Procedura oczyszczania GenElute™ PCR

Wideo: Procedura oczyszczania PCR

Product No. NA1020

Zestaw GenElute™ PCR Clean-up Kit jest przeznaczony do szybkiego oczyszczania jednoniciowych lub dwuniciowych produktów amplifikacji PCR (od 100 bp do 10 kb) z innych składników reakcji, takich jak nadmiar starterów, nukleotydów, polimerazy DNA, oleju i soli. Oczyszczanie DNA odbywa się w kilku prostych krokach. Oczyszczone DNA może być wykorzystywane w reakcjach enzymatycznych, konwencjonalnym lub zautomatyzowanym sekwencjonowaniu, klonowaniu i analizie mikromacierzy.

• Ilość początkowa - 100 µL lub 10 µg DNA
• Wydajność - odzyskuje do 95% fragmentów PCR o wielkości od 100 bp do 10 kb
• Szybkość - oczyszcza do 100 µL lub 10 µg DNA amplifikowanego metodą PCR w kilku prostych krokach.g DNA amplifikowanego metodą PCR w ciągu 5 minut
• Elastyczność - DNA zatężone w 50 µL buforu
• Ekonomiczność - 40% więcej oczyszczeń niż w przypadku lidera rynku

Wystarcza na 70 oczyszczeń.

Kroki oczyszczania PCR

1. Włóż kolumnę wiążącą do dostarczonej probówki zbiorczej.

2. Dodaj 0.

3. Dodaj 0,5 ml roztworu przygotowującego kolumnę do każdej kolumny miniprep.

4. Wiruj z prędkością 12 000 x g przez 1 minutę.

5. Po 1 minucie odrzuć eluat.

6. Przenieść mieszaninę reakcji PCR do każdej probówki.

7. Dodać 5 objętości roztworu wiążącego do 1 objętości reakcji PCR i wymieszać.

8. Przenieść roztwór do kolumny wiążącej.

9. Wiruj z maksymalną prędkością przez 1 minutę.

10. Po 1 minucie wyrzuć eluat, ale zachowaj probówkę zbierającą.

11. Dodaj 0.5 ml rozcieńczonego roztworu płuczącego do kolumny.

12. Wiruj z maksymalną prędkością przez 1 minutę.

13. Po 1 minucie odrzuć eluat, umieść kolumnę z powrotem w probówce.

14. Wiruj z maksymalną prędkością przez 2 minuty (bez dodawania dodatkowego roztworu płuczącego)

15. Po 2 minutach odrzuć pozostały eluat i probówkę zbiorczą. Przenieś kolumnę do nowej probówki o pojemności 2 ml.

16. Dodaj 50 µL roztworu elucyjnego na środek każdej kolumny.

17. Wiruj z maksymalną prędkością przez 1 minutę.

18. Po 1 minucie wyrzucić kolumnę.

19. Produkty amplifikacji PCR są teraz prezentowane w eluacie. 

.