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LIG1

Sigma-Aldrich

DNA Ligation Kit

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About This Item

Codice UNSPSC:
12352204
NACRES:
NA.53

Grado

for molecular biology

Livello qualitativo

impiego

 kit sufficient for 150 ligation reactions

Condizioni di spedizione

wet ice

Temperatura di conservazione

−20°C

Descrizione generale

Sigma′s DNA Ligation Kit contains all of the reagents necessary to perform DNA ligation reactions. Sticky-end ligations are more efficient than blunt-end ligations; these can be facilitated with the addition of PEG.

Applicazioni

Suitable for:
  • Joining fragments of DNA into a cloning vector
  • Mutagenesis
  • Gene anyalysis and structure-function relationships

Componenti

Sufficient for 150 reactions:
  • 300uL 10X Ligation Buffer (D2176) in 250 mM Tris-HCl (pH 7.8) 100 mM MgCl2, and 10 mM dithiothreitol
  • 3 x 100 units T4 DNA Ligase (D2886) in 50% glycerol with 10 mM Tris-HCl (pH 7.5) 50 mM KCl, and 1 mM dithiothreitol
  • 3 x 100 uL 10 mM ATP ( A3702)
  • 50 uL Control pBR322 DNA, HAE III Digest (D9430) 0.5 ug/ul in 10 mM Tris-HCl (pH 8.0), and 1 mM EDTA
  • 1.5 mL 24% (w/v) PEG Solution, (P 2454)
  • 1.5 mL Molecular Biology Grade Water (W4502)

Principio

One of the most important steps in the cloning process is the ligation of linear DNA into a cloning vector. DNA ligations are performed by incubating DNA fragments with appropriately linearized cloning vectors in the presence of buffer, ATP, and DNA ligase. Many parameters affect ligations such as the relative ratio of insert to vector, the quality and type of the DNA ends, the temperature of ligation and the concentration of DNA.

Pittogrammi

Exclamation mark

Avvertenze

Warning

Indicazioni di pericolo

Classi di pericolo

Eye Irrit. 2

Codice della classe di stoccaggio

10 - Combustible liquids

Classe di pericolosità dell'acqua (WGK)

WGK 3

Punto d’infiammabilità (°F)

Not applicable

Punto d’infiammabilità (°C)

Not applicable


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Sambrook, J., et al
Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2, 1-1 (1989)
Ausubel, F. M.
Current Protocols in Molecular Biology, 1, 3-3 (1994)
Bradley J Eckelmann et al.
NAR cancer, 2(3), zcaa013-zcaa013 (2020-08-11)
Homologous recombination/end joining (HR/HEJ)-deficient cancers with BRCA mutations utilize alternative DNA double-strand break repair pathways, particularly alternative non-homologous end joining or microhomology-mediated end joining (alt-EJ/MMEJ) during S and G2 cell cycle phases. Depletion of alt-EJ factors, including XRCC1, PARP1 and

Protocolli

The cloning process requires the ligation of linear DNA into a cloning vector. This ability to join fragments of DNA through recombinant technology is essential for many basic experiments in biotechnology.

Il team dei nostri ricercatori vanta grande esperienza in tutte le aree della ricerca quali Life Science, scienza dei materiali, sintesi chimica, cromatografia, discipline analitiche, ecc..

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