Przejdź do zawartości
Merck
Wszystkie zdjęcia(2)

Kluczowe dokumenty

HTS084M

Sigma-Aldrich

ChemiScreen BB2 Preparat błony receptora bombesiny

Human BB2 GPCR membrane preparation for Radioligand binding Assays & GTPγS binding.

Zaloguj sięWyświetlanie cen organizacyjnych i kontraktowych


About This Item

Kod UNSPSC:
41106514
eCl@ss:
32161000
NACRES:
NA.84

pochodzenie biologiczne

human

Poziom jakości

rekombinowane

expressed in Chem-1 cells

producent / nazwa handlowa

ChemiScreen
Chemicon®

metody

ligand binding assay: suitable (GTPγS)
radioligand binding assay (RLBA): suitable

numer dostępu UniProt

Warunki transportu

dry ice

Opis ogólny

Bombesyna, bioaktywny peptyd po raz pierwszy zidentyfikowany w skórze płazów, jest spokrewniony z dwoma peptydami ssaków, peptydem uwalniającym gastrynę (GRP) i neuromedyną B. Rodzina 3 receptorów GPCR, w tym NMB-R (BB1), GRP-R (BB2) i BRS-3 (BB3), pośredniczy w biologicznym działaniu peptydów. Receptory różnią się powinowactwem do peptydów. Wiązanie ligandu z BB2 aktywuje Gq w celu zwiększenia wewnątrzkomórkowego stężenia wapnia. GRP stymuluje uwalnianie gastryny z komórek endokrynnych i stymuluje aktywność mięśni gładkich w przewodzie pokarmowym. Ponadto wiązanie GRP z BB2 stymuluje proliferację różnych typów komórek i jest związane z progresją drobnokomórkowego raka płuc i innych nowotworów złośliwych. OUN jest również głównym miejscem ekspresji GRP, a GRP i BB2 są zaangażowane w zegar dobowy, uwarunkowany strach i przyjmowanie pokarmu (Ohki-Hamazaki i in., 2005). Preparaty błonowe BB2 firmy Chemicon są surowymi preparatami błonowymi wykonanymi z naszych zastrzeżonych stabilnych rekombinowanych linii komórkowych w celu zapewnienia wysokiego poziomu ekspresji powierzchniowej GPCR; dlatego są idealnymi narzędziami HTS do badań przesiewowych antagonistów interakcji BB2 i jego ligandów. Preparaty błonowe wykazują Kd 0,114 nM dla[125I]-Tyr4-Bombesin. Przy 0,3 nM[125I]-Tyr4-Bombesin, preparaty membranowe BB2 o objętości 5 µg/basen lub 10 µg/basen dają zazwyczaj ponad 20-krotny stosunek sygnału do tła.
Pełnej długości ludzki GRPR cDNA kodujący BB2

Zastosowanie

Preparat błonowy ludzkiego BB2 GPCR do testów wiązania radioligandów i wiązania GTPγS.
Test wiązania radioligandu i wiązanie GTPγS.

Działania biochem./fizjol.

GPCR Class: A
Protein Target: BB2
Target Sub-Family: Bombesin

Jakość

Signal:background and specific binding values obtained in a competition binding assay with varying amounts of BB2 membrane prep:
10 µg/well5 µg/well
Signal:Background 24 23
Specific Binding (cpm) 19,260 12,610


SPECIFICATION: Bmax: 1.28 pmol/mg; Kd: 0.114 nM

Charakterystyka techniczna

Warunki indukcji
Membrany są mieszane z radioaktywnym ligandem i nieznakowanym konkurentem (patrz rysunki 1 i 2 dla badanych stężeń) w buforze wiążącym na niewiążącej 96-dołkowej płytce i inkubowane przez 1-2 h. Przed filtracją 96-dołkowa płytka filtracyjna GF/C jest powlekana 0,33% polietylenoiminą przez 30 min, a następnie przemywana 50 mM HEPES, pH 7,4, 0,5% BSA. Reakcja wiązania jest przenoszona na płytkę filtracyjną i przemywana 3 razy (1 ml na studzienkę na przemywanie) buforem do przemywania. Płytka jest suszona i liczona.
Bufor wiążący: 50 mM Tris, pH 7,4, 10 mM MgCl2, 1 mM EDTA, filtrowany i przechowywany w temperaturze 4°C.
Radioligand:[125I]-Tyr4-Bombesin (Perkin Elmer#:NEX-258 )
Bufor płuczący: 50 mM Tris, pH 7,4, filtrowany i przechowywany w temperaturze 4°C.
Jedno opakowanie zawiera wystarczającą ilość membran na co najmniej 200 testów (jednostek), gdzie jednostka to ilość membrany, która da ponad 10-krotny stosunek sygnału do tła z bombesiną znakowaną 125Iprzy 0,3 nM.

Postać fizyczna

Płyn w buforze opakowaniowym: 50 mM Tris pH 7,4, 10% glicerol i 1% BSA bez konserwantów.
Metoda pakowania: Białko membranowe dostosowano do 0,5 mg/ml w 1 ml buforu do pakowania, szybko zamrożono i przechowywano w temperaturze -80°C.

Przechowywanie i stabilność

Przechowywać zamrożone w temperaturze -70°C przez okres do 2 lat. Nie zamrażać i nie rozmrażać.

Informacje prawne

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Oświadczenie o zrzeczeniu się odpowiedzialności

RESEARCH USE ONLY. This product is regulated in France when intended to be used for scientific purposes, including for import and export activities (Article L 1211-1 paragraph 2 of the Public Health Code). The purchaser (i.e. enduser) is required to obtain an import authorization from the France Ministry of Research referred in the Article L1245-5-1 II. of Public Health Code. By ordering this product, you are confirming that you have obtained the proper import authorization.

Unless otherwise stated in our catalog or other company documentation accompanying the product(s), our products are intended for research use only and are not to be used for any other purpose, which includes but is not limited to, unauthorized commercial uses, in vitro diagnostic uses, ex vivo or in vivo therapeutic uses or any type of consumption or application to humans or animals.
Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Kod klasy składowania

12 - Non Combustible Liquids

Klasa zagrożenia wodnego (WGK)

WGK 2

Temperatura zapłonu (°F)

Not applicable

Temperatura zapłonu (°C)

Not applicable


Certyfikaty analizy (CoA)

Poszukaj Certyfikaty analizy (CoA), wpisując numer partii/serii produktów. Numery serii i partii można znaleźć na etykiecie produktu po słowach „seria” lub „partia”.

Masz już ten produkt?

Dokumenty związane z niedawno zakupionymi produktami zostały zamieszczone w Bibliotece dokumentów.

Odwiedź Bibliotekę dokumentów

Development and function of bombesin-like peptides and their receptors
Ohki-Hamazaki, Hiroko, et al
International Journal of Developmental Biology, 49, 293-300 (2005)

Nasz zespół naukowców ma doświadczenie we wszystkich obszarach badań, w tym w naukach przyrodniczych, materiałoznawstwie, syntezie chemicznej, chromatografii, analityce i wielu innych dziedzinach.

Skontaktuj się z zespołem ds. pomocy technicznej