HTS071M
Preparat błonowy ChemiSCREEN Rekombinowany ludzki receptor chemoatraktantu ChemR23
Human ChemR23 / CMKLR1 GPCR membrane preparation for Radioligand binding Assays & GTPγS binding.
Zaloguj sięWyświetlanie cen organizacyjnych i kontraktowych
About This Item
Kod UNSPSC:
41106514
eCl@ss:
32161000
NACRES:
NA.84
Polecane produkty
pochodzenie biologiczne
human
Poziom jakości
rekombinowane
expressed in Chem-1 cells
producent / nazwa handlowa
ChemiScreen
Chemicon®
metody
ligand binding assay: suitable (GTPγS)
radioligand binding assay (RLBA): suitable
numer dostępu NCBI
numer dostępu UniProt
Warunki transportu
dry ice
Opis ogólny
ChemR23 został odkryty jako sierocy receptor spokrewniony z receptorami chemoatrakcyjnymi C3a, C5a i FPR1 i ulega ekspresji na komórkach dendrytycznych i makrofagach (Samson i in., 1998). Ligand dla ChemR23 został scharakteryzowany jako chemeryna, proteolitycznie przetworzone białko o masie 15 kD występujące w miejscach zapalnych; 9 aminokwasowy peptyd z C-końca chemeryny jest wystarczający do aktywacji ChemR23 (Wittamer i in., 2003, 2004). Chemerin wyrażany w śródbłonku limfoidalnym i mikronaczyniowym pośredniczy w migracji komórek dendrytycznych eksprymujących ChemR23 do narządów limfoidalnych i naczyń krwionośnych w miejscach zapalenia (Vermi i in., 2005). Ponadto stwierdzono, że bioaktywny lipid, resolwina E1, funkcjonalnie oddziałuje z ChemR23 w celu zmniejszenia stanu zapalnego (Arita i in., 2005). Preparaty błonowe ChemR23 firmy Millipore to surowe preparaty błonowe wykonane z naszych zastrzeżonych stabilnych rekombinowanych linii komórkowych w celu zapewnienia wysokiego poziomu ekspresji powierzchniowej GPCR; dlatego są idealnymi narzędziami HTS do badań przesiewowych interakcji ChemR23 z jego ligandami. Preparaty błonowe wykazują EC50 0,37 nM dla chemeryny w teście wiązania GTPγS.
Ludzki ChemR23 o pełnej długości
Zastosowanie
Test wiązania radioligandu i wiązanie GTPγS.
Działania biochem./fizjol.
GPCR Class: A
Protein Target: ChemR23 / CMKLR1
Target Sub-Family: Chemoattractant
Jakość
SPECIFICATIONS: 1 unit = 5 μg
EC50 in GTPγS binding assay by Chemerin: ~ 0.37 nM
EC50 in GTPγS binding assay by Chemerin: ~ 0.37 nM
Charakterystyka techniczna
WARUNKI INUKCJI
WARUNKI ASSAY: Membrany są permeabilizowane przez dodanie saponiny do równego stężenia masowego, a następnie mieszane z[35S]-GTPγS (końcowe stężenie 0,3 nM) w 20 mM HEPES, pH 7,4/100 mM NaCl/10 mM MgCl2/0,5 μM GDP w niewiążącej 96-dołkowej płytce. Nieznakowaną chemerynę dodano do końcowego stężenia wskazanego na rysunku 1 (końcowa objętość 100 μL) i inkubowano przez 30 minut w temperaturze 30°C. Reakcja wiązania jest przenoszona na płytkę filtracyjną GF/B (Millipore MAHF B1H) uprzednio zwilżoną wodą. Płytka jest płukana 3 razy (1 ml na studzienkę na płukanie) zimnym 10 mM fosforanem sodu, pH 7,4, a następnie suszona i liczona.
Jedna fiolka zawiera wystarczającą ilość membran na co najmniej 200 testów (jednostek), gdzie jedna jednostka to ilość membrany, która da więcej niż 1000 cpm specyficznego wiązania [35S]-GTPγS stymulowanego chemeryną.
Oczekuje się, że preparat błonowy ChemR23 będzie funkcjonalny w teście wiązania radioligandu; jednak użytkownik końcowy będzie musiał określić optymalny ligand znakowany radioligandem do stosowania z tym produktem.
WARUNKI ASSAY: Membrany są permeabilizowane przez dodanie saponiny do równego stężenia masowego, a następnie mieszane z[35S]-GTPγS (końcowe stężenie 0,3 nM) w 20 mM HEPES, pH 7,4/100 mM NaCl/10 mM MgCl2/0,5 μM GDP w niewiążącej 96-dołkowej płytce. Nieznakowaną chemerynę dodano do końcowego stężenia wskazanego na rysunku 1 (końcowa objętość 100 μL) i inkubowano przez 30 minut w temperaturze 30°C. Reakcja wiązania jest przenoszona na płytkę filtracyjną GF/B (Millipore MAHF B1H) uprzednio zwilżoną wodą. Płytka jest płukana 3 razy (1 ml na studzienkę na płukanie) zimnym 10 mM fosforanem sodu, pH 7,4, a następnie suszona i liczona.
Jedna fiolka zawiera wystarczającą ilość membran na co najmniej 200 testów (jednostek), gdzie jedna jednostka to ilość membrany, która da więcej niż 1000 cpm specyficznego wiązania [35S]-GTPγS stymulowanego chemeryną.
Oczekuje się, że preparat błonowy ChemR23 będzie funkcjonalny w teście wiązania radioligandu; jednak użytkownik końcowy będzie musiał określić optymalny ligand znakowany radioligandem do stosowania z tym produktem.
Postać fizyczna
Płyn w buforze opakowaniowym: 50 mM Tris pH 7,4, 10% glicerol i 1% BSA bez konserwantów.
Metoda pakowania: Białko membranowe dostosowano do 1 mg/ml w 1 ml buforu do pakowania, szybko zamrożono i przechowywano w temperaturze -80°C
Metoda pakowania: Białko membranowe dostosowano do 1 mg/ml w 1 ml buforu do pakowania, szybko zamrożono i przechowywano w temperaturze -80°C
Przechowywanie i stabilność
Przechowywać zamrożone w temperaturze -70°C przez okres do 2 lat. Nie zamrażać i nie rozmrażać.
Informacje prawne
CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Oświadczenie o zrzeczeniu się odpowiedzialności
Unless otherwise stated in our catalog or other company documentation accompanying the product(s), our products are intended for research use only and are not to be used for any other purpose, which includes but is not limited to, unauthorized commercial uses, in vitro diagnostic uses, ex vivo or in vivo therapeutic uses or any type of consumption or application to humans or animals.
Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.
Kod klasy składowania
12 - Non Combustible Liquids
Klasa zagrożenia wodnego (WGK)
WGK 2
Certyfikaty analizy (CoA)
Poszukaj Certyfikaty analizy (CoA), wpisując numer partii/serii produktów. Numery serii i partii można znaleźć na etykiecie produktu po słowach „seria” lub „partia”.
Masz już ten produkt?
Dokumenty związane z niedawno zakupionymi produktami zostały zamieszczone w Bibliotece dokumentów.
Nasz zespół naukowców ma doświadczenie we wszystkich obszarach badań, w tym w naukach przyrodniczych, materiałoznawstwie, syntezie chemicznej, chromatografii, analityce i wielu innych dziedzinach.
Skontaktuj się z zespołem ds. pomocy technicznej