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由来生物
human
品質水準
リコンビナント
expressed in Chem-1 cells
メーカー/製品名
ChemiScreen
Chemicon®
テクニック
ligand binding assay: suitable (GTPγS)
radioligand binding assay (RLBA): suitable
NCBIアクセッション番号
UniProtアクセッション番号
輸送温度
dry ice
詳細
5-HT1B セロトニン受容体をコードする全長ヒト HTR1B cDNA
5-ヒドロキシトリプタミン(5-HT、一般にセロトニンとも呼ばれる)は、腸のエンテロクロマフィン細胞とセロトニン作動性神経末端で合成されます。 末梢では、5-HT は消化管運動、血小板凝集、血管収縮を媒介します。 睡眠、運動、知覚、覚醒、食欲など、中枢神経系の多くの機能が 5-HT の影響を受けています。 12 種類の GPCR ファミリーと 1 種類のイオ ンチャネルが、5-HT の生物学的作用を媒介しています (Hoyer et al., 1994)。 5-HT1B 受容体(5-HT1Dβ としても知られる)は、セロトニン作動性ニューロンではシナプス前、非セロトニン作動性ニューロンではシナプス後に発現し、5-HT とアセチルコリンの放出を制御しています。 淡蒼球、黒質、背側海馬台など、複数の脳領域で HT1B が高発現しています。 5-HT1B は、攻撃性、うつ病、片頭痛、不安、薬物乱用に対する報酬の生理学に関連しています(Sari, 2004)。 5-HT1B は p11 と相互作用し、これにより 5-HT1B の細胞表面発現と機能を高めます(Svenningsson et al., 2006)。 Millipore′の 5-HT1B 膜製剤は、当社独自の安定性組換え細胞株から作成された粗製膜製剤です。GPCR の表面発現が高レベルであるため、5-HT1B のアゴニストおよびアンタゴニストをスクリーニングするのに理想的な HTS ツールです。 この膜製剤は [3H]-GR125743 に対して 10.5 nM の Kd を示します。 7 nM の [3H]-GR125743 で、10μg/ウェルの 5-HT1B 膜製剤は、通常 8 倍以上のシグナル/バックグラウンド比を示します。
アプリケーション
放射性リガンド結合アッセイおよびGTPγS結合。
生物化学的/生理学的作用
GPCR クラス:A
タンパク質標的:5-HT1B
標的サブファミリー:セロトニン
品質
表1. さまざまな量の sst5 受容体膜製剤を用いた競合結合アッセイで得られたシグナル:バックグラウンドおよび特異的結合値:
仕様:1 ユニット = 10 μg
[3H]-GR125743 結合の Bmax:3.7 pmol/mg タンパク質
[3H]-GR125743 結合の Kd: 約 10.5 nM
10 µg/ウェル | 20µg/ウェル | |
---|---|---|
シグナル:バックグラウンド | 12.4 | 10.5 |
特異的結合(cpm) | 3210 | 3352 |
仕様:1 ユニット = 10 μg
[3H]-GR125743 結合の Bmax:3.7 pmol/mg タンパク質
[3H]-GR125743 結合の Kd: 約 10.5 nM
規格
インキュベーション条件
アッセイ推奨条件:非結合 96-ウェルプレート内で、膜を放射性リガンドおよび非標識競合物質(試験濃度については図 1 および 2 を参照)と結合緩衝液中で混合し、1~2時間インキュベートします。ろ過の前に、FC 96 ウェル採取プレート(Millipore カタログ番号 MAHF C1H)を 0.33% ポリエチレンイミンで 30 分コーティングし、50 mM トリス、pH 7.4 で洗浄します。 結合反応をフィルタープレートに移し、洗浄緩衝液で 3 回洗浄します(1 回の洗浄につき各ウェル 1 mL)。 プレートを乾燥させ、カウントします。
結合緩衝液:50 mM トリス、pH 7.4、10 mM MgCl2、1 mM EDTA、ろ過後、4°C で保存
放射性リガンド:[3H]-GR125743。(Amersham #:TRK-1046)
洗浄緩衝液:50 mM トリス、pH 7.4、ろ過後、4°Cで保存。
各パッケージには、少なくとも 200 アッセイ(ユニット)分の膜が収められています。1 ユニットとは、7 nM の 3H標識 GR125743 で 8 倍以上のシグナル:バックグラウンドが得られる膜の量を意味します。
アッセイ推奨条件:非結合 96-ウェルプレート内で、膜を放射性リガンドおよび非標識競合物質(試験濃度については図 1 および 2 を参照)と結合緩衝液中で混合し、1~2時間インキュベートします。ろ過の前に、FC 96 ウェル採取プレート(Millipore カタログ番号 MAHF C1H)を 0.33% ポリエチレンイミンで 30 分コーティングし、50 mM トリス、pH 7.4 で洗浄します。 結合反応をフィルタープレートに移し、洗浄緩衝液で 3 回洗浄します(1 回の洗浄につき各ウェル 1 mL)。 プレートを乾燥させ、カウントします。
結合緩衝液:50 mM トリス、pH 7.4、10 mM MgCl2、1 mM EDTA、ろ過後、4°C で保存
放射性リガンド:[3H]-GR125743。(Amersham #:TRK-1046)
洗浄緩衝液:50 mM トリス、pH 7.4、ろ過後、4°Cで保存。
各パッケージには、少なくとも 200 アッセイ(ユニット)分の膜が収められています。1 ユニットとは、7 nM の 3H標識 GR125743 で 8 倍以上のシグナル:バックグラウンドが得られる膜の量を意味します。
物理的形状
パッケージ緩衝液中の液体:50 mM トリス、pH7.4、10% グリセロール、1% BSA、保存料無添加。
包装方法:膜タンパク質は 1 mL の包装緩衝液で 1 mg/mL に調整し、急速凍結して -80°C で保存したものです。
包装方法:膜タンパク質は 1 mL の包装緩衝液で 1 mg/mL に調整し、急速凍結して -80°C で保存したものです。
保管および安定性
凍結したまま、-70°C で最長 2 年保存できます。 凍結融解しないでください。
法的情報
CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
免責事項
研究専用。本製品は、輸出入活動を含めて、科学的な目的で使用することを意図した場合、フランスにおいて規制されます(フランス公衆衛生法Article L 1211-1 paragraph 2)。購入者(すなわち最終使用者)は、フランス研究省から公衆衛生法典L第1245-5-1 II.の輸入許可を取得する必要があります。本製品を注文することにより、適切な輸入許可を取得していることを確認することになります。
メルクのカタログまたは製品に添付されたメルクのその他の文書に記載されていない場合、メルクの製品は研究用途のみを目的としているため、他のいかなる目的にも使用することはできません。このような目的としては、未承認の商業用途、in vitroの診断用途、ex vivoあるいはin vivoの治療用途、またはヒトあるいは動物へのあらゆる種類の消費あるいは適用などがありますが、これらに限定されません。
メルクのカタログまたは製品に添付されたメルクのその他の文書に記載されていない場合、メルクの製品は研究用途のみを目的としているため、他のいかなる目的にも使用することはできません。このような目的としては、未承認の商業用途、in vitroの診断用途、ex vivoあるいはin vivoの治療用途、またはヒトあるいは動物へのあらゆる種類の消費あるいは適用などがありますが、これらに限定されません。
保管分類コード
12 - Non Combustible Liquids
WGK
WGK 2
引火点(°F)
Not applicable
引火点(℃)
Not applicable
適用法令
試験研究用途を考慮した関連法令を主に挙げております。化学物質以外については、一部の情報のみ提供しています。 製品を安全かつ合法的に使用することは、使用者の義務です。最新情報により修正される場合があります。WEBの反映には時間を要することがあるため、適宜SDSをご参照ください。
Jan Code
HTS108M:
試験成績書(COA)
製品のロット番号・バッチ番号を入力して、試験成績書(COA) を検索できます。ロット番号・バッチ番号は、製品ラベルに「Lot」または「Batch」に続いて記載されています。
ライフサイエンス、有機合成、材料科学、クロマトグラフィー、分析など、あらゆる分野の研究に経験のあるメンバーがおります。.
製品に関するお問い合わせはこちら(テクニカルサービス)