Przejdź do zawartości
Merck
Wszystkie zdjęcia(5)

Kluczowe dokumenty

03-102

Sigma-Aldrich

RIPAb+ HuR - przeciwciało i zestaw primerów zweryfikowane pod kątem RIP

from rabbit

Synonim(y):

Białko podobne do ELAV 1, antygen Hu R

Zaloguj sięWyświetlanie cen organizacyjnych i kontraktowych


About This Item

Kod UNSPSC:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.32

pochodzenie biologiczne

rabbit

Poziom jakości

klon

polyclonal

reaktywność gatunkowa

mouse, human, rat

producent / nazwa handlowa

RIPAb+
Upstate®

metody

RIP: suitable
immunocytochemistry: suitable
immunohistochemistry: suitable
immunoprecipitation (IP): suitable
western blot: suitable

numer dostępu NCBI

numer dostępu UniProt

Warunki transportu

dry ice

informacje o genach

human ... ELAVL1(1994)

Opis ogólny

Przeciwciała RIPAb+ są oceniane przy użyciu testu immunoprecypitacji białek wiążących RNA (RIP). Każdy zestaw przeciwciał RIPAb+ zawiera startery kontroli ilościowej RT-PCR (startery RIP) w celu biologicznej walidacji wyników IP poprzez udaną koprecypitację określonego celu RNA (jeśli taki określony cel jest znany). Protokół qPCR i sekwencje starterów są dostarczane, umożliwiając badaczom walidację protokołów RIP podczas stosowania przeciwciała w ich kontekście eksperymentalnym. Każdy zestaw zawiera również ujemne przeciwciało kontrolne w celu zapewnienia specyficzności reakcji RIP.
Zestaw RIPAb+ HuR zawiera przeciwciało HuR, ujemne przeciwciało kontrolne (oczyszczone królicze IgG) oraz pozytywne startery qPCR, które amplifikują fragment 100 bp ludzkiej beta-aktyny (ACTB) cDNA. Przeciwciała HuR i przeciwciała kontroli ujemnej są dostarczane w skalowalnym rozmiarze reakcji "na RIP" i mogą być stosowane do funkcjonalnej walidacji RNA związanego z HuR.

Immunogen

Epitop: a.a. 1-13 HuR

Zastosowanie

Immunoprecypitacja z lizatu RIP:
Lizat RIP z komórek MCF7 (2 X106 równoważników komórek na IP) poddano immunoprecypitacji przy użyciu 0,5 μg normalnej króliczej IgG lub przeciwciała anty-HuR. Wytrącone białka rozdzielono za pomocą elektroforezy, przeniesiono na nitrocelulozę i sondowano anty-HuR (1,0 μg/ml).
Białka wizualizowano przy użyciu zestawu One-Step IP-Western (GenScript nr kat. L00231) (patrz rysunki).

Analiza Western Blot:
Lizat 3T3/A31 rozdzielono za pomocą elektroforezy, przeniesiono na membrany PVDF i sondowano za pomocą HuR, hu (rozcieńczenie 1:500). Białka były wizualizowane przy użyciu anty-Rabbit Osła sprzężonego z HRP i wizualizowane przy użyciu systemu detekcji chemiluminescencji. (Patrz rysunki).

Analiza immunoprecypitacji:
10 ug tego przeciwciała immunoprecypitowało HuR z 500 ug lizatu 3T3/A31 RIPA (patrz rysunki).

Analiza immunocytochemiczna:
Konfokalna analiza IF komórek HeLa, NIH/3T3 z użyciem anty-HuR (czerwony). Filamenty aktyny zostały oznaczone za pomocą AlexaFluor 488 - Phalloidin (zielony). Jądro jest wybarwione DAPI (niebieski) (patrz rysunki).
Zestaw RIPAb+ HuR -RIP Validated Antibody & Primer Set zawiera przeciwciało i specyficzne kontrolne startery PCR.

Jakość

RNA binding protein Immunoprecipitation:
RIP Lysate prepared from HeLa cells (2 x 107 cell equivalents per IP) were subjected to immunoprecipitation using 5 µg of either a normal Rabbit IgG or Anti-HuR antibody and the Magna RIP Kit (Cat. # 17-700).
Successful immunoprecipitation of HuR-associated RNA was verified by qPCR using RIP Primers, ACTB (Please see figures).
Please refer to the Magna RIP® (Cat. # 17-700) or EZ-Magna RIP (Cat. # 17-701) protocol for experimental details.

Opis wartości docelowych

35 kDa

Postać fizyczna

Anty-HuR (króliczy poliklonalny). Jedna fiolka zawierająca 50 μg oczyszczonego poliklonalnego królika w 100 μl buforu zawierającego PBS w 0,05% azydku sodu z 50% glicerolem. Ciecz w temperaturze -20°C.

Normalna królicza IgG. Jedna fiolka zawierająca 125 μg oczyszczonej króliczej IgG w 125 μL buforu do przechowywania zawierającego 0,1% azydku sodu. Przechowywać w temperaturze -20°C.

Primery RIP, ACTB. Jedna fiolka zawierająca 75 μL po 5 μM każdego startera specyficznego dla ludzkiej beta-aktyny (ACTB). Przechowywać w temperaturze -20°C.
FOR: TTG TTA CAG GAA GTC CCT TGC C
REV: ATG CTA TCA CCT CCC CTG TGT G
Format: Oczyszczony

Komentarz do analizy

Kontrola
Zawierała królicze przeciwciało IgG kontroli ujemnej i startery kontrolne specyficzne dla ludzkiej aktyny beta (ATCB).

Informacje prawne

MAGNA RIP is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Kod klasy składowania

12 - Non Combustible Liquids

Temperatura zapłonu (°F)

Not applicable

Temperatura zapłonu (°C)

Not applicable


Certyfikaty analizy (CoA)

Poszukaj Certyfikaty analizy (CoA), wpisując numer partii/serii produktów. Numery serii i partii można znaleźć na etykiecie produktu po słowach „seria” lub „partia”.

Masz już ten produkt?

Dokumenty związane z niedawno zakupionymi produktami zostały zamieszczone w Bibliotece dokumentów.

Odwiedź Bibliotekę dokumentów

Heat resistance of Bacillus spores when adhered to stainless steel and its relationship to spore hydrophobicity.
P Simmonds,B L Mossel,T Intaraphan,H C Deeth
Journal of Food Protection null
Jian Pu et al.
Frontiers in oncology, 11, 754835-754835 (2021-11-05)
Hepatocellular carcinoma (HCC) is one of the most aggressive malignancies. Increasing evidence revealed that long noncoding RNAs (lncRNAs) were frequently involved in various malignancies. Here, we explored the clinical significances, roles, and mechanisms of lncRNA ADORA2A antisense RNA 1 (ADORA2A-AS1)
Xiangbo Ruan et al.
Nature communications, 11(1), 45-45 (2020-01-04)
Unlike protein-coding genes, the majority of human long non-coding RNAs (lncRNAs) are considered non-conserved. Although lncRNAs have been shown to function in diverse pathophysiological processes in mice, it remains largely unknown whether human lncRNAs have such in vivo functions. Here
Fuzhen Qi et al.
Journal of hematology & oncology, 10(1), 48-48 (2017-02-18)
Long noncoding RNAs (lncRNAs) have emerged as important regulators of tumorigenesis and cancer progression. Recently, the lncRNA AGAP2-AS1 was identified as an oncogenic lncRNA in human non-small cell lung cancer (NSCLC) and its elevated expression was linked to NSCLC development
Daphna Nachmani et al.
Nature communications, 5, 4186-4186 (2014-06-14)
The recognition of stress-induced ligands by the activating receptor NKG2D expressed on cytotoxic lymphocytes is crucial for the prevention and containment of various diseases and is also one of the best-studied examples of how danger is sensed by the immune

Nasz zespół naukowców ma doświadczenie we wszystkich obszarach badań, w tym w naukach przyrodniczych, materiałoznawstwie, syntezie chemicznej, chromatografii, analityce i wielu innych dziedzinach.

Skontaktuj się z zespołem ds. pomocy technicznej