P8044

蛋白酶 K 来源于林伯氏白色念球菌

≥3.0 unit/mg solid, lyophilized powder

• 同義詞: 肽链内切酶
• CAS號碼: 39450-01-6
• 酶委員會編號: 3.4.21.64 (BRENDA, IUBMB)
• EC號碼: 254-457-8
• MDL號碼: MFCD00132129
• 分類程式碼代碼: 12352204
• eCl@ss: 32160410
• NACRES: NA.54

屬性

• 生物源: maize; microbial (T.album; T. ALBUM); plant seeds (barley); soybean; yeast
• 品質等級: 200
• 形狀: lyophilized powder
• 比活性: ≥3.0 unit/mg solid
• 分子量: 28.93 kDa
• 成份: Protein, ≥15% biuret
• 技術: DNA extraction: suitable
• 應用: diagnostic assay manufacturing
• 儲存溫度: −20°C

描述

應用

在分离 DNA 和 RNA 期间，蛋白酶 K 可用于核酸酶的蛋白水解失活。它用于清除与阳离子蛋白质（如溶菌酶和核糖核酸酶 A）结合的内毒素。它还可用于分离肝脏、酵母和绿豆线粒体，并用于确定酶在膜上的定位。此外，它用于处理石蜡包埋的组织切片，有助于暴露抗原结合位点和用于消化脑组织样品中蛋白质。产品 P8044 冻干粉有售。

在分离DNA和RNA的过程中，用于核酸酶的蛋白水解失活。
用于去除内毒素结合的阳离子蛋白，如溶菌酶和核糖核酸酶A。
据报道，其可用于分离肝、酵母和绿豆线粒体
用于测定酶在细胞膜上的定位
用于石蜡包埋组织切片的处理，暴露用于抗体标记的抗原结合位点。
用于可传播海绵状脑病(TSE)研究中朊病毒脑组织样本蛋白的消化。

该酶（来自 Sigma）可用于在从解脂耶氏酵母中提取泛醌之前，降解复合物 I（NADH：泛醌氧化还原酶）。它也可用于检测蛋白酶 k 对极腐霉的影响。在沉淀浆液中，它也可使水解的肽键的种类最大化，而酶本身不会自溶产生氨基酸。

生化／生理作用

蛋白酶 K 对天然蛋白质活性高。它具有广泛的特异性，即使在自然状态下也会降解许多蛋白质。它主要裂解与脂肪族羧基相邻的肽键，以及带有受阻 α-氨基的芳香族氨基酸。 最佳 pH 值为 7.5-9.0，等电点为 8.9。激活需要 Ca²⁺（1-5mM）。蛋白酶 K 被二异丙基氟磷酸盐（DFIP）和苯基甲磺酰氟（PMSF）抑制。

蛋白酶K是一种稳定且具有高活性的丝氨酸蛋白酶。晶体和分子结构研究证据表明该酶属于枯草素家族，具有活性位点催化三联体(Asp³⁹-His⁶⁹-Ser²²⁴)。它在一系列广泛的环境中均稳定：pH，缓冲盐，去污剂（SDS）以及温度。 在0.1-0.5% SDS存在的情况下，蛋白酶K可保持活性，在不损害分离DNA完整性的前提下，可以消化DNA制剂中的多种蛋白质和核酸酶。

單位定義

在 pH7.5，37℃ 下，一个单位的酶将水解尿素变性血红蛋白，并产生相当于每分钟 1.0 μmole 酪氨酸的颜色（Folin-Ciocalteu 试剂的颜色）。

安全資訊

• 象形圖: GHS08,GHS07
• 訊號詞: Danger
• 危險聲明: H315,H319,H334,H335
• 防範說明: P261 - P264 - P271 - P280 - P302 + P352 - P305 + P351 + P338
• 危險分類: Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
• 標靶器官: Respiratory system
• 儲存類別代碼: 11 - Combustible Solids
• 水污染物質分類（WGK）: WGK 1
• 閃點（°F）: Not applicable
• 閃點（°C）: Not applicable
• 個人防護裝備: dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves