Przejdź do zawartości
Merck
Wszystkie zdjęcia(3)

Kluczowe dokumenty

03-249

Sigma-Aldrich

Przeciwciało RIPAb+ Ago1

clone 4G7-E12, from mouse

Synonim(y):

hAgo1, Argonaute1, eIF-2C 1, eIF2C 1, Q99, GERP95, DKFZp686M13167

Zaloguj sięWyświetlanie cen organizacyjnych i kontraktowych


About This Item

Kod UNSPSC:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.32

pochodzenie biologiczne

mouse

Poziom jakości

klon

4G7-E12, monoclonal

reaktywność gatunkowa

human

producent / nazwa handlowa

RIPAb+
Upstate®

metody

RIP: suitable
western blot: suitable

izotyp

IgG2aκ

numer dostępu NCBI

numer dostępu UniProt

Warunki transportu

dry ice

Opis ogólny

Przeciwciała RIPAb+ są oceniane przy użyciu testu immunoprecypitacji białek wiążących RNA (RIP). Każdy zestaw przeciwciał RIPAb+ zawiera ujemne przeciwciało kontrolne w celu zapewnienia swoistości reakcji RIP i jest weryfikowany pod kątem koimmunoprecypitacji RNA związanego specyficznie z immunoprecypitowanym białkiem wiążącym RNA będącym przedmiotem zainteresowania. W stosownych przypadkach zestaw RIPAb+ zawiera również startery kontrolne do ilościowego RT-PCR (startery RIP) w celu biologicznej walidacji wyników IP poprzez udaną ko-precypitację określonych docelowych RNA, takich jak informacyjny RNA. Protokół qPCR i sekwencje starterów są dostarczane, umożliwiając badaczom walidację protokołów RIP podczas stosowania przeciwciała w ich kontekście eksperymentalnym. Jeśli nie dostarczono testu specyficznego dla celu, zestaw RIPAb+ jest walidowany przy użyciu zautomatyzowanego testu opartego na mikroprzepływach poprzez wzbogacenie wykrywalnego RNA w stosunku do kontrolnej immunoprecypitacji.
Ago1 (eukariotyczny czynnik inicjacji translacji 2C 1) jest członkiem rodziny argonautów. Zawiera domenę PAZ i PIWI i jest wymagany do zatrzymania G1 i kojarzenia w odpowiedzi na głód azotowy. Może również przyczyniać się do kontroli cyklu komórkowego poprzez regulację cytokinezy. Ago1 jest również potrzebny do produkcji dojrzałego miRNA, który wpływa na rozszczepianie RNA kierowane przez miRNA, a zatem jest ważny dla tworzenia heterochromatyny i dokładnej segregacji chromosomów.

Specyficzność

Niezależne laboratorium wykazało, że przeciwciało to nie reaguje krzyżowo z Ago2, Ago3 lub Ago4 (Azuma-Mukai A et al. (2008) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 105: 7964-7969).

Immunogen

Rekombinowane białko znakowane GST odpowiadające ludzkiemu Ago1

Zastosowanie

Immunoprecypitacja białka wiążącego RNA (mikroRNA):
Reprezentatywne dane partii.
Lizat RIP przygotowany z komórek 293 (2 X 107 równoważników komórek na IP) poddano immunoprecypitacji przy użyciu 5 µg normalnej mysiej IgG (nr kat. CS200621) lub przeciwciała Anti-Ago1 (nr kat. CS207365) i zestawu do immunoprecypitacji białka wiążącego RNA Magna RIP (nr kat. 17-700).
Pomyślna immunoprecypitacja mikroRNA związanego z Ago 1 została zweryfikowana za pomocą testu TaqMan microRNA, hsa-miR-15a. (Rysunek 2). Szczegóły eksperymentu można znaleźć w protokole Magna RIP (nr kat. 17-700) lub EZ-Magna RIP (nr kat. 17-701).
Analiza Western Blot:
Reprezentatywne dane partii.
Lizat komórek HeLa sondowano anty-Ago 1, klon 4G7-E12 (0,1 µg/ml). Białka uwidoczniono przy użyciu przeciwciała wtórnego Goat Anti-Mouse IgG sprzężonego z HRP i systemu detekcji chemiluminescencji.
Strzałka wskazuje Ago 1 (~97 kDa).
Kategoria badawcza
Epigenetyka i funkcje jądrowe
Podkategoria badawcza
Białko wiążące RNA (RBP)
Zestaw RIPAb+ Ago1 -RIP Validated Antibody & Primer Set zawiera przeciwciało i specyficzne kontrolne startery PCR.

Opakowanie

10 testów w zestawie. Zalecane użycie: ~5 µg przeciwciała na RIP (w zależności od kontekstu biologicznego).

Jakość

RNA Binding Protein Immunoprecipitation:
Representative lot data
RIP Lysate prepared from 293 cells (2 X 10E7 cell equivalents per IP) were subjected to immunoprecipitation using 5 µg of either a normal mouse IgG, or 5 µg Anti-Ago1 antibody and the Magna RIP® RNA-Binding Protein Immunoprecipitation Kit (Cat. # 17-700).
Successful immunoprecipitation of Argonaute 1-associated RNA was verified by qPCR using RIP Primers IGF2, (Figure 1).
Please refer to the Magna RIP (Cat. # 17-700) or EZ-Magna RIP (Cat. # 17-701) protocol for experimental details.

Opis wartości docelowych

~97 kDa

Postać fizyczna

Anty-Ago1 (mysi monoklonalny). Jedna fiolka zawierająca 50 µg oczyszczonego białka G monoklonalnego w buforze zawierającym 0,1 M Tris-glicyny (pH 7,4), 150 mM NaCl, 0,05% azydku sodu przed dodaniem glicerolu do 30%. Przechowywać w temperaturze -20°C.
Stężenie: 0,7 mg/ml
Normalne mysie IgG. Jedna fiolka zawierająca 125 µg oczyszczonej mysiej IgG w 125 µl buforu do przechowywania zawierającego 0,1% azydku sodu. Przechowywać w temperaturze -20°C.
RIP Primer IGF2. Jedna fiolka zawierająca 75 μL po 5 μM każdego primera specyficznego dla ludzkiego mRNA IGF2. Przechowywać w temperaturze -20°C.
FOR: GCG GCT TCT ACT TCA GCA G
REV: CAG GTG TCA TAT TGG AAG AAC
Format: Oczyszczony
Oczyszczone białko G

Przechowywanie i stabilność

Przechowywać przez 1 rok w temperaturze -20°C od daty otrzymania. Zalecenia dotyczące postępowania: Po pierwszym rozmrożeniu, a przed zdjęciem korka, odwirować fiolkę i delikatnie wymieszać roztwór. Rozdzielić do probówek mikrowirówkowych i przechowywać w temperaturze -20°C. Unikać powtarzających się cykli zamrażania/rozmrażania, które mogą uszkodzić IgG i wpłynąć na działanie produktu.
Uwaga: Zmienność temperatur w zamrażarce poniżej -20°C może powodować zamarzanie roztworów zawierających glicerol podczas przechowywania.

Komentarz do analizy

Kontrola
Zawiera normalną mysią IgG i startery specyficzne dla ludzkiego IGF2 mRNA.

Inne uwagi

Stężenie: Stężenie specyficzne dla danej partii można znaleźć w certyfikacie analizy.

Informacje prawne

MAGNA RIP is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Oświadczenie o zrzeczeniu się odpowiedzialności

O ile nie określono inaczej w naszym katalogu lub innej dokumentacji firmy dołączonej do produktu(-ów), nasze produkty są przeznaczone wyłącznie do użytku badawczego i nie mogą być wykorzystywane do żadnych innych celów, w tym między innymi do nieautoryzowanych zastosowań komercyjnych, zastosowań diagnostycznych in vitro, zastosowań terapeutycznych ex vivo lub in vivo lub jakiegokolwiek rodzaju konsumpcji lub zastosowania u ludzi lub zwierząt.
Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Kod klasy składowania

10-13 - German Storage Class 10 to 13


Certyfikaty analizy (CoA)

Poszukaj Certyfikaty analizy (CoA), wpisując numer partii/serii produktów. Numery serii i partii można znaleźć na etykiecie produktu po słowach „seria” lub „partia”.

Masz już ten produkt?

Dokumenty związane z niedawno zakupionymi produktami zostały zamieszczone w Bibliotece dokumentów.

Odwiedź Bibliotekę dokumentów

Nasz zespół naukowców ma doświadczenie we wszystkich obszarach badań, w tym w naukach przyrodniczych, materiałoznawstwie, syntezie chemicznej, chromatografii, analityce i wielu innych dziedzinach.

Skontaktuj się z zespołem ds. pomocy technicznej