MILLIPLEX^®マルチプレックスキットを用いたxMAP^®Sheath Fluid PLUSとSheath Fluidの比較

• 新しいxMAP^®Sheath Fluid PLUSの組成
• Sheath FluidとSheath Fluid PLUSの比較
• 比較結果
• まとめ
• 関連製品

Luminex^®社は、xMAP^®Sheath Fluid PLUSおよびDrive Fluid PLUSの新製品を開発しました。新しい組成では、従来の1種類のProClin™に替えて、アジ化ナトリウム、安息香酸ナトリウム、ジアゾリジニル尿素といった3種類の防腐剤が含まれています。PLUS製品の新しい組成により、安定性を高め、ProClin™の分解に関連した防腐効果のばらつきと変色を低減します。さらに、システムの流路を保護し、ProClin™防腐剤に対する薬剤耐性菌の発生を抑制します。MILLIPLEX^®マルチプレックスアッセイにおける、従来のxMAP^®Sheath Fluidと新しいxMAP ^®Sheath Fluid PLUSの性能比較について説明します。  

新しいxMAP^®Sheath Fluid PLUSの組成

従来のSheath Fluidの組成には、1種類の防腐剤、すなわちProClin™が含まれていました。ProClin™防腐剤は、薬剤耐性菌が発生しやすく、長時間熱にさらされると分解しやすいです。新しいxMAP^®Sheath Fluid PLUSとDrive Fluid PLUSには、アジ化ナトリウム、安息香酸ナトリウム、およびジアゾリジニル尿素の3種類の防腐剤が含まれ、静菌作用、静真菌作用、および殺菌作用を示します。この組み合わせは、ProClin™防腐剤単独よりも有効性が高く、輸送時に外界温度に長期間さらされる場合にも適しています。Sheath Fluidの主要組成は従来のままであり、99％の水と1％のナトリウム／カリウム塩、リン酸塩、アジ化ナトリウム、安息香酸ナトリウム、ジアゾリジニル尿素から成る、希釈されたリン酸緩衝生理食塩水（PBS）です。表1に、従来のSheath Fluidのカタログ番号と、対応する新しいSheathおよびDrive Fluid PLUSのカタログ番号および製品名を示します。 

Sheath FluidとSheath Fluid PLUSの比較

Sheath FluidとSheath Fluid PLUSは、磁気ビーズをウェルから検出チャネルに輸送するための媒体となります。  この実験は、Sheath Fluid PLUSがアッセイに適合し、アッセイ性能に悪影響を及ぼさないことを実証するために行われました。この試験は、使用したSheath Fluidのタイプにかかわらず、MILLIPLEX^®マルチプレックスアッセイによって、予想通りの結果が得られたことを示しています。

材料と方法

この試験では、Sheath FluidおよびSheath Fluid PLUSの両方を用いて、4つのMILLIPLEX^®マルチプレックスパネルのスタンダードとクオリティーコントロール（QC）を評価しました。

4つのMILLIPLEX^®マルチプレックスパネルの標準曲線はデュプリケートで作成し、QCはn=4で解析しました。それぞれキットプロトコルに従って1枚の96ウェルプレート上に調製しました。さらに、96ウェルプレートは、Sheath Fluid用とSheath Fluid PLUS用に1枚ずつ調製しました。プレートをLuminex^®200™システムで測定しました。データをBelysa^® Immunoassay Curve Fitting Software（カタログ番号：40-122）で解析しました。

比較結果

MILLIPLEX^®パネルに含まれる各アナライトについて標準曲線をプロットしました。それぞれの標準曲線のポイントで変動係数（％ CV）を算出し、xMAP^®Sheath Fluid PLUSの性能を比較しました。Sheath Fluid PLUSを使用した場合とSheath Fluidを使用した場合を比較すると、MILLIPLEX^®標準曲線は、同等の蛍光強度中央値（MFI）を示し、性能に変化はみられませんでした（図1）。 

各スタンダードポイントおよびバックグラウンドのデュプリケートでの％ CVは10％未満でした（図2）。 

さらに、Sheath Fluid PLUSとSheath Fluidを比較するために、QCデータもn=4で評価しました（表2）。QC値にはほとんどばらつきが認められず、指定したQCレンジに収まっていました。ここでは、各パネルの1つのアナライトのみのデータを示します。このデータは、それぞれのパネルの全アナライトを代表するデータです。

まとめ

xMAP^®Sheath FluidまたはSheath Fluid PLUSを使用したとき、4つのMILLIPLEX ^®パネル（合計76個のアナライト）のデータに、大きな変化やばらつきは認められませんでした。この試験では、Sheath Fluid PLUSはSheath Fluidと同一の性能を持ち、MILLIPLEX^®アッセイの性能に影響を与えないことを示しています。さらに、Sheath Fluid PLUSでは、Sheath Fluidよりも強力な抗菌活性と、優れた輸送時安定性が得られます。

研究目的での使用に限定されます。診断目的では使用しないでください。