SCR526M
Alzheimer w naczyniu™ Lentiwirus APPSL-GFP
Synonim(y):
APPSL-GFP , ReNcell 3D Alzheimers Model, ADID 3D Neural Cell Model
Zaloguj sięWyświetlanie cen organizacyjnych i kontraktowych
About This Item
Kod UNSPSC:
12352207
eCl@ss:
32161000
NACRES:
NA.52
Polecane produkty
reaktywność gatunkowa
human
Poziom jakości
metody
cell culture | mammalian: suitable
cell culture | stem cell: suitable
cell differentiation: suitable
Opis ogólny
Blaszki amyloidu-beta i splątki neurofibrylarne są kluczowymi cechami patologicznymi obserwowanymi w mózgach pacjentów z chorobą Alzheimera. Rodzinne, wczesne postacie choroby Alzheimera (FAD) są powodowane przez autosomalne dominujące mutacje genetyczne i oferują możliwość badania wpływu kluczowych mutacji na postęp i patologię choroby. Do tej pory zgłoszono około 200 mutacji FAD w APP i/lub PSEN1. Transgeniczne modele mysie i ludzkie neurony zawierające mutacje FAD w PSEN-1 i/lub APP są szeroko stosowane jako systemy modelowe i zapewniają ważny wgląd w chorobę. Transgeniczne modele mysie są w stanie odtworzyć utratę funkcji poznawczych wraz ze zwiększonym odkładaniem się blaszek b-amyloidowych, ale nie są w stanie wykazać splątków neurofibrylarnych, jednej z kluczowych cech patologicznych AD. Podobnie ludzkie neurony iPSC pochodzące od pacjentów z FAD wykazywały zwiększony poziom patogennych gatunków AB i fosforylowanego tau, ale nie wykazywały charakterystycznych blaszek amyloidu-beta i splątków neurofibrylarnych.
Niedawno opisano model 3D wykorzystujący genetycznie zmodyfikowane ludzkie neuronalne komórki macierzyste, które nadeksprymują mutacje FAD, aby odtworzyć dwie patologiczne cechy AD: blaszki b-amyloidowe i splątki neurofibrylarne. Lentiwirusy wyrażające mutacje FAD w ludzkim APP z mutacjami K670N/M671L (Szwecja) i V717I (Londyn) (APPSL) i/lub PSEN1 z mutacją E9 (PSEN1(E9)) i APPSL/PSEN1(E9) wraz z białkami fluorescencyjnymi jako reporterami infekcji wirusowej (patrz poniżej), zostały użyte do transfekcji ludzkich neuronalnych komórek macierzystych ReNcell VM. FACS wykorzystano do wzbogacenia komórek o najwyższej ekspresji transgenu, a następnie zamknięto posortowane komórki w systemie hodowli 3D Matrigel. Po około 6 tygodniach różnicowania zaobserwowano agregację AB. Silna akumulacja fosforylowanego tau wzdłuż splotów neurofibrylarnych była łatwo wykrywalna po 10-14 tygodniach.
Alzheimer w naczyniu<TMSYMBOL></TMSYMBOL> Lentiwirus APPSL-GFP jest niezbędnym odczynnikiem do stworzenia systemu hodowli 3D Alzheimera. Lentiwirus zawiera mutacje APPSL FAD i może być stosowany do infekowania ludzkich komórek nerwowych. Znacznik TagGFP2 umożliwia ocenę zakaźności wirusa i pozwala na sortowanie FACS komórek o najwyższej ekspresji.
Niedawno opisano model 3D wykorzystujący genetycznie zmodyfikowane ludzkie neuronalne komórki macierzyste, które nadeksprymują mutacje FAD, aby odtworzyć dwie patologiczne cechy AD: blaszki b-amyloidowe i splątki neurofibrylarne. Lentiwirusy wyrażające mutacje FAD w ludzkim APP z mutacjami K670N/M671L (Szwecja) i V717I (Londyn) (APPSL) i/lub PSEN1 z mutacją E9 (PSEN1(E9)) i APPSL/PSEN1(E9) wraz z białkami fluorescencyjnymi jako reporterami infekcji wirusowej (patrz poniżej), zostały użyte do transfekcji ludzkich neuronalnych komórek macierzystych ReNcell VM. FACS wykorzystano do wzbogacenia komórek o najwyższej ekspresji transgenu, a następnie zamknięto posortowane komórki w systemie hodowli 3D Matrigel. Po około 6 tygodniach różnicowania zaobserwowano agregację AB. Silna akumulacja fosforylowanego tau wzdłuż splotów neurofibrylarnych była łatwo wykrywalna po 10-14 tygodniach.
Alzheimer w naczyniu<TMSYMBOL></TMSYMBOL> Lentiwirus APPSL-GFP jest niezbędnym odczynnikiem do stworzenia systemu hodowli 3D Alzheimera. Lentiwirus zawiera mutacje APPSL FAD i może być stosowany do infekowania ludzkich komórek nerwowych. Znacznik TagGFP2 umożliwia ocenę zakaźności wirusa i pozwala na sortowanie FACS komórek o najwyższej ekspresji.
Zastosowanie
Research Category
Stem Cell Research
Neuroscience
Stem Cell Research
Neuroscience
Komponenty
APPSL-GFP Alzheimer’s Lentivirus: (Part No. CS222734) One (1) vial containing 15 µL of high titer lentiviral particles. Store at -80°C.
Note: For exact viral titer, refer to the label on the vial.
Note: For exact viral titer, refer to the label on the vial.
Jakość
The packaged lentivector constructs are provided as frozen VSV-G pseudotyped viral particles. The titer (ifus/ml) is defined by SBI’s Global UltraRapid Lentiviral Titer Kit (Cat. # LV961A-1) in HT1080 cells transduced by the packaged constructs.
Przechowywanie i stabilność
Przechowywanie i obsługa
Lentiwirus jest stabilny przez co najmniej 6 miesięcy, gdy jest przechowywany w temperaturze -80°C. Po pierwszym rozmrożeniu natychmiast umieścić w lodzie i przechowywać w porcjach roboczych, aby uniknąć dalszego zamrażania. Należy unikać zamrażania, ponieważ spowoduje to spadek miana wirusa.
Ważna uwaga dotycząca bezpieczeństwa:
- Wektory lentiwirusowe z defektem replikacji nie wywołują żadnych chorób u ludzi ani zwierząt. Jednakże, lentiwirusy mogą integrować się z genomem komórki gospodarza i tym samym stwarzać pewne ryzyko mutagenezy insercyjnej.
- Podczas korzystania z tego produktu należy nosić rękawiczki. Należy unikać kontaktu ze skórą lub połknięcia wszystkich odczynników i substancji chemicznych używanych w tym protokole.
- Lentiwirusy należą do grupy ryzyka 2 i należy się z nimi obchodzić zgodnie z zatwierdzonym poziomem bezpieczeństwa biologicznego 2 (BSL2).
Lentiwirus jest stabilny przez co najmniej 6 miesięcy, gdy jest przechowywany w temperaturze -80°C. Po pierwszym rozmrożeniu natychmiast umieścić w lodzie i przechowywać w porcjach roboczych, aby uniknąć dalszego zamrażania. Należy unikać zamrażania, ponieważ spowoduje to spadek miana wirusa.
Ważna uwaga dotycząca bezpieczeństwa:
- Wektory lentiwirusowe z defektem replikacji nie wywołują żadnych chorób u ludzi ani zwierząt. Jednakże, lentiwirusy mogą integrować się z genomem komórki gospodarza i tym samym stwarzać pewne ryzyko mutagenezy insercyjnej.
- Podczas korzystania z tego produktu należy nosić rękawiczki. Należy unikać kontaktu ze skórą lub połknięcia wszystkich odczynników i substancji chemicznych używanych w tym protokole.
- Lentiwirusy należą do grupy ryzyka 2 i należy się z nimi obchodzić zgodnie z zatwierdzonym poziomem bezpieczeństwa biologicznego 2 (BSL2).
Informacje prawne
Alzheimer′s in a Dish is a trademark of The General Hospital Corporation
Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.
Kod klasy składowania
12 - Non Combustible Liquids
Temperatura zapłonu (°F)
Not applicable
Temperatura zapłonu (°C)
Not applicable
Certyfikaty analizy (CoA)
Poszukaj Certyfikaty analizy (CoA), wpisując numer partii/serii produktów. Numery serii i partii można znaleźć na etykiecie produktu po słowach „seria” lub „partia”.
Masz już ten produkt?
Dokumenty związane z niedawno zakupionymi produktami zostały zamieszczone w Bibliotece dokumentów.
Natalie S Ryan et al.
Biomarkers in medicine, 4(1), 99-112 (2010-04-14)
Alzheimer's disease (AD) causes devastating cognitive impairment and an intense research effort is currently devoted to developing improved treatments for it. A minority of cases occur at a particularly young age and are caused by autosomal dominantly inherited genetic mutations.
Young Hye Kim et al.
Nature protocols, 10(7), 985-1006 (2015-06-13)
Stem cell technologies have facilitated the development of human cellular disease models that can be used to study pathogenesis and test therapeutic candidates. These models hold promise for complex neurological diseases such as Alzheimer's disease (AD), because existing animal models
Protokoły
A stem cell culture protocol to generate 3D NSC models of Alzheimer’s disease using ReNcell human neural stem cell lines.
Protokół hodowli komórek macierzystych do generowania modeli 3D NSC choroby Alzheimera z wykorzystaniem linii ludzkich neuronalnych komórek macierzystych ReNcell.
Nasz zespół naukowców ma doświadczenie we wszystkich obszarach badań, w tym w naukach przyrodniczych, materiałoznawstwie, syntezie chemicznej, chromatografii, analityce i wielu innych dziedzinach.
Skontaktuj się z zespołem ds. pomocy technicznej