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KAPA SYBR^® FAST

suitable for qPCR, 2 ×, for LightCycler^®480

• Synonym(e): Lightcycler, qPCR
• UNSPSC-Code: 41106300
• NACRES: NA.55

Eigenschaften

• Qualitätsniveau: 100
• Verwendung: sufficient for 100 reactions; sufficient for 1000 reactions; sufficient for 500 reactions
• Haltbarkeit: ≤12 mo.
• Leistungsmerkmale: dNTPs included; hotstart
• Verpackung: kit of 1 mL (100 x 20 μL rxn; KK4609); kit of 10 mL (1000 x 20 μL rxn; KK4611); kit of 5 mL (500 x 20 μL rxn; KK4610)
• Hersteller/Markenname: Roche
• Konzentration: 2 ×
• Methode(n): qPCR: suitable
• Aufnahme: purified DNA
• Kompatibilität: for use with Bio-Rad CFX96; for use with Bio-Rad Chromo4 (Real-Time Detector); for use with Bio-Rad DNA Engine Opticon; for use with Bio-Rad Opticon 2; for use with Eppendorf^® Mastercycler (ep realplex ); for use with Illumina Eco; for use with Roche LightCycler 1.5/2.0; for use with Roche LightCycler 480; for use with Roche LightCycler 96; for use with Roche LightCycler Nano; for use with Rotor-Gene^®; for use with Smart Cycler^®
• Nachweisverfahren: SYBR^® Green
• Lagertemp.: −20°C

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

KAPA SYBR FAST qPCR-Kits enthalten die erste DNA-Polymerase, die durch gezielte Evolution so modifiziert wurde, dass sie die Hemmung durch den Farbstoff SYBR Green I besser toleriert.

Die verbesserte Robustheit, Prozessivität und Geschwindigkeit der KAPA SYBR FAST qPCR-Kits führen zu einer konstant hohen Amplifikationseffizienz, die eine genauere relative Quantifizierung für die Genexpressionsanalyse ermöglicht. Die KAPA SYBR FAST qPCR-Kits, die für eine optimale Leistung unter strengen Echtzeit-PCR-Reaktionsbedingungen entwickelt wurden, zeigen enorme Verbesserungen des Signal-Rausch-Verhältnisses (Fluoreszenz), des Quantifizierungszyklus (Cq), der Linearität und der Sensitivität.

Anwendung

KAPA SYBR^® FAST für LightCycler^®480 wird für folgende Anwendungen verwendet:

• Genexpression
• Gen-Knock-Down-Validierung
• Microarray-Validierung
• ChIP-Analyse
• Detektion von Low-Copy-Targets
• Absolute Quantifizierung von NGS-Bibliotheken
• Quantitative Echtzeit-PCR (qPCR)

Leistungsmerkmale und Vorteile

Zur genaueren Quantifizierung von Veränderungen in der Genexpression

• Hohe Reaktionseffizienz zwischen 95 % und 105 % verbessert die Genauigkeit und Vergleichspräzision
• Unverzerrte Effizienz über eine große Bandbreite von GC-Inhalten und Amplikon-Längen

Konsequente Detektion von schwierigen und Low-Copy-Targets

• Verbesserte Prozessivität führt zu früheren Cq-Ergebnissen
• Höhere Fluoreszenzdetektion bei verschiedenen AT- und GC-reichen Targets
• Neuartiges Enzym ist gegen die SYBR^® Hemmung resistent

Vollständige Echtzeit-PCR in nur 40 Minuten

• 55 % kürzere Laufzeiten mit dem Schnellzyklusprotokoll
• Aufrechterhaltung einer hohen Leistung beim Wechsel von Standard- zu Schnellprotokollen

Einige Anmerkungen:

• Dieses Kit enthält ein technisch hergestelltes Enzym, das für die qPCR unter Verwendung der SYBR Green I Farbstoffchemie optimiert wurde.
• Der 2X-Master-Mix enthält einen proprietären Puffer. In Kombination mit dem neuartigen Enzym wird damit die Amplifikationseffizienz sowohl für GC- als auch für AT-reiche Targets verbessert.
• Eine anfängliche Denaturierung von 20 Sekunden bei 95 °C ist für die Aktivierung des Enzyms ausreichend. Bei der Arbeit mit komplexen Templates wird eine anfängliche Denaturierung von 3 Minuten empfohlen.
• Für einen 3-Schritt-Zyklus sind 20 Sekunden für das Primer-Annealing und 1 Sekunde für die Extension/Datenerfassung bei 72 °C nötig.
• Das Reaktionsvolumen darf 25 μL nicht überschreiten.

Qualität

Alle Kit-Komponenten werden einer strengen funktionellen Qualitätskontrolle unterzogen, sind frei von nachweisbarer kontaminierender Exo- und Endonukleaseaktivität und erfüllen strenge Anforderungen hinsichtlich der DNA-Kontamination.

Angaben zur Herstellung

Stellen Sie stets sicher, dass die Komponenten vor der Verwendung vollständig aufgetaut und gut gemischt sind. KAPA SYBR^® FAST qPCR Master Mix (2X) gefriert möglicherweise auch bei einer Lagerung von -20 °C nicht vollständig.

Der im KAPA SYBR FAST qPCR Master Mix (2X) enthaltene Farbstoff SYBR Green I und die ROX-/Fluorescein-Farbstoffe (je nach Kitkonfiguration) sind lichtempfindlich. Direkte Lichteinwirkung über einen längeren Zeitraum führt zum Verlust der Intensität des Fluoreszenzsignals.

KAPA SYBR FAST qPCR Master Mix (2X) bleibt über 30 Gefrier-/Auftauzyklen hinweg stabil. Stellen Sie bei Nichtgebrauch der Reagenzien sicher, dass diese bei -20 °C vor Lichteinwirkung geschützt gelagert werden. Bei lichtgeschützter Lagerung sind die Reagenzien bei 4 °C mindestens eine Woche lang stabil und können bei dieser Temperatur für den baldigen Gebrauch unter der Voraussetzung gelagert werden, dass sie nicht mit Mikroben und/oder Nukleasen kontaminiert werden.

Sonstige Hinweise

Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung in diagnostischen Verfahren vorgesehen.

Rechtliche Hinweise

Eppendorf is a registered trademark of Eppendorf AG

LightCycler is a registered trademark of Roche

Rotor-Gene is a registered trademark of Qiagen GmbH

SYBR is a registered trademark of Life Technologies

SmartCycler is a registered trademark of Cepheid, Inc.

Nur Kit-Komponenten

• KAPA SYBR^® FAST DNA Polymerase
• reaction buffer
• dNTPs
• SYBR^® Green I dye
• MgCl₂ 2.5 mM

Sicherheitshinweise

• Piktogramme: GHS08
• Signalwort: Warning
• H-Sätze: H371
• P-Sätze: P260 - P264 - P270 - P308 + P311 - P405 - P501
• Gefahreneinstufungen: STOT SE 2
• Lagerklassenschlüssel: 12 - Non Combustible Liquids
• WGK: WGK 1
• Flammpunkt (°F): does not flash
• Flammpunkt (°C): does not flash