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P4850

Sigma-Aldrich

蛋白酶 K 来源于林伯氏白色念球菌

buffered aqueous glycerol solution, for molecular biology, ≥800 units/mL

同義詞:

肽链内切酶

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About This Item

CAS號碼:
39450-01-6
酶委員會編號:
3.4.21.64 (BRENDA, IUBMB)
MDL號碼:
MFCD00132129
分類程式碼代碼:
12352204
NACRES:
NA.54

等級

for molecular biology

品質等級

200

形狀

buffered aqueous glycerol solution

分子量

28.93 kDa

濃度

≥10 mg/mL
≥800 units/mL

雜質

≤0.5 ppm DNA (PicoGreen® assay)

異物活動

DNase, Nickase and RNase, none detected

儲存溫度

2-8°C

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應用

在分离DNA和RNA的过程中，用于核酸酶的蛋白水解失活。
用于去除内毒素结合的阳离子蛋白，如溶菌酶和核糖核酸酶A。
据报道，其可用于分离肝、酵母和绿豆线粒体
用于测定酶在细胞膜上的定位
用于石蜡包埋组织切片的处理，暴露用于抗体标记的抗原结合位点。
用于可传播海绵状脑病(TSE)研究中朊病毒脑组织样本蛋白的消化。
来源于白色念球菌（Tritirachium album）的蛋白酶K已被用于：
  • 牛子宫内膜上皮细胞疱疹病毒DNA的提取
  • 从鼻拭子中提取病毒RNA
  • 作为锁相和直接PCR裂解缓冲液的成分

该产品已被用于研究其对丝素蛋白的预处理效果。该研究对羟基磷灰石（HAp）的晶体学性质，以及复合材料的微观结构和显微硬度进行了分析。该酶还可用于利用FISH技术促进探针对rRNA的标记，从而对致病性 金黄色葡萄球菌进行检测。

生化／生理作用

蛋白酶K具有广泛的特异性，即使在天然状态下也可降解许多蛋白质。它主要切割脂肪族和芳香族氨基酸（带有封闭的α-氨基）的羧基相邻的肽键。根据氨基酸序列，蛋白酶K的分子量为28,930Da 根据SDS-PAGE，其分子量为28,500Da。最适pH值在7.5-9.0之间 其等电点为8.9。其需要Ca2+（1-5mM）进行激活。蛋白酶K可被DIFP（二异丙基氟磷酸盐）或PMSF（苯甲基磺酰氟）抑制。
蛋白酶K是一种稳定且具有高活性的丝氨酸蛋白酶。晶体和分子结构研究证据表明该酶属于枯草素家族，具有活性位点催化三联体(Asp39-His69-Ser224)。它在一系列广泛的环境中均稳定：pH，缓冲盐，去污剂（SDS）以及温度。 在0.1-0.5% SDS存在的情况下，蛋白酶K可保持活性，在不损害分离DNA完整性的前提下，可以消化DNA制剂中的多种蛋白质和核酸酶。

單位定義

在pH7.5,37℃条件下，一个单位每分钟可将尿素变性血红蛋白水解并生成相当于1.0 μmole酪氨酸的颜色（利用Folin-Ciocalteu试剂进行显色）。

外觀

溶于含有10mM Tris-HCl（pH 7.5）和1mM乙酸钙的40％甘油（v / v）溶液中。

法律資訊

PicoGreen is a registered trademark of Life Technologies

象形圖

Health hazard
GHS08

訊號詞

Danger

危險聲明

H334

防範說明

P261 - P284 - P501

危險分類

Resp. Sens. 1

儲存類別代碼

10 - Combustible liquids

水污染物質分類（WGK）

WGK 2

閃點（°F）

Not applicable

閃點（°C）

Not applicable

個人防護裝備

Eyeshields, Faceshields, Gloves, type ABEK (EN14387) respirator filter

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Enzymatic Assay of Proteinase K with Hemoglobin Substrate

Proteinase K (EC 3.4.21.64) activity can be measured spectrophotometrically using hemoglobin as the substrate. Proteinase K hydrolyzes hemoglobin denatured with urea, and liberates Folin-postive amino acids and peptides. One unit will hydrolyze hemoglobin to produce color equivalent to 1.0 μmol of tyrosine per minute at pH 7.5 at 37 °C (color by Folin & Ciocalteu's Phenol Reagent).

條款

Enzymatic Assay of Proteinase K (EC 3.4.21.64)

Proteinase K (EC 3.4.21.64) activity can be measured spectrophotometrically using hemoglobin as the substrate. Proteinase K hydrolyzes hemoglobin denatured with urea, and liberates Folin-postive amino acids and peptides. One unit will hydrolyze hemoglobin to produce color equivalent to 1.0 μmol of tyrosine per minute at pH 7.5 at 37 °C (color by Folin & Ciocalteu's Phenol Reagent).

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