17-10046
ChIPAb+ Histone H3 (CT) - przeciwciało z walidacją ChIP i zestaw primerów, królicze monoklonalne
culture supernatant, from rabbit
Synonim(y):
H3, histon H3, rodzina histonów H3, członek T, histon 3, H3, klaster histonów 3, H3
Zaloguj sięWyświetlanie cen organizacyjnych i kontraktowych
About This Item
Kod UNSPSC:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.52
Polecane produkty
pochodzenie biologiczne
rabbit
Poziom jakości
forma przeciwciała
culture supernatant
klon
monoclonal
reaktywność gatunkowa
Saccharomyces cerevisiae, rat, human, chicken, mouse, yeast
producent / nazwa handlowa
ChIPAb+
Upstate®
metody
ChIP: suitable
dot blot: suitable
immunoprecipitation (IP): suitable
western blot: suitable
izotyp
IgG
numer dostępu NCBI
numer dostępu UniProt
Warunki transportu
dry ice
Opis ogólny
Histon H3 jest jednym z pięciu głównych białek histonowych zaangażowanych w strukturę chromatyny w komórkach eukariotycznych. Posiadając główną domenę kulistą i długi N-końcowy ogon, H3 jest zaangażowany w strukturę nukleosomów o strukturze "koralików na sznurku". Białka histonowe są wysoce modyfikowane potranslacyjnie, a histon H3 jest najbardziej zmodyfikowanym z pięciu histonów. Sam termin "histon H3" jest celowo niejednoznaczny, ponieważ nie rozróżnia wariantów sekwencji ani stanu modyfikacji. Histon H3 jest ważnym białkiem w rozwijającej się dziedzinie epigenetyki, gdzie uważa się, że jego warianty sekwencji i zmienne stany modyfikacji odgrywają rolę w dynamicznej i długoterminowej regulacji genów.
Wszystkie przeciwciała ChIPAb+ są indywidualnie walidowane pod kątem wytrącania chromatyny, w każdej partii, za każdym razem. Każdy zestaw przeciwciał ChIPAb+ zawiera startery kontrolne (testowane co partię za pomocą qPCR) w celu biologicznej walidacji wyników IP w kontekście specyficznym dla locus. Protokół qPCR i sekwencje starterów są dostarczane, umożliwiając badaczom walidację protokołów ChIP przy użyciu naszego przeciwciała w kontekście chromatyny. Każdy zestaw zawiera również ujemne przeciwciało kontrolne, aby zapewnić specyficzność reakcji ChIP.
Zestaw ChIPAb+ Histone H3 (C-term) zawiera przeciwciało Histone H3 (C-term), supernatant kontroli negatywnej (królik) i startery qPCR, które amplifikują region 110 bp ludzkiej β-globiny. Histone H3 (C-term) i kontrole negatywne są dostarczane w skalowalnym rozmiarze reakcji "per ChIP" i mogą być wykorzystane do funkcjonalnej walidacji wytrącania chromatyny związanej z Histone H3.
Zestaw ChIPAb+ Histone H3 (C-term) zawiera przeciwciało Histone H3 (C-term), supernatant kontroli negatywnej (królik) i startery qPCR, które amplifikują region 110 bp ludzkiej β-globiny. Histone H3 (C-term) i kontrole negatywne są dostarczane w skalowalnym rozmiarze reakcji "per ChIP" i mogą być wykorzystane do funkcjonalnej walidacji wytrącania chromatyny związanej z Histone H3.
Specyficzność
Oczekiwana szeroka reaktywność krzyżowa ze względu na homologię sekwencji.
Rozpoznaje histon H3 w pobliżu C-końca.
Immunogen
Epitop: C-Terminus
Syntetyczny peptyd sprzężony z KLH, odpowiadający C-końcowi ludzkiego histonu H3.
Zastosowanie
Immunoprecypitacja chromatyny:
Sonikowaną chromatynę przygotowaną z komórek HeLa (1 X106 równoważników komórek na IP) poddano immunoprecypitacji chromatyny przy użyciu 4 µL supernatantu kontroli negatywnej lub 4 µL anty-histonu H3 (C-termin) i zestawu Magna ChIP® A (nr kat. 17-610).
Pomyślna immunoprecypitacja fragmentów DNA związanych z histonem H3 została zweryfikowana przez qPCR przy użyciu starterów ChIP, β-globiny oraz starterów promotora GAPDH. (Patrz rysunki). Dane przedstawiono jako procentowy wkład każdej próbki IP w stosunku do chromatyny wejściowej dla każdego amplikonu i próbki ChIP, jak wskazano.
Szczegółowe informacje dotyczące eksperymentu można znaleźć w protokole EZ-Magna ChIP A (nr kat. 17-408) lub EZ-ChIP (nr kat. 17-371).
Analiza Western Blot:
Reprezentatywne dane partii.
Ekstrakty kwasów z komórek HeLa poddanych działaniu kolcemidu rozdzielono za pomocą elektroforezy, przeniesiono na nitrocelulozę i wysondowano anty-Histone H3 (C-term) (rozcieńczenie 1:1000).
Białka wizualizowano przy użyciu koziego przeciwciała drugorzędowego przeciw królikowi sprzężonego z HRP i systemu detekcji chemiluminescencji. (Patrz rysunki).
Analiza Western Blot:
Reprezentatywne dane partii.
Białka ekstrahowane kwasem z komórek HeLa nietraktowanych (Lane 1), traktowanych kolcemidem (Lane 2). Ekstrakty jądrowe HeLa (Lane 3), komórki HeLa ekstrahowane kwasem traktowane maślanem sodu (Lane 4), nietraktowane (Lane 5) i niemodyfikowany rekombinowany histon H3 (Lane 6) zostały rozdzielone za pomocą elektroforezy, przeniesione na nitrocelulozę i sondowane poprzednią partią anty-Histone H3 (C-term) (rozcieńczenie 1:5000).
Białka wizualizowano przy użyciu koziego przeciwciała drugorzędowego przeciw królikowi sprzężonego z HRP i systemu detekcji chemiluminescencji. (Patrz rysunki).
Sonikowaną chromatynę przygotowaną z komórek HeLa (1 X106 równoważników komórek na IP) poddano immunoprecypitacji chromatyny przy użyciu 4 µL supernatantu kontroli negatywnej lub 4 µL anty-histonu H3 (C-termin) i zestawu Magna ChIP® A (nr kat. 17-610).
Pomyślna immunoprecypitacja fragmentów DNA związanych z histonem H3 została zweryfikowana przez qPCR przy użyciu starterów ChIP, β-globiny oraz starterów promotora GAPDH. (Patrz rysunki). Dane przedstawiono jako procentowy wkład każdej próbki IP w stosunku do chromatyny wejściowej dla każdego amplikonu i próbki ChIP, jak wskazano.
Szczegółowe informacje dotyczące eksperymentu można znaleźć w protokole EZ-Magna ChIP A (nr kat. 17-408) lub EZ-ChIP (nr kat. 17-371).
Analiza Western Blot:
Reprezentatywne dane partii.
Ekstrakty kwasów z komórek HeLa poddanych działaniu kolcemidu rozdzielono za pomocą elektroforezy, przeniesiono na nitrocelulozę i wysondowano anty-Histone H3 (C-term) (rozcieńczenie 1:1000).
Białka wizualizowano przy użyciu koziego przeciwciała drugorzędowego przeciw królikowi sprzężonego z HRP i systemu detekcji chemiluminescencji. (Patrz rysunki).
Analiza Western Blot:
Reprezentatywne dane partii.
Białka ekstrahowane kwasem z komórek HeLa nietraktowanych (Lane 1), traktowanych kolcemidem (Lane 2). Ekstrakty jądrowe HeLa (Lane 3), komórki HeLa ekstrahowane kwasem traktowane maślanem sodu (Lane 4), nietraktowane (Lane 5) i niemodyfikowany rekombinowany histon H3 (Lane 6) zostały rozdzielone za pomocą elektroforezy, przeniesione na nitrocelulozę i sondowane poprzednią partią anty-Histone H3 (C-term) (rozcieńczenie 1:5000).
Białka wizualizowano przy użyciu koziego przeciwciała drugorzędowego przeciw królikowi sprzężonego z HRP i systemu detekcji chemiluminescencji. (Patrz rysunki).
Zestaw ChIPAb+ Histone H3 (C-term) -ChIP Validated Antibody & Primer Set zawiera przeciwciało i specyficzne kontrolne startery PCR.
Research Category
Epigenetics & Nuclear Function
Epigenetics & Nuclear Function
Research Sub Category
Histones
Histones
Opakowanie
25 testów w zestawie. Zalecane użycie: ~4 μL przeciwciała na immunoprecypitację chromatyny (w zależności od kontekstu biologicznego).
Jakość
Chromatin Immunoprecipitation:
Sonicated chromatin prepared from HeLa cells (1 X 106 cell equivalents per IP) were subjected to chromatin immunoprecipitation using 4 µL of either Negative Control Supernatant or 4 µL of Anti-Histone H3 (C-term) and the Magna ChIP® A Kit (Cat. # 17-610). Successful immunoprecipitation of Histone H3 associated DNA fragments was verified by qPCR using ChIP Primers, β-Globin (Please see figures).
Please refer to the EZ-Magna ChIP A (Cat. # 17-408) or EZ-ChIP (Cat. # 17-371) protocol for experimental details.
Sonicated chromatin prepared from HeLa cells (1 X 106 cell equivalents per IP) were subjected to chromatin immunoprecipitation using 4 µL of either Negative Control Supernatant or 4 µL of Anti-Histone H3 (C-term) and the Magna ChIP® A Kit (Cat. # 17-610). Successful immunoprecipitation of Histone H3 associated DNA fragments was verified by qPCR using ChIP Primers, β-Globin (Please see figures).
Please refer to the EZ-Magna ChIP A (Cat. # 17-408) or EZ-ChIP (Cat. # 17-371) protocol for experimental details.
Opis wartości docelowych
~17 kda
Postać fizyczna
Anty-Histone H3 (C-term) (królicza monoklonalna IgG). Jedna fiolka zawierająca 100 µl supernatantu hodowli w 0,05% azydku sodu. Przechowywać w temperaturze -20°C.
Supernatant kontroli negatywnej (królik). Jedna fiolka zawierająca 100 µL supernatantu hodowli w 0,05% azydku sodu. Przechowywać w temperaturze -20°C.
Primery ChIP, β-Globina.
Jedna fiolka zawierająca 75 μL po 5 μM każdego primera specyficznego dla ludzkiej β-globiny. Przechowywać w temperaturze -20°C.
FOR: AGG ACA GGT ACG GCT GTC ATC
REV: TTT ATG CCC AGC CCT GGC TC
Supernatant kontroli negatywnej (królik). Jedna fiolka zawierająca 100 µL supernatantu hodowli w 0,05% azydku sodu. Przechowywać w temperaturze -20°C.
Primery ChIP, β-Globina.
Jedna fiolka zawierająca 75 μL po 5 μM każdego primera specyficznego dla ludzkiej β-globiny. Przechowywać w temperaturze -20°C.
FOR: AGG ACA GGT ACG GCT GTC ATC
REV: TTT ATG CCC AGC CCT GGC TC
Przechowywanie i stabilność
Przechowywać przez 1 rok w temperaturze -20°C od daty otrzymania. Zalecenia dotyczące postępowania: Po pierwszym rozmrożeniu, a przed zdjęciem korka, odwirować fiolkę i delikatnie wymieszać roztwór. Rozdzielić do probówek mikrowirówkowych i przechowywać w temperaturze -20°C. Unikać powtarzających się cykli zamrażania/rozmrażania, które mogą uszkodzić IgG i wpłynąć na działanie produktu.
Komentarz do analizy
Kontrola
Zawiera supernatant kontroli ujemnej (królik) i startery specyficzne dla ludzkiej β-globiny.
Zawiera supernatant kontroli ujemnej (królik) i startery specyficzne dla ludzkiej β-globiny.
Informacje prawne
MAGNA CHIP is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Oświadczenie o zrzeczeniu się odpowiedzialności
Unless otherwise stated in our catalog or other company documentation accompanying the product(s), our products are intended for research use only and are not to be used for any other purpose, which includes but is not limited to, unauthorized commercial uses, in vitro diagnostic uses, ex vivo or in vivo therapeutic uses or any type of consumption or application to humans or animals.
Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.
Kod klasy składowania
10 - Combustible liquids
Certyfikaty analizy (CoA)
Poszukaj Certyfikaty analizy (CoA), wpisując numer partii/serii produktów. Numery serii i partii można znaleźć na etykiecie produktu po słowach „seria” lub „partia”.
Masz już ten produkt?
Dokumenty związane z niedawno zakupionymi produktami zostały zamieszczone w Bibliotece dokumentów.
Stylianos Poulios et al.
Cells, 10(4) (2021-05-01)
Histone acetylation is directly related to gene expression. In yeast, the acetyltransferase general control nonderepressible-5 (GCN5) targets histone H3 and associates with transcriptional co-activators alteration/deficiency in activation-2 (ADA2) and alteration/deficiency in activation-3 (ADA3) in complexes like SAGA. Arabidopsis thaliana has
Judy A Brusslan et al.
PloS one, 7(3), e33151-e33151 (2012-03-20)
Leaf senescence is the orderly dismantling of older tissue that allows recycling of nutrients to developing portions of the plant and is accompanied by major changes in gene expression. Histone modifications correlate to levels of gene expression, and this study
Carol D Curtis et al.
Molecular and cellular biology, 32(7), 1312-1320 (2012-02-01)
Canonical Wnt signaling plays an important role in embryonic and postnatal blood vessel development. We previously reported that the chromatin-remodeling enzyme BRG1 promotes vascular Wnt signaling. Vascular deletion of Brg1 results in aberrant yolk sac blood vessel morphology, which is
Reema B Davis et al.
Development (Cambridge, England), 140(6), 1272-1281 (2013-02-15)
Arteries and veins acquire distinct molecular identities prior to the onset of embryonic blood circulation, and their specification is crucial for vascular development. The transcription factor COUP-TFII currently functions at the top of a signaling pathway governing venous fate. It
Xavier Brenachot et al.
Molecular metabolism, 3(6), 619-629 (2014-08-28)
Overfeeding causes rapid synaptic remodeling in hypothalamus feeding circuits. Polysialylation of cell surface molecules is a key step in this neuronal rewiring and allows normalization of food intake. Here we examined the role of hypothalamic polysialylation in the long-term maintenance
Nasz zespół naukowców ma doświadczenie we wszystkich obszarach badań, w tym w naukach przyrodniczych, materiałoznawstwie, syntezie chemicznej, chromatografii, analityce i wielu innych dziedzinach.
Skontaktuj się z zespołem ds. pomocy technicznej