Przejdź do zawartości
Merck
Wszystkie zdjęcia(3)

Kluczowe dokumenty

HTS110M

Sigma-Aldrich

Preparat błonowy ChemiSCREEN Rekombinowany ludzki receptor serotoniny 5-HT4B

Human 5-HT4 GPCR membrane preparation for Radioligand binding Assays & GTPγS binding.

Zaloguj sięWyświetlanie cen organizacyjnych i kontraktowych


About This Item

Kod UNSPSC:
41106514
eCl@ss:
32161000
NACRES:
NA.84

pochodzenie biologiczne

human

Poziom jakości

rekombinowane

expressed in Chem-1 cells

producent / nazwa handlowa

ChemiScreen
Chemicon®

metody

ligand binding assay: suitable (GTPγS)
radioligand binding assay (RLBA): suitable

numer dostępu NCBI

numer dostępu UniProt

Warunki transportu

dry ice

Opis ogólny

5-hydroksytryptamina (5-HT, powszechnie znana również jako serotonina) jest syntetyzowana w komórkach enterochromafinowych w jelicie oraz w zakończeniach nerwów serotoninergicznych. Na obwodzie 5-HT pośredniczy w motoryce przewodu pokarmowego, agregacji płytek krwi i skurczu naczyń krwionośnych. 5-HT wpływa na wiele funkcji ośrodkowego układu nerwowego, w tym sen, aktywność ruchową, percepcję sensoryczną, pobudzenie i apetyt. Rodzina 12 GPCR i jeden kanał jonowy pośredniczą w biologicznym działaniu 5-HT (Hoyer i in., 1994). 5-HT4 obejmuje co najmniej 8 izoform różniących się na C-końcu, które są generowane przez alternatywny splicing. Ekspresja i dystrybucja tych wariantów splicingu różni się w zależności od narządów i tkanek, przy czym wiele z nich występuje w kilku tkankach, takich jak przedsionek, mózg i przewód pokarmowy (Bockaert i in. 2004). Do tej pory wykazano, że wszystkie izoformy aktywują cyklazę adenylową in vitro i nie wykazano różnic w transdukcji sygnału między C-końcowymi wariantami receptora 5-HT4. Receptory 5-HT4 są potencjalnie interesujące w leczeniu pacjentów z zaburzeniami motoryki przewodu pokarmowego i chorobą Alzheimera (De Maeyer et al. 2008; Lezoualc'h 2007). Preparaty błonowe 5-HT4B firmy Millipore są surowymi preparatami błonowymi wykonanymi z naszych zastrzeżonych stabilnych rekombinowanych linii komórkowych w celu zapewnienia wysokiego poziomu ekspresji powierzchniowej GPCR; dlatego są idealnymi narzędziami HTS do badań przesiewowych agonistów i antagonistów 5-HT4B. Preparaty błonowe wykazują Kd 0,46 nM dla[3H]-GR113808. Przy 1 nM[3H]-GR113808, 5 μg / studzienkę 5-HT4B Membrane Prep daje ponad 10-krotny stosunek sygnału do tła.
Ludzki HTR4, transkrypt b, kodujący 5-HT4B

Zastosowanie

Preparat błonowy ludzkiego GPCR 5-HT4 do testów wiązania radioligandów i wiązania GTPγS.
Test wiązania radioligandu i wiązanie GTPγS.

Działania biochem./fizjol.

GPCR Class: A
Protein Target: 5-HT4
Target Sub-Family: Serotonin

Jakość

Table 1. Signal:background and specific binding values obtained in a competition binding assay with varying amounts of 5-HT4B membrane prep.
10 µg/well 5 µg/well
Signal:Background 26.4 21.7
Specific Binding (cpm) 5286 4879

SPECIFICATIONS: 1 unit = 5 μg membrane preparation
Bmax: 12.5 pmol/mg
Kd: 2.7 nM for [3H]-GR113808

Charakterystyka techniczna

Warunki inkubacji
ZALECANE WARUNKI BADANIA: Membrany są mieszane z radioaktywnym ligandem i nieznakowanym konkurentem (patrz rysunki 1 i 2 dla badanych stężeń) w buforze testowym na niewiążącej 96-dołkowej płytce i inkubowane przez 1-2 h. Przed filtracją 96-dołkowa płytka zbiorcza FC (Millipore nr kat. MAHF C1H) jest powlekana 0,33% polietylenoiminą przez 30 minut, a następnie przemywana buforem testowym. Reakcja wiązania jest przenoszona na płytkę filtracyjną i płukana 3 razy (1 ml na studzienkę na płukanie) buforem testowym. Płytka jest suszona i liczona.

Bufor testowy: 25 mM Tris, pH 7,4, filtrowany i przechowywany w temperaturze 4°C.

Radioligand:[3H]-GR113808 (Amersham TRK944)

Jedno opakowanie zawiera membrany wystarczające na co najmniej 200 testów (jednostek), gdzie jedna jednostka to ilość membrany, która da ponad 10-krotny stosunek sygnału do tła ze znakowanym 3HGR113808 przy 1 nM.

Postać fizyczna

Płyn w buforze opakowaniowym: 50 mM Tris pH 7,4, 10% glicerol i 1% BSA bez konserwantów.
Metoda pakowania: Białko błonowe dostosowano do wskazanego stężenia w buforze do pakowania, szybko zamrożono i przechowywano w temperaturze -80°C.

Przechowywanie i stabilność

Przechowywać w temperaturze -70°C. Produkt jest stabilny przez co najmniej 6 miesięcy od daty otrzymania, jeśli jest przechowywany zgodnie z zaleceniami. Nie zamrażać i nie rozmrażać.

Informacje prawne

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Oświadczenie o zrzeczeniu się odpowiedzialności

RESEARCH USE ONLY. This product is regulated in France when intended to be used for scientific purposes, including for import and export activities (Article L 1211-1 paragraph 2 of the Public Health Code). The purchaser (i.e. enduser) is required to obtain an import authorization from the France Ministry of Research referred in the Article L1245-5-1 II. of Public Health Code. By ordering this product, you are confirming that you have obtained the proper import authorization.

Unless otherwise stated in our catalog or other company documentation accompanying the product(s), our products are intended for research use only and are not to be used for any other purpose, which includes but is not limited to, unauthorized commercial uses, in vitro diagnostic uses, ex vivo or in vivo therapeutic uses or any type of consumption or application to humans or animals.
Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Kod klasy składowania

12 - Non Combustible Liquids

Klasa zagrożenia wodnego (WGK)

WGK 2

Temperatura zapłonu (°F)

Not applicable

Temperatura zapłonu (°C)

Not applicable


Certyfikaty analizy (CoA)

Poszukaj Certyfikaty analizy (CoA), wpisując numer partii/serii produktów. Numery serii i partii można znaleźć na etykiecie produktu po słowach „seria” lub „partia”.

Masz już ten produkt?

Dokumenty związane z niedawno zakupionymi produktami zostały zamieszczone w Bibliotece dokumentów.

Odwiedź Bibliotekę dokumentów

Nasz zespół naukowców ma doświadczenie we wszystkich obszarach badań, w tym w naukach przyrodniczych, materiałoznawstwie, syntezie chemicznej, chromatografii, analityce i wielu innych dziedzinach.

Skontaktuj się z zespołem ds. pomocy technicznej