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E8263

Sigma-Aldrich

Nucleasi Benzonase®, ultrapura

≥250 units/μL, ≥99% (SDS-PAGE), recombinant, expressed in E. coli, buffered aqueous glycerol solution, ultrapure grade

Sinonimo/i:

Endonucleasi

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About This Item

Numero CAS:
Classificazione EC (Enzyme Commission):
Numero MDL:
Codice UNSPSC:
12352204
NACRES:
NA.54

Origine biologica

Serratia marcescens

Livello qualitativo

Ricombinante

expressed in E. coli

Grado

ultrapure grade

Saggio

≥99% (SDS-PAGE)

Forma fisica

buffered aqueous glycerol solution

PM

30 kDa

Concentrazione

≥250 units/μL

applicazioni

research use

Condizioni di spedizione

wet ice

Temperatura di conservazione

−20°C

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Applicazioni

La nucleasi benzonasi ultra-pura, o endonucleasi di Serratia marcescens, è stata utilizzata in uno studio per valutare l′effetto del dodecilbenzensolfonato di sodio e degli agenti antischiuma sull′attività dell′endonucleasi di Serratia marcescens. L′endonucleasi di Serratia marcescens è stata inoltre utilizzata in uno studio per indagare la struttura delle subunità della cromatina.
L′enzima è stato utilizzato per un′analisi mirata a rilevare la quantità di Tf1 RNA protetta dalla nucleasi benzonasi contro la degradazione. L′elemento Tf1 di Schizosaccharomyces pombe è un lungo retrotrasposone contenente ripetizioni terminali che codifica le proteine proteasi funzionale, trascrittasi inversa e integrasi. È stato inoltre utilizzato nel frazionamento dei pellet e degli estratti nucleari ottenuti dai lisati di cellule.
Utilizzato per rimuovere gli acidi nucleici dai campioni di proteine.

Azioni biochim/fisiol

Benzonase® è un′endonucleasi geneticamente modificata prodotta da Serratia marcescens. La proteina è un dimero costituito da due subunità di 30 kDa ciascuna, con due legami disolfuro essenziali. Questa endonucleasi attacca e degrada tutte le forme di DNA e RNA (a singolo o doppio filamento, lineare e circolare) ed è efficace in una vasta gamma di condizioni operative. Digerisce completamente gli acidi nucleici fino a frammenti oligonucleotidici con estremità 5′-monofosfato di lunghezza compresa tra 3 e 5 basi. È il prodotto ideale per la rimozione degli acidi nucleici dalle proteine ricombinanti. Può anche essere utilizzata per applicazioni che richiedono la completa digestione degli acidi nucleici. Riduce inoltre la viscosità degli estratti proteici e previene l′aggregazione cellulare. Il pre-trattamento di un campione di proteine con questo enzima elimina eventuali legami con gli acidi nucleici, migliorando la risoluzione nell′elettroforesi bidimensionale su gel. Il pH ottimale per la sua attività enzimatica è di 8,0-9,2.
Digerisce DNA ed RNA nativi o denaturati con calore.

Definizione di unità

Un′unità rappresenta la quantità di enzima in grado di digerire il DNA di sperma di salmone sonicato a oligonucleotidi solubili in acido equivalenti a ΔA260 pari a 1,0 in 30 minuti a pH 8,0 e a 37 °C (volume di reazione 2,625 mL).

Stato fisico

Soluzione in glicerolo al 50% contenente Tris HCl 20 mM, pH 8,0, MgCl22 mM e NaCl 20 mM.

Note legali

La nucleasi Benzonase® è fornita da Merck KGaA, Darmstadt, Germania e/o dalle sue affiliate.
Benzonase is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Codice della classe di stoccaggio

10 - Combustible liquids

Classe di pericolosità dell'acqua (WGK)

WGK 1

Punto d’infiammabilità (°F)

Not applicable

Punto d’infiammabilità (°C)

Not applicable

Dispositivi di protezione individuale

Eyeshields, Gloves


Certificati d'analisi (COA)

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