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詳細
ETA をコードする全長ヒト EDNRA cDNA
ペプチドのエンドセリンファミリーは、構成性および誘導性の両方の経路で、内皮細胞によって合成される強力な血管収縮薬です。 エンドセリンの生物学的作用は、ETA と ETB という 2 種類の GPCR によって媒介されます。ETA は平滑筋細胞上の支配的な受容体で あるため、in vivo におけるエンドセリンの血管収縮活性の主要な媒介物質です。 エンドセリン受容体は上皮や中枢神経系にも存在します（Davenport, 2002）。 Chemicon′の ETA 膜製剤は、当社独自の安定性組換え細胞株から作成された粗製膜製剤です。GPCR の表面発現が高レベルであるため、ETA とそのリガンドとの相互作用をスクリーニングするのに理想的な HTS ツールです。 この膜製剤は [125I]-エンドセリン-1 に対して 85 pM の Kd を示します。 2.5 または 10 ug/ウェルの ETA 膜製剤と 0.35 nM [125I]-エンドセリン-1 で、それぞれ 7 倍および 9 倍以上のシグナル／バックグラウンド比が得られました。
生物化学的／生理学的作用
タンパク質標的：ETA
品質
Bmax：1.23 pmol/mg
Kd： 85 pM
Kd： 85 pM
規格
インキュベーション条件
非結合 96-ウェルプレート内で、膜を放射性リガンドおよび非標識競合物質（試験濃度については図 1 および 2 を参照）と結合緩衝液中で混合し、1～2時間インキュベートします。ろ過の前に、GF/C 96 ウェルフィルタープレートを 0.33% ポリエチレンイミンで 30 分コーティングし、50 mM HEPES、pH7.4、0.5% BSA で洗浄します。 結合反応をフィルタープレートに移し、洗浄緩衝液で 3 回洗浄します（1 回の洗浄につき各ウェル 1 mL）。 プレートを乾燥させ、カウントします。
結合緩衝液：50 mM HEPES、pH 7.4、5 mM MgCl2、1 mM CaCl2、0.2% BSA、ろ過後、4°C で保存。
放射性リガンド：［125I］ エンドセリン-1（Perkin Elmer#:NEX-259）
洗浄緩衝液：50 mM HEPES、pH 7.4、500 mM NaCl、0.1% BSA、ろ過後、4°Cで保存。.
各パッケージには、少なくとも 200 アッセイ（ユニット）分の膜が収められています。1 ユニットとは、0.35 nM の125I 標識エンドセリン-1 で 5 倍以上のシグナル：バックグラウンドが得られる膜の量を意味します。
非結合 96-ウェルプレート内で、膜を放射性リガンドおよび非標識競合物質（試験濃度については図 1 および 2 を参照）と結合緩衝液中で混合し、1～2時間インキュベートします。ろ過の前に、GF/C 96 ウェルフィルタープレートを 0.33% ポリエチレンイミンで 30 分コーティングし、50 mM HEPES、pH7.4、0.5% BSA で洗浄します。 結合反応をフィルタープレートに移し、洗浄緩衝液で 3 回洗浄します（1 回の洗浄につき各ウェル 1 mL）。 プレートを乾燥させ、カウントします。
結合緩衝液：50 mM HEPES、pH 7.4、5 mM MgCl2、1 mM CaCl2、0.2% BSA、ろ過後、4°C で保存。
放射性リガンド：［125I］ エンドセリン-1（Perkin Elmer#:NEX-259）
洗浄緩衝液：50 mM HEPES、pH 7.4、500 mM NaCl、0.1% BSA、ろ過後、4°Cで保存。.
各パッケージには、少なくとも 200 アッセイ（ユニット）分の膜が収められています。1 ユニットとは、0.35 nM の125I 標識エンドセリン-1 で 5 倍以上のシグナル：バックグラウンドが得られる膜の量を意味します。
法的情報
CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
保管分類コード
12 - Non Combustible Liquids
WGK
WGK 2
引火点(°F)
Not applicable
引火点(℃)
Not applicable
適用法令
試験研究用途を考慮した関連法令を主に挙げております。化学物質以外については、一部の情報のみ提供しています。 製品を安全かつ合法的に使用することは、使用者の義務です。最新情報により修正される場合があります。WEBの反映には時間を要することがあるため、適宜SDSをご参照ください。
Jan Code
HTS070M:
試験成績書（COA）
製品のロット番号・バッチ番号を入力して、試験成績書（COA） を検索できます。ロット番号・バッチ番号は、製品ラベルに「Lot」または「Batch」に続いて記載されています。
ライフサイエンス、有機合成、材料科学、クロマトグラフィー、分析など、あらゆる分野の研究に経験のあるメンバーがおります。.
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