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Merck

SCR508

Sigma-Aldrich

TAT-CREリコンビナーゼ

TAT-CRE Recombinase is a recombinant cell-permeant fusion cre-recombinase protein consisting of TAT sequence, a nuclear localization sequence (NLS) and it is known to catalyze the site specific recombination event between two loxP DNA sites.

別名:

Integrase, Recombinase Cre, cre recombinase

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About This Item

UNSPSCコード:
12352204
eCl@ss:
32160405
NACRES:
NA.75

由来生物

Escherichia coli

品質水準

リコンビナント

expressed in E. coli

アッセイ

>70% (SDS-PAGE)

形状

liquid

テクニック

cell culture | stem cell: suitable

輸送温度

dry ice

詳細

Creリコンビナーゼは、バクテリオファージP1由来の酵素であり、loxP部位と呼ばれる2つのDNA認識部位間の部位特異的組換えを触媒します。 LoxP認識部位は、8 bpのスペーサー領域に隣接する2個の13 bpの逆方向反復配列からなっています。 Cre遺伝子とloxP部位はほとんどの種のゲノムには存在しないため、LoxP部位を遺伝子操作して標的細胞に導入することが可能であり、これによりin vitro(培養細胞)とin vivo(動物モデル)で遺伝子の発現を正確に制御する手段として利用できます。

• LoxP部位が異なる染色体上に位置する場合、Creリコンビナーゼは染色体転座を仲介します。
• LoxP部位が反対方向に向いている場合、CreリコンビナーゼはloxP導入部分の反転を仲介します。
• LoxP部位が同じ方向に向いている場合、CreリコンビナーゼはloxP導入部分の欠失を仲介します。

このように、LoxP部位を配置することによって、遺伝子を活性化、抑制、あるいは他の遺伝子と交換することが可能になります。

EMD Millipore社のTAT-CREリコンビナーゼは、大腸菌から効率的にタンパク質を精製するための、HIV-TAT(TAT)由来の塩基性タンパク質移行ペプチド、核移行配列(NLS)、Creタンパク質、N末端ヒスチジンタグ(H6)で構成されるリコンビナント細胞透過性融合タンパク質です。

EMD Millipore社のTAT-CREリコンビナーゼは、ヒトおよびマウスの両方のIPS細胞からSTEMCCAウイルス導入遺伝子を効果的に除去することが示されています。

アプリケーション

EMDミリポア社は、哺乳動物細胞に直接送達でき、高い組換え効率(マウス細胞で75~100%、ヒト細胞で約60%)をもたらす細胞透過性TAT-CREリコンビナーゼ融合タンパク質を開発しました。 TAT-CREは哺乳動物細胞に容易に移行し、きわめて効率的な組換えを触媒することが可能です。 Creばく露の用量とタイミングは正確に制御できるため、Cre活性を慎重に漸増することが可能です。

品質

TAT-CREリコンビナーゼタンパク質の各ロットに対し、以下のパラメータについて厳密な品質管理試験を行います:

  • 純度:SDS-PAGEゲル上でタンパク質純度70%超の41 kDa付近の単一バンド
  • 機能的活性:HEK293T-Creレポーター細胞株におけるLoxPで修飾された対立遺伝子の組換えを媒介
  • エンドトキシン濃度:タンパク質1 µgあたり1 EU未満

単位の定義

HEK293T loxpレポーター細胞株アッセイにおいて50% GFP発現を誘導するために必要な、組織培養培地1.0 mL中のTAT-CRE(ug)の標準量は100単位と定義されています。

物理的形状

リコンビナントタンパク質は、50%グリセロール(v/v)、500 mM塩化ナトリウムと20 mM HEPESを含むバッファー溶液(pH 7.4)で提供されます。

保管および安定性

-20℃または-80℃で受領日から3か月間安定です。 初回溶解時に、バイアルを遠心して、溶液を穏やかに混合してください。 少量のワーキング容量に分注してから、-20℃または-80℃で冷凍してください。 使用前に、TAT-CREを培地で適切な濃度に希釈し、0.2 μmの低タンパク質結合シリンジフィルター(Milliporeカタログ番号:SLGV 033RSまたはSLGV013 SL)でろ過してください。

保管分類コード

10 - Combustible liquids

WGK

WGK 1


適用法令

試験研究用途を考慮した関連法令を主に挙げております。化学物質以外については、一部の情報のみ提供しています。 製品を安全かつ合法的に使用することは、使用者の義務です。最新情報により修正される場合があります。WEBの反映には時間を要することがあるため、適宜SDSをご参照ください。

Jan Code

SCR508:


試験成績書(COA)

製品のロット番号・バッチ番号を入力して、試験成績書(COA) を検索できます。ロット番号・バッチ番号は、製品ラベルに「Lot」または「Batch」に続いて記載されています。

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Mian Zhang et al.
Journal of bone and mineral research : the official journal of the American Society for Bone and Mineral Research, 34(4), 726-738 (2018-11-30)
Traumatic joint injuries produce osteoarthritic cartilage manifesting accelerated chondrocyte terminal differentiation and matrix degradation via unknown cellular and molecular mechanisms. Here we report the ability of biomechanical stress to increase expression of the calcium-sensing receptor (CaSR), a pivotal driver of
Stem cell engineering using transducible Cre recombinase.
Nolden, Lars, et al.
Methods in Molecular Medicine, 140, 17-32 (2007)
Site-specific recombination in human embryonic stem cells induced by cell-permeant Cre recombinase.
Nolden, Lars, et al.
Nature Methods, 3, 461-467 (2006)
Stage-specific conditional mutagenesis in mouse embryonic stem cell-derived neural cells and postmitotic neurons by direct delivery of biologically active Cre recombinase.
Haupt, Simone, et al.
Stem Cells, 25, 181-188 (2007)
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In this study, we report that the TLR4 ligand, LPS, and TLR3 ligand polyinosinic:polycytidylic acid failed to activate IRF3 or STAT1 in bone marrow-derived macrophages (BMMs) isolated from two independently generated lines of Rosa26-integrated Cas9-expressing C57BL/6J (B6) mice. RNA-sequencing analysis

資料

Fibroblast growth factors (FGFs) are secreted glycoproteins that regulate several fundamental developmental pathways and help regulate mesoderm and ectoderm patterning in the early embryonic development.

ライフサイエンス、有機合成、材料科学、クロマトグラフィー、分析など、あらゆる分野の研究に経験のあるメンバーがおります。.

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