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主要文書

安全性情報

DUO94004

Sigma-Aldrich

Duolink® flowPLA Detection Kit - FarRed

Duolink® PLA kit for Flow Cytometry with FarRed Detection

別名:

in situ Proximity Ligation Assay, Flowcytometry-PLA, Protein Protein Interaction Kit

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About This Item

UNSPSCコード:
41105331
NACRES:
NA.32

製品種目

Duolink®

テクニック

flow cytometry: suitable
immunofluorescence: suitable
proximity ligation assay: suitable

蛍光検出

λex 644 nm; λem 669 nm

適合性

suitable for fluorescence

輸送温度

dry ice

保管温度

−20°C

詳細

Duolink® flowPLA Detection Kitには、フルオロフォアの付いた検出用オリゴヌクレオチドが含まれています(lex = 644 nm/lem = 669 nm)。

特異性

遠赤色蛍光検出試薬
λ ex 644 nm励起に適したレーザーを使用してください。
λ em 669 nm蛍光に適したフィルターを使用してください。

アプリケーション

Duolink® flowPLA Detection Kit–FarRedは、下記でin situ近接ライゲーションアッセイに使用されています:
  • 細胞レチノイン酸結合タンパク質1(Crabp1)と急速進行性線維肉腫(Raf)キナーゼ- MAPK-Erkキナーゼ(Mek)シグナル伝達経路の要素の間の相互作用および複合体形成を検出するため
  • ヒト培養MOLT-4細胞とHeLa細胞のタンパク質相互作用を検討するため
  • Beclin-1タンパク質とニューロンの14-3-3tとの相互作用を可視化するため
  • 移植内皮細胞のタンパク質相互作用を検討するため 

近接ライゲーションアッセイ(PLA)で、Duolink®PLAを使用すれば、固定細胞でのタンパク質相互作用、翻訳後修飾、および1分子レベルでのタンパク質発現レベルの内在的検出が可能になります。

Duolink® flowPLA Detection Kitを使ったフローサイトメトリーにより、細胞集団内のタンパク、タンパク間相互作用、およびタンパク修飾を高感度で検出することができます。Duolink® flowPLA実験の実施には、固定細胞懸濁液、対象のタンパクを特異的に認識する2つの一次抗体、1組のPLAプローブ(100RXN PLUS 1つおよび100RXN MINUS 1つ)、洗浄バッファ、およびDuolink® flowPLA Detection Kitが必要です。flowPLA Kitでは、5つの異なるフルオロフォアを利用できます。バイオレット、赤、緑、橙、遠赤色。flowPLA Kitには、フローサイトメトリーにより、結合したPLAプローブの増幅および検出を行うために必要な試薬のすべてが含まれています。解析は、標準的なフローサイトメトリーアッセイ機器を用いて行います。固定済み細胞浮遊液、一次抗体、および対応するPLAプローブを用意します。

本製品はDuolink® PLAフローサイトメトリープロトコルに従って使用してください。

Duolink®を用いた実験方法、用途、トラブルシューティングなどの情報は、Duolink® PLAフローサイトメトリーのサイトをご覧ください。

アプリケーションノート

一次抗体が必要です。お客様の一次抗体(IgG-クラス、モノクローナルまたはポリクローナル)を標準免疫蛍光染色(IF)、免疫組織染色(IHC)または免疫細胞染色(ICC)アッセイで試験し、最適な固定、ブロッキングおよび力価条件を決定します。フロー検証済み抗体を推奨します。

Duolink®プロジェクトを推進するため、カスタムサービスプログラムで詳細をご覧になり、弊社にお申し付けください。

Duolink®製品の全てのリストを表示する。

特徴および利点

  • フローサイトメトリー読取り値を用いてタンパク間相互作用を解析します。
  • 近接ライゲーションアッセイを用いて細胞集団を解析します。
  • 少量のターゲットに対しローリングサークル型の増幅を行うことにより感度が向上します
  • 過剰発現や遺伝子操作は不要
  • 相対的な定量が可能
  • あらゆるフローサイトメトリー機器を用いて操作できます
  • 柔軟なプロトコルに沿って容易に実施できます
  • 論文などにそのまま使用できる結果

構成

本製品の構成は次のとおりです。
  • 検出液- FarRed(DUO84004)5本入り
  • ライゲーションバッファー(DUO82009)5本入り
  • 増幅バッファー(DUO82050)5本入り
  • リガーゼ(1U/μL)
  • ポリメラーゼ(10U/μL)

詳しくはデータシートを参照してください。

法的情報

Duolink is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
PLA is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

ピクトグラム

Health hazard

シグナルワード

Danger

危険有害性情報

注意書き

危険有害性の分類

Resp. Sens. 1

保管分類コード

10 - Combustible liquids


適用法令

試験研究用途を考慮した関連法令を主に挙げております。化学物質以外については、一部の情報のみ提供しています。 製品を安全かつ合法的に使用することは、使用者の義務です。最新情報により修正される場合があります。WEBの反映には時間を要することがあるため、適宜SDSをご参照ください。

毒物及び劇物取締法

キットコンポーネントの情報を参照してください

PRTR

キットコンポーネントの情報を参照してください

消防法

キットコンポーネントの情報を参照してください

労働安全衛生法名称等を表示すべき危険物及び有害物

キットコンポーネントの情報を参照してください

労働安全衛生法名称等を通知すべき危険物及び有害物

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カルタヘナ法

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Jan Code

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Karl-Johan Leuchowius et al.
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Stress granules (SGs) are dynamic cytoplasmic aggregates of translationally silenced mRNAs that assemble in response to environmental stress. SGs appear to play an important role in antiviral innate immunity and many viruses have evolved to block or subvert SGs components

資料

Considerations for proper experimental design, preparation and execution of the Duolink® PLA for flow cytometry protocol.

Considerations for proper experimental design, preparation and execution of the Duolink® PLA for flow cytometry protocol.

General tips and tricks for proper experiment execution, aid in identifying potential problems, and provide solutions to ensure a successful Duolink® PLA experiment for flow cytometry.

Traditional flow cytometry has been limited in the ability to detect protein-protein interactions and low abundant proteins events — until now. We have combined Duolink® Proximity Ligation Assay (PLA) with flow cytometry in a convenient kit, making the analysis of protein-protein interactions with flow cytometry readouts a reality.

プロトコル

Protocol for use of Duolink® PLA reagents for the detection of individual proteins, protein modifications, and protein-protein interactions within cell populations by flow cytometry.

ライフサイエンス、有機合成、材料科学、クロマトグラフィー、分析など、あらゆる分野の研究に経験のあるメンバーがおります。.

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