RPOLT3-RO
Roche
T3-RNA-Polymerase
from Escherichia coli HB101
Synonym(e):
Polymerase, mRNA
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About This Item
Empfohlene Produkte
Biologische Quelle
Escherichia coli (HB101)
Qualitätsniveau
Assay
100% (SDS-PAGE)
Form
solution
Spezifische Aktivität
≥20 U/μL
Mol-Gew.
100 kDa (single polypeptide chain)
Verpackung
pkg of 1,000 U (11031163001)
pkg of 5,000 U (11031171001)
Hersteller/Markenname
Roche
Konzentration
<0.1 % (w/w)
Methode(n)
DNA sequencing: suitable
Northern blotting: suitable
Southern blotting: suitable
hybridization: suitable
Farbe
colorless
pH-Wert
7.9 (39 °F)
8.0 (68 °F)
Löslichkeit
water: miscible
Eignung
suitable for molecular biology
NCBI-Hinterlegungsnummer
UniProt-Hinterlegungsnummer
Anwendung(en)
genomic analysis
life science and biopharma
Fremdaktivität
Nicking activity 150 units, none detected
RNases 150 units
endonucleases 150 units, none detected
Lagertemp.
−20°C
Angaben zum Gen
Escherichia coli ... rpoB(948488)
Verwandte Kategorien
Allgemeine Beschreibung
Mit diesem Enzym kann homogen markierte Einzelstrang-RNA hergestellt werden. Transkripte können nicht-radioaktiv mit Biotin oder DIG-11-UTP bzw. radioaktiv bis zu einer hochspezifischen Aktivität mit [α-32P]- oder [α-35S]-markierten Nukleotiden markiert werden. T3-RNA-Polymerase ist eine DNA-abhängige RNA-Polymerase mit hoher Promotor-Spezifität. Nur DNA hinter dem T3-Promotor wird transkribiert.
Spezifität
Promotorspezifität
T3-RNA-Polymerase ist extrem promotorspezifisch und transkribiert nur Bakteriophage-T3-DNA oder hinter einem T3-Promotor klonierte DNA.
Hitzeinaktivierung: Die Reaktion wird durch Zugabe von 2 μl 0,2 M EDTA (pH 8,0) und/oder Erwärmung auf 65 °C gestoppt.
T3-RNA-Polymerase ist extrem promotorspezifisch und transkribiert nur Bakteriophage-T3-DNA oder hinter einem T3-Promotor klonierte DNA.
Hitzeinaktivierung: Die Reaktion wird durch Zugabe von 2 μl 0,2 M EDTA (pH 8,0) und/oder Erwärmung auf 65 °C gestoppt.
Anwendung
T3-RNA-Polymerase kann RNA von hinter einem T3-Promotor klonierten DNA-Templates transkribieren. Die Synthese kann mit markierten NTPs durchgeführt werden, um hochmarkierte RNA herzustellen. Synthetisierte RNA kann in vielen Anwendungen eingesetzt werden, einschließlich:
- RNA- oder DNA-Blotting-Techniken
- In-situ-Hybridisierung
- RNase-Schutz-Untersuchungen: Durch das Enzym synthetisierte Transkripte werden als Vorläufer-RNA zum Untersuchen von RNA-Splicing und -Prozessierung verwendet.
- Synthese von RNA mit Cap-Struktur in vitro unter Zugabe von m7GpppG oder m7GpppA über GTP oder ATP während der Transkriptionsreaktion. Die generierte Antisense-RNA kann in Zellen eingeführt werden, um die Expression der entsprechenden Gene zu unterdrücken.
Verpackung
1 Kit mit 2 Komponenten
Qualität
Nach Maßgabe der aktuellen Qualitätskontrollverfahren frei von Endonuklease, Nicking-Aktivität und RNasen. Funktionstest mit dem SP6/T7-Transkriptions-Kit.
Spezifikationen
Volumenaktivität: = 20 U/μl
Synthese von Hybridisierungssonden: T3-RNA-Polymerase ermöglicht die hocheffiziente Produktion von homogen markierter RNA. Diese markierte RNA kann als Hybridisierungssonden in Southern, Northern und Dot Blots sowie In-situ-Hybridisierungen verwendet werden.
Geeignete Markierungen: Transkripte können nicht-radioaktiv mit Biotin-16-UTP, DIG-11-UTP oder Fluorescein-12-UTP markiert werden. Sie können auch radioaktiv bis zu einer hochspezifischen Aktivität mit [a-32P]- oder [a-35S]-markierten Nukleotiden markiert werden.
Hinweis: Roche hat 10x konzentrierte RNA-Markierungsmischungen, die spezifisch für die DIG-, Biotin- oder Fluorescein-Markierung konzipiert wurden. Diese Mischungen funktionieren gut mit T3-RNA-Polymerase.
Synthese von Hybridisierungssonden: T3-RNA-Polymerase ermöglicht die hocheffiziente Produktion von homogen markierter RNA. Diese markierte RNA kann als Hybridisierungssonden in Southern, Northern und Dot Blots sowie In-situ-Hybridisierungen verwendet werden.
Geeignete Markierungen: Transkripte können nicht-radioaktiv mit Biotin-16-UTP, DIG-11-UTP oder Fluorescein-12-UTP markiert werden. Sie können auch radioaktiv bis zu einer hochspezifischen Aktivität mit [a-32P]- oder [a-35S]-markierten Nukleotiden markiert werden.
Hinweis: Roche hat 10x konzentrierte RNA-Markierungsmischungen, die spezifisch für die DIG-, Biotin- oder Fluorescein-Markierung konzipiert wurden. Diese Mischungen funktionieren gut mit T3-RNA-Polymerase.
Einheitendefinition
Eine Einheit ist die Enzymaktivität, die 1 nmol CMP innerhalb von 60 Minuten bei +37 °C in säurefällbare RNA einbaut.
Volumenaktivität: ≥20 U/μl
Volumenaktivität: ≥20 U/μl
Angaben zur Herstellung
Aktivator: BSA/Spermin
Lagerung und Haltbarkeit
Behälter dicht verschlossen an einem trockenen und gut belüfteten Ort aufbewahren.
Sonstige Hinweise
Nur für die Life-Science-Forschung. Nicht für den Einsatz in diagnostischen Verfahren geeignet.
Nur Kit-Komponenten
Produkt-Nr.
Beschreibung
- T3 RNA Polymerase, in buffer, pH 7.9 ≥20 U/μl
- Transcription Buffer 10x concentrated
Signalwort
Warning
H-Sätze
Gefahreneinstufungen
Eye Irrit. 2
Lagerklassenschlüssel
12 - Non Combustible Liquids
WGK
WGK 2
Flammpunkt (°F)
does not flash
Flammpunkt (°C)
does not flash
Analysenzertifikate (COA)
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