17-10032
ChIPAb+ Trimethyl-Histone H3 (Lys36) - przeciwciało z walidacją ChIP i zestaw primerów, królicze monoklonalne
from rabbit
Synonim(y):
H3K36me3, histon H3 (tri metyl K36), rodzina histonów H3, członek T, histon 3, H3, klaster histonów 3, H3
Zaloguj sięWyświetlanie cen organizacyjnych i kontraktowych
About This Item
Kod UNSPSC:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.32
Polecane produkty
pochodzenie biologiczne
rabbit
Poziom jakości
forma przeciwciała
purified immunoglobulin
klon
monoclonal
reaktywność gatunkowa
human, chicken
producent / nazwa handlowa
ChIPAb+
Upstate®
metody
ChIP: suitable
cell based assay: suitable
dot blot: suitable
immunoprecipitation (IP): suitable
western blot: suitable
izotyp
IgG
numer dostępu NCBI
numer dostępu UniProt
Warunki transportu
dry ice
Opis ogólny
Histony są wysoce konserwatywnymi białkami, które służą jako rusztowanie strukturalne dla organizacji jądrowego DNA w chromatynę. Cztery podstawowe histony, H2A, H2B, H3 i H4, łączą się w oktamer (po 2 cząsteczki każdego z nich). Następnie 146 par zasad DNA owija się wokół oktameru, tworząc nukleosom, podstawową podjednostkę chromatyny. Histony są modyfikowane potranslacyjnie przez działanie enzymów zarówno w jądrze, jak i cytoplazmie. Modyfikacje te regulują transkrypcję, naprawę, rekombinację i replikację DNA. Najczęściej badanymi modyfikacjami są acetylacja, fosforylacja, metylacja i ubikwitynacja. Modyfikacje te mogą zmieniać lokalną architekturę chromatyny lub rekrutować czynniki trans-działające, które rozpoznają określone modyfikacje histonów (hipoteza "kodu histonowego"). Modyfikacje występują głównie na N-końcowych i C-końcowych ogonach, które rozciągają się poza cząsteczkę rdzenia nukleosomu. Metylacja histonu H3 na Lys36 (H3K36me2/3) jest ściśle związana z aktywnie transkrybowanymi genami, a modyfikacja ta występuje głównie w regionie kodującym, co sugeruje, że metylacja H3K36 jest niezbędna do wydajnej elongacji i procesywności polimerazy RNA II.
Wszystkie przeciwciała ChIPAb+ są indywidualnie walidowane pod kątem wytrącania chromatyny, w każdej partii, za każdym razem. Każdy zestaw przeciwciał ChIPAb+ zawiera startery kontrolne (testowane co partię za pomocą qPCR) w celu biologicznej walidacji wyników IP w kontekście specyficznym dla locus. Protokół qPCR i sekwencje starterów są dostarczane, umożliwiając badaczom walidację protokołów ChIP przy użyciu naszego przeciwciała w kontekście chromatyny. Każdy zestaw zawiera również ujemne przeciwciało kontrolne, aby zapewnić specyficzność reakcji ChIP.
Zestaw ChIPAb+ Trimethyl-Histone H3 (Lys36) zawiera przeciwciało Trimethyl-Histone H3 (Lys36), przeciwciało kontroli ujemnej (normalne królicze IgG) oraz startery qPCR, które amplifikują region 147 bp ludzkiego intronu BDNF. Przeciwciała Trimethyl-Histone H3 (Lys36) i przeciwciała kontroli ujemnej są dostarczane w skalowalnym rozmiarze reakcji "per ChIP" i mogą być stosowane do funkcjonalnej walidacji wytrącania chromatyny związanej z Trimethyl-Histone H3 (Lys36).
Zestaw ChIPAb+ Trimethyl-Histone H3 (Lys36) zawiera przeciwciało Trimethyl-Histone H3 (Lys36), przeciwciało kontroli ujemnej (normalne królicze IgG) oraz startery qPCR, które amplifikują region 147 bp ludzkiego intronu BDNF. Przeciwciała Trimethyl-Histone H3 (Lys36) i przeciwciała kontroli ujemnej są dostarczane w skalowalnym rozmiarze reakcji "per ChIP" i mogą być stosowane do funkcjonalnej walidacji wytrącania chromatyny związanej z Trimethyl-Histone H3 (Lys36).
Specyficzność
Oczekuje się szerokiej reaktywności z innymi gatunkami.
Rozpoznaje trimetylo-histonę H3 (Lys36) o masie cząsteczkowej ~17 kDa.
Immunogen
Epitop: Trimetylowana Lys36
Syntetyczny peptyd sprzężony z KLH zawierający sekwencję ....GVme3KKP..., w której me3K odpowiada ludzkiemu trimetylo-histonowi H3 (Lys36).
Zastosowanie
Immunoprecypitacja chromatyny:
Sonikowaną chromatynę przygotowaną z komórek HeLa (1 X106 równoważników komórek na IP) poddano immunoprecypitacji chromatyny przy użyciu 2 µg normalnej króliczej IgG lub 2 µl anty-trimetylo-histonu H3 (Lys36) i zestawu Magna ChIP A (nr kat. 17-610). Pomyślną immunoprecypitację fragmentów DNA związanych z trimetylo-histonem H3 (Lys36) zweryfikowano za pomocą qPCR przy użyciu starterów ChIP, BDNF Intron jako locus pozytywnego i starterów promotora GAPDH jako locus negatywnego (patrz rysunki). Dane przedstawiono jako procentowy wkład każdej próbki IP w stosunku do chromatyny wejściowej dla każdego amplikonu i próbki ChIP, jak wskazano.
Szczegółowe informacje dotyczące eksperymentu można znaleźć w protokole EZ-Magna ChIP A (nr kat. 17-408) lub EZ-ChIP (nr kat. 17-371).
Analiza Western Blot i inhibicja peptydowa:
Reprezentatywne dane partii.
Rekombinowany histon H3 (nr kat. 14-411, pas 1) i histony rdzenia kurczaka (nr kat. 13-107, pas 2) zostały rozdzielone za pomocą elektroforezy, przeniesione na nitrocelulozę i wysondowane anty-trimetylo-histonem H3 (Lys36) (rozcieńczenie 1:1000) lub anty-trimetylo-histonem H3 (Lys36) wstępnie adsorbowanym 1mM peptydami histonu H3 zawierającymi następujące modyfikacje:
Lane 3: monometylo-lizyna 36
Pas 4: dimetylo-lizyna 36
Pas 5: trimetylo-lizyna 36
Pas 6: niezmodyfikowany
Białka wizualizowano przy użyciu koziego przeciwciała drugorzędowego przeciw królikowi sprzężonego z HRP i systemu detekcji chemiluminescencji. (Patrz rysunki).
Analiza kropkowa peptydów:
Reprezentatywne dane partii.
Wykonano serię rozcieńczeń peptydów Histone H3 zawierających następujące modyfikacje:
Kolumna 1: niezmodyfikowany
Kolumna 2: monometylo-lizyna 36
Kolumna 3: dimetylo-lizyna 36
Kolumna 4: trimetylo-lizyna 36
2 μL każdego rozcieńczenia naniesiono na membranę PVDF i sondowano anty-trimetylo-Histonem H3 (Lys36), (rozcieńczenie 1:1000).
Peptydy były wizualizowane przy użyciu koziego anty-królika drugorzędowego sprzężonego z HRP i systemu detekcji chemiluminescencji (patrz rysunki).
Sonikowaną chromatynę przygotowaną z komórek HeLa (1 X106 równoważników komórek na IP) poddano immunoprecypitacji chromatyny przy użyciu 2 µg normalnej króliczej IgG lub 2 µl anty-trimetylo-histonu H3 (Lys36) i zestawu Magna ChIP A (nr kat. 17-610). Pomyślną immunoprecypitację fragmentów DNA związanych z trimetylo-histonem H3 (Lys36) zweryfikowano za pomocą qPCR przy użyciu starterów ChIP, BDNF Intron jako locus pozytywnego i starterów promotora GAPDH jako locus negatywnego (patrz rysunki). Dane przedstawiono jako procentowy wkład każdej próbki IP w stosunku do chromatyny wejściowej dla każdego amplikonu i próbki ChIP, jak wskazano.
Szczegółowe informacje dotyczące eksperymentu można znaleźć w protokole EZ-Magna ChIP A (nr kat. 17-408) lub EZ-ChIP (nr kat. 17-371).
Analiza Western Blot i inhibicja peptydowa:
Reprezentatywne dane partii.
Rekombinowany histon H3 (nr kat. 14-411, pas 1) i histony rdzenia kurczaka (nr kat. 13-107, pas 2) zostały rozdzielone za pomocą elektroforezy, przeniesione na nitrocelulozę i wysondowane anty-trimetylo-histonem H3 (Lys36) (rozcieńczenie 1:1000) lub anty-trimetylo-histonem H3 (Lys36) wstępnie adsorbowanym 1mM peptydami histonu H3 zawierającymi następujące modyfikacje:
Lane 3: monometylo-lizyna 36
Pas 4: dimetylo-lizyna 36
Pas 5: trimetylo-lizyna 36
Pas 6: niezmodyfikowany
Białka wizualizowano przy użyciu koziego przeciwciała drugorzędowego przeciw królikowi sprzężonego z HRP i systemu detekcji chemiluminescencji. (Patrz rysunki).
Analiza kropkowa peptydów:
Reprezentatywne dane partii.
Wykonano serię rozcieńczeń peptydów Histone H3 zawierających następujące modyfikacje:
Kolumna 1: niezmodyfikowany
Kolumna 2: monometylo-lizyna 36
Kolumna 3: dimetylo-lizyna 36
Kolumna 4: trimetylo-lizyna 36
2 μL każdego rozcieńczenia naniesiono na membranę PVDF i sondowano anty-trimetylo-Histonem H3 (Lys36), (rozcieńczenie 1:1000).
Peptydy były wizualizowane przy użyciu koziego anty-królika drugorzędowego sprzężonego z HRP i systemu detekcji chemiluminescencji (patrz rysunki).
Zestaw ChIPAb+ Trimethyl-Histone H3 (Lys36) -ChIP Validated Antibody & Primer Set zawiera przeciwciało i specyficzne kontrolne startery PCR.
Research Category
Epigenetics & Nuclear Function
Epigenetics & Nuclear Function
Research Sub Category
Histones
Histones
Opakowanie
25 testów w zestawie. Zalecane użycie: ~2 μL przeciwciała na immunoprecypitację chromatyny (w zależności od kontekstu biologicznego).
Jakość
Chromatin Immunoprecipitation:
Sonicated chromatin prepared from HeLa cells (1 X 106 cell equivalents per IP) were subjected to chromatin immuno-precipitation using 2 µg of either Normal Rabbit IgG or 2 µL Anti-trimethyl-Histone H3 (Lys36) and the Magna ChIP® A Kit (Cat. # 17-610).
Successful immunoprecipitation of trimethyl-Histone H3 (Lys36) associated DNA fragments was verified by qPCR using ChIP Primers, BDNF Intron (Please see figures).
Please refer to the EZ-Magna ChIP A (Cat. # 17-408) or EZ-ChIP (Cat. # 17-371) protocol for experimental details.
Sonicated chromatin prepared from HeLa cells (1 X 106 cell equivalents per IP) were subjected to chromatin immuno-precipitation using 2 µg of either Normal Rabbit IgG or 2 µL Anti-trimethyl-Histone H3 (Lys36) and the Magna ChIP® A Kit (Cat. # 17-610).
Successful immunoprecipitation of trimethyl-Histone H3 (Lys36) associated DNA fragments was verified by qPCR using ChIP Primers, BDNF Intron (Please see figures).
Please refer to the EZ-Magna ChIP A (Cat. # 17-408) or EZ-ChIP (Cat. # 17-371) protocol for experimental details.
Opis wartości docelowych
~17 kDa
Postać fizyczna
Anty-Trimetylo-Histon H3 (Lys36) (królicza monoklonalna IgG). Jedna fiolka zawierająca 50 μL oczyszczonego białka A IgG w roztworze zawierającym 0,07 M Tris-glicyny, 0,105 M NaCl, pH 7,4, 0,035% azydku sodu i 30% glicerolu. Przechowywać w temperaturze -20°C.
Normalne królicze IgG. Jedna fiolka zawierająca 125 µg króliczych IgG w 125 µl buforu do przechowywania zawierającego 0,05% azydku sodu. Przechowywać w temperaturze -20°C.
Primery ChIP, BDNF Intron. Jedna fiolka zawierająca 75 μL po 5 μM każdego primera specyficznego dla ludzkiego intronu BDNF. Przechowywać w temperaturze -20°C.
FOR: ACCCCAACCTCTAACAGCATTA
REV: TGTCTCTCAGCAGTCTTGCATT
Normalne królicze IgG. Jedna fiolka zawierająca 125 µg króliczych IgG w 125 µl buforu do przechowywania zawierającego 0,05% azydku sodu. Przechowywać w temperaturze -20°C.
Primery ChIP, BDNF Intron. Jedna fiolka zawierająca 75 μL po 5 μM każdego primera specyficznego dla ludzkiego intronu BDNF. Przechowywać w temperaturze -20°C.
FOR: ACCCCAACCTCTAACAGCATTA
REV: TGTCTCTCAGCAGTCTTGCATT
Format: Oczyszczony
Protein A purified
Przechowywanie i stabilność
Przechowywać przez 1 rok w temperaturze -20°C od daty otrzymania. Zalecenia dotyczące postępowania: Po pierwszym rozmrożeniu, a przed zdjęciem korka, odwirować fiolkę i delikatnie wymieszać roztwór. Rozdzielić do probówek mikrowirówkowych i przechowywać w temperaturze -20°C. Unikać powtarzających się cykli zamrażania/rozmrażania, które mogą uszkodzić IgG i wpłynąć na działanie produktu. Uwaga: Zmienność temperatur w zamrażarce poniżej -20°C może powodować zamarzanie roztworów zawierających glicerol podczas przechowywania.
Komentarz do analizy
Kontrola
Zawiera królicze przeciwciało IgG kontroli ujemnej i startery specyficzne dla ludzkiego BDNF Intron.
Zawiera królicze przeciwciało IgG kontroli ujemnej i startery specyficzne dla ludzkiego BDNF Intron.
Informacje prawne
MAGNA CHIP is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Oświadczenie o zrzeczeniu się odpowiedzialności
Unless otherwise stated in our catalog or other company documentation accompanying the product(s), our products are intended for research use only and are not to be used for any other purpose, which includes but is not limited to, unauthorized commercial uses, in vitro diagnostic uses, ex vivo or in vivo therapeutic uses or any type of consumption or application to humans or animals.
Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.
Kod klasy składowania
10 - Combustible liquids
Certyfikaty analizy (CoA)
Poszukaj Certyfikaty analizy (CoA), wpisując numer partii/serii produktów. Numery serii i partii można znaleźć na etykiecie produktu po słowach „seria” lub „partia”.
Masz już ten produkt?
Dokumenty związane z niedawno zakupionymi produktami zostały zamieszczone w Bibliotece dokumentów.
Jing Yang et al.
Evidence-based complementary and alternative medicine : eCAM, 2019, 6479136-6479136 (2019-07-06)
The incidence of cardiac dysfunction after myocardial infarction (MI) continues to increase despite advances in treatment. Excessive myocardial fibrosis plays a vital role in the development of adverse cardiac remodeling and deterioration of cardiac function. Understanding the molecular and cellular
The Phaseolus vulgaris PvTRX1h gene regulates plant hormone biosynthesis in embryogenic callus from common bean.
Barraza, A; Cabrera-Ponce, JL; Gamboa-Becerra, R; Luna-Martinez, F; Winkler, R; Alvarez-Venegas, R
Frontiers in Plant Science null
Anurag Kulkarni et al.
Cell chemical biology, 24(11), 1377-1387 (2017-10-03)
The human retrovirus HTLV-1 causes a hematological malignancy or neuroinflammatory disease in ∼10% of infected individuals. HTLV-1 primarily infects CD4+ T lymphocytes and persists as a provirus integrated in their genome. HTLV-1 appears transcriptionally latent in freshly isolated cells; however
Keren Martínez-Aguilar et al.
Frontiers in plant science, 7, 653-653 (2016-06-01)
To survive in adverse conditions, plants have evolved complex mechanisms that "prime" their defense system to respond and adapt to stresses. Their competence to respond to such stresses fundamentally depends on its capacity to modulate the transcriptome rapidly and specifically.
Diane Frankel et al.
iScience, 25(2), 103757-103757 (2022-02-05)
Hutchinson-Gilford progeria syndrome (HGPS) is a rare genetic disorder, in which an abnormal and toxic protein called progerin, accumulates in cell nuclei, leading to major cellular defects. Among them, chromatin remodeling drives gene expression changes, including miRNA dysregulation. In our
Nasz zespół naukowców ma doświadczenie we wszystkich obszarach badań, w tym w naukach przyrodniczych, materiałoznawstwie, syntezie chemicznej, chromatografii, analityce i wielu innych dziedzinach.
Skontaktuj się z zespołem ds. pomocy technicznej