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由来生物
human
品質水準
リコンビナント
expressed in Chem-1 cells
メーカー／製品名
ChemiScreen
Chemicon®
テクニック
ligand binding assay: suitable (GTPγS)
radioligand binding assay (RLBA): suitable
NCBIアクセッション番号
UniProtアクセッション番号
輸送温度
dry ice
詳細
アドレナリン作動性 α1B をコードする全長ヒト ADRA1B cDNA
内因性カテコールアミンであるエピネフリンとノルエピネフリンは、平滑筋活動、心機能、炭水化物や脂肪の代謝、ホルモン分泌、神経伝達物質の放出、中枢神経系の作用に大きな影響を与えます。 これらの活性は、α アドレナリン受容体および β アドレナリン受容体という 2 つのサブファミリーに属する GPCR によって媒介されます（Bylund et al., 1994）。 アドレナリン受容体のうち α1 サブクラスに属する3種類、α1A、α1B および α1D は Gq に結合し、血管および尿路平滑筋の収縮、腸平滑筋の弛緩、心臓における収縮力の増大、肝臓におけるグリコーゲン分解および糖新生を促進します。 異なるサブタイプが重複して分布し、生物種や組織によってこれらの作用にさまざまに関与しています。トランスジェニックマウスの心臓で構成的に活性な α1B 変異体を過剰発現させると、心肥大が起こり、心臓重量対体重比が増加しました。 α1B ノックアウトマウスの分析から、α1B が α1 アゴニストによって誘発される、血圧や大動脈収縮反応の媒介因子であるという証拠が得られています（Milano et al., 1994）。α1B アドレナリン受容体を欠損したマウスでは、精神刺激薬やオピエートの運動効果や報酬効果が抑制されました（Drouin et al. 2002）。Millipore′のα1B 膜製剤は、当社独自の安定性組換え細胞株から作成された粗製膜製剤です。GPCR の表面発現が高レベルであるため、α1B のアゴニストおよびアンタゴニストをスクリーニングするのに理想的な HTS ツールです。 この膜製剤は [3H]-プラゾシンに対して 0.8 nM の Kd を示します。 1 nM の [3H]-プラゾシンで、5μg/ウェルの α1B 膜製剤は、通常 5 倍以上のシグナル/バックグラウンド比を示します。
アプリケーション
放射性リガンド結合アッセイおよびGTPγS結合。
生物化学的／生理学的作用
GPCR クラス：A
タンパク質標的：α1B
標的サブファミリー：アドレナリン作動性
品質
表1. さまざまな量の α1B 受容体膜製剤を用いた競合結合アッセイで得られたシグナル：バックグラウンドおよび特異的結合値。
仕様：1 ユニット = 5 µg 膜製剤
[3H]-プラゾシン結合の Bmax：12.9 pmol/mg タンパク質
[3H] -プラゾシン結合の Kd： ~0.8 nM
| 5 µ g/ウェル | |
|---|---|
| シグナル：バックグラウンド | 11.8 |
| 特異的結合（cpm） | 1171 |
仕様：1 ユニット = 5 µg 膜製剤
[3H]-プラゾシン結合の Bmax：12.9 pmol/mg タンパク質
[3H] -プラゾシン結合の Kd： ~0.8 nM
規格
インキュベーション条件
アッセイ推奨条件：非結合 96-ウェルプレート内で、膜を放射性リガンドおよび非標識競合物質（試験濃度については図 1 および 2 を参照）と結合緩衝液中で混合し、1～2時間インキュベートします。ろ過の前に、FC 96 ウェル採取プレート（Millipore カタログ番号 MAHF C1H）を 0.33% ポリエチレンイミンで 30 分コーティングし、50 mM トリス、pH 7.4 で洗浄します。 結合反応をフィルタープレートに移し、洗浄緩衝液で 3 回洗浄します（1 回の洗浄につき各ウェル 1 mL）。 プレートを乾燥させ、カウントします。
結合緩衝液：50 mM トリス、pH 7.4、10 mM MgCl2、1 mM EDTA、ろ過後、4°C で保存
放射性リガンド：[3H]-プラゾシン。（Perkin Elmer # NET823）
洗浄緩衝液：50 mM トリス、pH 7.4、500 mM NaCl。0.1% BSA ろ過後、4°Cで保存。
各パッケージには、少なくとも 200 アッセイ（ユニット）分の膜が収められています。1 ユニットとは、1 nM の3H 標識プラゾシンで 5 倍以上のシグナル：バックグラウンドが得られる膜の量を意味します。
アッセイ推奨条件：非結合 96-ウェルプレート内で、膜を放射性リガンドおよび非標識競合物質（試験濃度については図 1 および 2 を参照）と結合緩衝液中で混合し、1～2時間インキュベートします。ろ過の前に、FC 96 ウェル採取プレート（Millipore カタログ番号 MAHF C1H）を 0.33% ポリエチレンイミンで 30 分コーティングし、50 mM トリス、pH 7.4 で洗浄します。 結合反応をフィルタープレートに移し、洗浄緩衝液で 3 回洗浄します（1 回の洗浄につき各ウェル 1 mL）。 プレートを乾燥させ、カウントします。
結合緩衝液：50 mM トリス、pH 7.4、10 mM MgCl2、1 mM EDTA、ろ過後、4°C で保存
放射性リガンド：[3H]-プラゾシン。（Perkin Elmer # NET823）
洗浄緩衝液：50 mM トリス、pH 7.4、500 mM NaCl。0.1% BSA ろ過後、4°Cで保存。
各パッケージには、少なくとも 200 アッセイ（ユニット）分の膜が収められています。1 ユニットとは、1 nM の3H 標識プラゾシンで 5 倍以上のシグナル：バックグラウンドが得られる膜の量を意味します。
物理的形状
パッケージ緩衝液中の液体：50 mM トリス、pH7.4、10% グリセロール、1% BSA、保存料無添加。
包装方法：膜タンパク質は 1 mL の包装緩衝液で 1 mg/mL に調整し、急速凍結して -80°C で保存したものです。
包装方法：膜タンパク質は 1 mL の包装緩衝液で 1 mg/mL に調整し、急速凍結して -80°C で保存したものです。
保管および安定性
凍結したまま、-70°C で最長 2 年保存できます。 凍結融解しないでください。
法的情報
CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
免責事項
メルクのカタログまたは製品に添付されたメルクのその他の文書に記載されていない場合、メルクの製品は研究用途のみを目的としているため、他のいかなる目的にも使用することはできません。このような目的としては、未承認の商業用途、in vitroの診断用途、ex vivoあるいはin vivoの治療用途、またはヒトあるいは動物へのあらゆる種類の消費あるいは適用などがありますが、これらに限定されません。
保管分類コード
12 - Non Combustible Liquids
WGK
WGK 2
引火点(°F)
Not applicable
引火点(℃)
Not applicable
適用法令
試験研究用途を考慮した関連法令を主に挙げております。化学物質以外については、一部の情報のみ提供しています。 製品を安全かつ合法的に使用することは、使用者の義務です。最新情報により修正される場合があります。WEBの反映には時間を要することがあるため、適宜SDSをご参照ください。
Jan Code
HTS158M:
試験成績書（COA）
製品のロット番号・バッチ番号を入力して、試験成績書（COA） を検索できます。ロット番号・バッチ番号は、製品ラベルに「Lot」または「Batch」に続いて記載されています。
Myocardial expression of a constitutively active alpha 1B-adrenergic receptor in transgenic mice induces cardiac hypertrophy.
Milano, C A, et al.
Proceedings of the National Academy of Sciences of the USA, 91, 10109-10113 (1994)
ライフサイエンス、有機合成、材料科学、クロマトグラフィー、分析など、あらゆる分野の研究に経験のあるメンバーがおります。.
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