Opis ogólny
Histon H3.3 (UniProt: P84243) jest kodowany przez gen H3F3A (znany również jako H3.3A, H3F3, PP781, H3F3B, H3.3B) (Gene ID: 3020) u człowieka. Jest to wysoce konserwatywna forma histonu H3, która zastępuje konwencjonalny H3 w szerokim zakresie nukleosomów w aktywnych genach. Histon H 3.3 stanowi dominującą formę histonu H3 w nie dzielących się komórkach i jest włączany do chromatyny niezależnie od syntezy DNA. Histon H3.3 jest związany z aktywnie ekspresjonowanymi genami zarówno u zwierząt, jak i roślin. Jest on głównie wzbogacony w pobliżu miejsc zakończenia transkrypcji (TES) genów i pozytywnie związany z transkrypcją. Histon H3 zawiera główną domenę kulistą i długi N-końcowy ogon i jest zaangażowany w strukturę nukleosomów struktury "koralików na sznurku". N-końcowy ogon histonu H3 wystaje z kulistego rdzenia nukleosomu i może podlegać kilku różnym rodzajom modyfikacji epigenetycznych, które wpływają na procesy komórkowe. Modyfikacje te obejmują kowalencyjne przyłączanie grup metylowych lub acetylowych do aminokwasów lizyny i argininy oraz fosforylację seryny lub treoniny. Na przykład acetylacja na lizynie 10 (H3K9ac; początkowa metionina usunięta) osłabia metylację na arg9 (H3R8me2s), a acetylacja na lizynie 19 (H3K18ac) i lizynie 24 (H3K24ac) sprzyja metylacji na arg18 (H3R17me). Fosforylacja Ser11 (H3S10ph) przez kinazę Aurora B jest kluczowa dla kondensacji chromosomów i progresji cyklu komórkowego podczas mitozy i mejozy. Fosforylacja w Ser11 przez RPS6KA4 i RPS6KA5 jest ważna podczas interfazy, ponieważ umożliwia transkrypcję genów po stymulacji zewnętrznej, takiej jak mitogeny, stres, czynniki wzrostu lub promieniowanie UV i skutkuje aktywacją genów, takich jak c-Fos i c-Jun. Mutacje w histonie H3.3 są związane z wysokim odsetkiem złośliwych nowotworów mózgu u dzieci. Zmutowany histon H3.3 zaburza epigenetyczne modyfikacje potranslacyjne w pobliżu genów zaangażowanych w procesy nowotworowe i funkcjonowanie mózgu. Histon H3K27 jest metylowany przez kompleks represyjny Polycomb 2 (PRC2) w celu inaktywacji chromosomu X i wyciszania genów, a peptydy H3K27M są silnymi inhibitorami aktywności PRC2. Peptyd H3K27I również wykazuje działanie hamujące, choć w mniejszym stopniu, na PRC2. Możliwość mutacji K27I w histonie H3 została zasugerowana w glejakach dziecięcych, co może być spowodowane zablokowaniem różnicowania komórek glejowych. (Ref.: Lewis, PW., and Allis, CD (2013). Cell Cycle. 12(20): 3241-3242).
Specyficzność
To królicze przeciwciało poliklonalne wykrywa zmutowaną formę K27I histonu H3.3 i nie reaguje z dzikim typem H3.3.
Immunogen
Epitop: N-terminus
Liniowy peptyd sprzężony z KLH odpowiadający 8 aminokwasom z N-końcowego regionu ludzkiego histonu H3.3 z mutacją K27I.
Zastosowanie
Analiza Western Blotting: Rozcieńczenie 1:1000 z reprezentatywnej partii wykryło histon H3.3 K27I w komórkach HEK293 transfekowanych mutantem H3.3 K27I, ale nie typem dzikim. (Dzięki uprzejmości dr Petera Lewisa z Uniwersytetu Rockefellera).
Anti-Histone H3.3 K27I, nr kat. ABE990, jest wysoce specyficznym króliczym przeciwciałem poliklonalnym, które wykrywa histon H3.3 zmutowany K27I i zostało przetestowane do stosowania w Western Blotting.
Research Category
Epigenetics & Nuclear Function
Jakość
Evaluated by Western Blotting in wold-type HEK293 cells and HEK293 cells transfected with Histone H3.3 K27I.
Western Blotting Analysis: A 1:1,000 dilution of this antibody detected Histone H3.3 K27I in HEK293 cells transfected with Histone H3.3 K27I.
Opis wartości docelowych
Zaobserwowano ~18 kDa; obliczono 15,33 kDa. W niektórych lizatach można zaobserwować niescharakteryzowane pasma.
Postać fizyczna
Format: Oczyszczony
Oczyszczone królicze przeciwciało poliklonalne w buforze zawierającym 0,1 M Tris-Glicyna (pH 7,4), 150 mM NaCl z 0,05% azydkiem sodu.
Affinity Purified
Przechowywanie i stabilność
Przechowywać przez 1 rok w temperaturze 2-8°C od daty otrzymania.
Inne uwagi
Stężenie: Należy zapoznać się z arkuszem danych dla konkretnej partii.
Oświadczenie o zrzeczeniu się odpowiedzialności
Unless otherwise stated in our catalog or other company documentation accompanying the product(s), our products are intended for research use only and are not to be used for any other purpose, which includes but is not limited to, unauthorized commercial uses, in vitro diagnostic uses, ex vivo or in vivo therapeutic uses or any type of consumption or application to humans or animals.
Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.