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使用法
sufficient for 50 isolation(s)
品質水準
メーカー／製品名
Roche
包装
kit of for 50 isolations
テクニック
Northern blotting: suitable
RT-PCR: suitable
詳細
ハイピュアRNA組織キットは、組織サンプルから変性のない全RNAを、全くDNAの混入なく精製できるようデザインされています。低から中程度の処理能力のRNAプラスミド単離。核酸は、カオトロピック塩（グアニジンHCl）存在下でガラスフリースの表面に結合します。これによって、ハイピュアスピンフィルターチューブに核酸（DNAとRNA両方）を特異的に固定化すると同時に混入物を取り除くことができます。RNA単離の場合、全てのRNAを確実に固定化できるよう、結合条件を最適化することができます。ハイピュアRNA単離キットは、培養細胞、哺乳類血液、白血球（WBC）、酵母、細菌などのさまざまな研究サンプルから完全な総RNAを速やかに単離できます。マウスの肝臓、脾臓、肺、心臓などの哺乳類組織から迅速に全RNAを単離します。
容量：ハイピュアスピンフィルターチューブのサンプル容量は最高700 μL。
サンプル物質：固形組織（例：マウス肝臓、脾臓、肺、心臓）：1～25 mg
注：サンプルサイズは組織の調製方法に左右されます。大きいサンプル（>10 mg）はローターステーター式ホモジナイザーで処理する必要があります。
容量：ハイピュアスピンフィルターチューブのサンプル容量は最高700 μL。
サンプル物質：固形組織（例：マウス肝臓、脾臓、肺、心臓）：1～25 mg
注：サンプルサイズは組織の調製方法に左右されます。大きいサンプル（>10 mg）はローターステーター式ホモジナイザーで処理する必要があります。
アプリケーション
ハイピュアRNA組織キットは下記で使用されています：
分離したRNAは下記の多くの下流の用途に使用できます：
- cDNAライブラリー作成用にヒト細胞から総RNAを抽出するため
- リアルタイムPCR解析用に培養細胞から総RNAを抽出するため
- ラット海馬から総RNAを抽出するため
- 培養細胞およびヒト脊髄から総RNAを精製するため
- 心室壁から収集した組織の総RNAを分離するため
分離したRNAは下記の多くの下流の用途に使用できます：
- ノーザンブロッティング
- RACE
- プライマー伸長
- ディファレンシャルディスプレイ
- RNaseプロテクションアッセイ
- in vitro翻訳
特徴および利点
- 約30分でRNAサンプルを調製。
- その後の用途に適した濃縮RNAが得られます。
- RNAを変性させる沈殿やその他の手順を行うことなく、混入物質を取り除くキットでRNAのロスは最小限。
- 塩化セシウム、フェノール、クロロホルム、エチジウムブロミドなど、危険な有機化合物は使用しません。
構成
- 溶解／結合バッファー
- DNase I（凍結乾燥）
- DNaseインキュベーションバッファー
- 洗浄バッファーI
- 洗浄バッファーII
- 溶出バッファー
- ハイピュアスピンフィルターチューブ（ガラス繊維フリース入り）
- コレクションチューブ
品質
- 組織は溶解／結合バッファー中で破砕・ホモジナイズし、上記のように精製します。
- RNA回収量を260 nmの光学密度で測定します。
- 完全性及びサイズ分布はリボソームRNAの変性アガロースゲル中のバンドパターンにより検査しています。
- 10 μLのRNA溶出液を鋳型として、逆転写酵素M-MuLVとプライマーp（dT）15を用い第一鎖合成を行います。次にエキスパンドハイフィディリティPCRシステムとグリセリンアルデヒド3-リン酸デヒドロゲナーゼ（GAPDH）特異的プライマーを用いてPCRを行い、予想サイズ983 bpの増幅産物を得ます。
- DNA混入がないことは、前RT反応なしのPCRにより検査しています。増幅産物は認められていません。
調製ノート
組織サンプルはRNaseを不活化するカオトロピック塩（グアニジンHCl）存在下で破砕・ホモジナイズします。ホモジネートをハイピュアスピンフィルターチューブ中のガラス繊維フリースにアプライします。手順に使用するバッファー条件下で全ての核酸がガラス繊維フリースに結合しますが、混入物質（塩、タンパク質、その他の細胞物質）は結合しません。結合したDNAはフィルター上でDNase Iにより直接分解されます。短時間の洗浄－遠心ステップで、分解されたDNAフラグメントや他の細胞物質を容易に除去します。残る精製されたRNAを少量の低塩バッファーで抽出します。
その他情報
ハイピュアテクノロジーおよびシリカ吸着キット
ライフサイエンス研究用途に限ります。診断用途に使用しないでください。
ライフサイエンス研究用途に限ります。診断用途に使用しないでください。
図1：ホモジナイズ法の比較マウス肝臓を様々な方法でホモジナイズしました。それぞれのホモジネートから、全RNAをハイピュアRNA組織キットを用いて精製しました。単離したRNAの一部をとり、GADH mRNA領域特異的プライマーを用いて逆転写しました。cDNA産物をゲル電気泳動で分析しました。
レーン1：ホモジナイズ：Ultra Turrax、回収量：1.9 μg/mg組織、A260/A280：2.0
レーン2：ホモジナイズ：モーター駆動、ディスポーザブルプラスチック乳棒、回収量：3 μg/mg組織、A260/A280：2.0
レーン3：ホモジナイズ：乳鉢及び乳棒、20ゲージ針、回収量：1.5 μg/mg組織、A260/A280：2.0
レーン4：ホモジナイズ：手動ディスポーザブルプラスチック乳棒、20ゲージ針、回収量：1.8 μg/mg組織、A260/A280：2.0
レーン5：ホモジナイズ：手動ディスポーザブルプラスチック乳棒、回収量：3.4 μg/mg組織、A260/A280：2.0
レーン6：ホモジナイズ：ビーズ-ボルテックス、回収量：3 μg/mg組織、A260/A280：2.0
レーン7：分子量マーカー
レーン1：ホモジナイズ：Ultra Turrax、回収量：1.9 μg/mg組織、A260/A280：2.0
レーン2：ホモジナイズ：モーター駆動、ディスポーザブルプラスチック乳棒、回収量：3 μg/mg組織、A260/A280：2.0
レーン3：ホモジナイズ：乳鉢及び乳棒、20ゲージ針、回収量：1.5 μg/mg組織、A260/A280：2.0
レーン4：ホモジナイズ：手動ディスポーザブルプラスチック乳棒、20ゲージ針、回収量：1.8 μg/mg組織、A260/A280：2.0
レーン5：ホモジナイズ：手動ディスポーザブルプラスチック乳棒、回収量：3.4 μg/mg組織、A260/A280：2.0
レーン6：ホモジナイズ：ビーズ-ボルテックス、回収量：3 μg/mg組織、A260/A280：2.0
レーン7：分子量マーカー
シグナルワード
Danger
危険有害性の分類
Acute Tox. 4 - Acute Tox. 4 Oral - Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 Inhalation - Skin Sens. 1
保管分類コード
12 - Non Combustible Liquids
WGK
WGK 1
引火点(°F)
does not flash
引火点(℃)
does not flash
試験成績書（COA）
製品のロット番号・バッチ番号を入力して、試験成績書（COA） を検索できます。ロット番号・バッチ番号は、製品ラベルに「Lot」または「Batch」に続いて記載されています。
Kamila Nowak et al.
Epigenetics, 6(8), 1012-1020 (2011-07-05)
The monoallelic expression of imprinted genes is controlled by epigenetic factors including DNA methylation and histone modifications. In mouse, the imprinted gene Gtl2 is associated with two differentially methylated regions: the IG-DMR, which serves as a gametic imprinting mark at
LingJun Zhan et al.
TheScientificWorldJournal, 2012, 907095-907095 (2012-05-31)
The real-time PCR diagnostics for avian influenza virus H5N1 in tissue specimens are often suboptimal, since naturally occurring PCR inhibitors present in samples, or unanticipated match of primer to unsequenced species' genome. With the principal aim of optimizing the SYBR
Helena Taflin et al.
Cancer chemotherapy and pharmacology, 82(6), 987-997 (2018-10-01)
The aim of study was to investigate the relationship between folate concentration and expression of folate-associated genes in tumour, mucosa and plasma of patients with colorectal cancer, after intraoperative administration of bolus leucovorin (LV). Eighty patients were randomized into four
Bibi Marjan Razavi et al.
Iranian journal of pharmaceutical research : IJPR, 16(4), 1452-1462 (2018-03-20)
Antidepressant activity of crocin, saffron main component, has been established before. Based on previous study, it is suggested that elevation in the levels of BDNF (brain-derived neurotrophic factor), CREB (cAMP response element binding) and VGF neuropeptide could be considered as
Faezeh Vahdati Hassani et al.
Daru : journal of Faculty of Pharmacy, Tehran University of Medical Sciences, 22(1), 16-16 (2014-01-10)
Antidepressants have been shown to affect levels of brain-derived neurotrophic factor (BDNF) and VGF (non-acronymic) whose transcriptions are dependent on cAMP response element binding protein (CREB) in long term treatment. The aim of this study was to verify the subacute
ライフサイエンス、有機合成、材料科学、クロマトグラフィー、分析など、あらゆる分野の研究に経験のあるメンバーがおります。.
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