• UNSPSC-Code: 41106300
• NACRES: NA.55

Eigenschaften

• Qualitätsniveau: 100
• Verwendung: sufficient for 100 reactions; sufficient for 1000 reactions; sufficient for 500 reactions; sufficient for 5000 reactions
• Haltbarkeit: ≤12 mo.
• Leistungsmerkmale: dNTPs included; hotstart
• Verpackung: kit of 1 mL (100 x 20 μL rxn; KK4603); kit of 10 mL (1000 x 20 μL rxn; KK4605); kit of 5 mL (500 x 20 μL rxn; KK4604); kit of 50 mL (5000 x 20 μL rxn; KK4617)
• Hersteller/Markenname: Roche
• Konzentration: 2 ×
• Methode(n): qPCR: suitable
• Aufnahme: purified DNA
• Kompatibilität: for use with Applied Biosystems^® 5700; for use with Applied Biosystems^® 7000; for use with Applied Biosystems^® 7300; for use with Applied Biosystems^® 7700; for use with Applied Biosystems^® 7900HT; for use with StepOne^™; for use with StepOnePlus^™
• Nachweisverfahren: SYBR^® Green
• Lagertemp.: −20°C

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

KAPA SYBR^® FAST qPCR Kits enthalten die erste DNA-Polymerase, die durch gezielte Evolution so modifiziert wurde, dass sie die Hemmung durch den Farbstoff SYBR Green I besser toleriert.

Die verbesserte Robustheit, Prozessivität und Geschwindigkeit der KAPA SYBR FAST qPCR Kits führen zu einer konstant hohen Amplifikationseffizienz, die eine genauere relative Quantifizierung für die Genexpressionsanalyse ermöglicht. Die KAPA SYBR FAST qPCR Kits, die für eine optimale Leistung unter strengen Echtzeit-PCR-Reaktionsbedingungen entwickelt wurden, zeigen enorme Verbesserungen des Signal-Rausch-Verhältnisses (Fluoreszenz), des Quantifizierungszyklus (Cq), der Linearität und der Sensitivität.

Anwendung

Das KAPA SYBR^® FAST qPCR-Kit kann für folgende Anwendungen verwendet werden:

• Genexpression
• Gen-Knockdown-Validierung
• Mikroarray-Validierung
• ChIP-Analyse
• Detektion von Low-Copy-Targets
• Absolute Quantifizierung von NGS-Bibliotheken
• Echtzeit-PCR

Leistungsmerkmale und Vorteile

Zur genaueren Quantifizierung von Veränderungen in der Genexpression

• Hohe Reaktionseffizienz zwischen 95 % und 105 % verbessert die Genauigkeit und Reproduzierbarkeit
• Unverzerrte Effizienz über eine große Bandbreite von GC-Inhalten und Amplikon-Längen

Konsequente Detektion von schwierigen und Low-Copy-Targets

• Verbesserte Prozessivität führt zu früheren Cq-Ergebnissen
• Höhere Fluoreszenzdetektion bei verschiedenen AT- und GC-reichen Targets
• Neuartiges Enzym ist gegen die SYBR^® Hemmung resistent

Vollständige Echtzeit-PCR in nur 40 Minuten

• 55 % kürzere Laufzeiten mit dem Schnellzyklusprotokoll
• Aufrechterhaltung einer hohen Leistung beim Wechsel von Standard- zu Schnellprotokollen

Einige Anmerkungen:

• Dieses Kit enthält ein technisch hergestelltes Enzym, das für die qPCR unter Verwendung der SYBR Green I Farbstoffchemie optimiert wurde.
• Der 2X-Master-Mix enthält einen proprietären Puffer. In Kombination mit dem neuartigen Enzym wird damit die Amplifikationseffizienz sowohl für GC- als auch für AT-reiche Targets verbessert.
• Eine anfängliche Denaturierung von 20 Sekunden bei 95 °C ist für die Aktivierung des Enzyms ausreichend. Bei der Arbeit mit komplexen Templates wird eine anfängliche Denaturierung von 3 Minuten empfohlen.
• Für einen 3-Schritt-Zyklus sind 20 Sekunden für das Primer-Annealing und 1 Sekunde für die Extension/Datenerfassung bei 72 °C nötig.
• Das Reaktionsvolumen darf 25 μL nicht überschreiten.

Qualität

Alle Kit-Komponenten werden einer strengen funktionellen Qualitätskontrolle unterzogen, sind frei von nachweisbarer kontaminierender Exo- und Endonukleaseaktivität und erfüllen strenge Anforderungen hinsichtlich der DNA-Kontamination.

Angaben zur Herstellung

Stellen Sie stets sicher, dass die Komponenten vor der Verwendung vollständig aufgetaut und gut gemischt sind. KAPA SYBR^® FAST qPCR Master Mix (2X) gefriert möglicherweise auch bei einer Lagerung von -20 °C nicht vollständig.

Der im KAPA SYBR FAST qPCR Master Mix (2X) ABI PRISM^® enthaltene SYBR-Green-I-Farbstoff und die ROX-/Fluorescein-Farbstoffe (je nach Kit-Konfiguration) sind lichtempfindlich. Direkte Lichteinwirkung über einen längeren Zeitraum führt zum Verlust der Intensität des Fluoreszenzsignals.

KAPA SYBR FAST qPCR Master Mix (2X) bleibt über 30 Gefrier-/Auftauzyklen hinweg stabil. Stellen Sie bei Nichtgebrauch der Reagenzien sicher, dass diese bei -20 °C vor Lichteinwirkung geschützt gelagert werden. Bei lichtgeschützter Lagerung sind die Reagenzien bei 4 °C mindestens eine Woche lang stabil und können bei dieser Temperatur für den baldigen Gebrauch unter der Voraussetzung gelagert werden, dass sie nicht mit Mikroben und/oder Nukleasen kontaminiert werden.

Sonstige Hinweise

Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung in diagnostischen Verfahren vorgesehen.

Rechtliche Hinweise

ABI PRISM is a registered trademark of Applera Corporation or its subsidiaries in the US and/or certain other countries

Applied Biosystems is a registered trademark of Applera Corporation or its subsidiaries in the US and/or certain other countries

SYBR is a registered trademark of Life Technologies

StepOne is a trademark of Applera Corporation or its subsidiaries in the US and/or certain other countries

StepOnePlus is a trademark of Applera Corporation or its subsidiaries in the US and/or certain other countries

Nur Kit-Komponenten

• KAPA SYBR^® FAST DNA Polymerase
• reaction buffer
• dNTPs
• SYBR^® Green I dye
• MgCl₂ 2.5 mM

Sicherheitshinweise

• Piktogramme: GHS08
• Signalwort: Warning
• H-Sätze: H371
• P-Sätze: P260 - P264 - P270 - P308 + P311 - P405 - P501
• Gefahreneinstufungen: STOT SE 2
• Lagerklassenschlüssel: 12 - Non Combustible Liquids
• WGK: WGK 1
• Flammpunkt (°F): does not flash
• Flammpunkt (°C): does not flash