C7657
Collagenasi
Type XI, 2-5 FALGPA units/mg solid, ≥800 CDU/mg solid
Sinonimo/i:
Clostridiopeptidasi A
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About This Item
Prodotti consigliati
Origine biologica
Clostridium histolyticum
Livello qualitativo
Forma fisica
powder
Attività specifica
≥800 CDU/mg solid
2-5 FALGPA units/mg solid
PM
68-130 kDa
Solubilità
TESCA buffer (50 mM TES, 0.36 mM Calcium chloride, pH 7.4): soluble 0.05-0.1 mg/mL at 37 °C
applicazioni
diagnostic assay manufacturing
Temperatura di conservazione
−20°C
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Applicazioni
La clostridiopeptidasi A è stata usata anche in uno studio che descrive un metodo quantitativo per valutare piccole quantità di collagene mediante spettrometria di massa (MS) MALDI-TOF (con ionizzazione per desorbimento laser assistita da matrice con analizzatore a tempo di volo) successivamente alla digestione del collagene.
Questo prodotto è stato usato nell′isolamento di linee cellulari di adenocarcinoma duttale pancreatico (PDAC) e di colture tissutali di fibroblasti pancreatici.
Azioni biochim/fisiol
L′effettivo rilascio di cellule dal tessuto richiede l′azione di collagenasi e della proteasi neutra. La collagenasi è attivata da quattro grammi-atomo di calcio (Ca2+) per mole di enzima. Si ritiene che il filtrato della coltura contenga almeno 7 diverse proteasi con pesi molecolari compresi fra 68 e 130 kDa. Il pH ottimale è fra 6,3 e 8,8. L′enzima è normalmente usato per digerire i componenti di connettivo nei campioni di tessuto e liberare le singole cellule. Il trattamento con collagenasi può indurre la morte di qualche cellula. Per la digestione si usano tipicamente concentrazioni comprese fra 0,1 e 5 mg/mL. La durata della reazione varia da 15 minuti a parecchie ore per ottenere una efficienza soddisfacente nella dissociazione delle cellule senza causare un′eccessiva mortalità cellulare. È preferibile il tampone Krebs Ringer con calcio e BSA e lo Zn2+ è necessario per l′attivazione.
La collagenasi è attivata da quattro grammi atomo di calcio per mole di enzima. È inibita da etilen-glicol-bis(beta-amminoetil etere) - acido N, N, N′,N′-tetraacetico, beta-mercaptoetanolo, glutatione, acido tioglicolico e 8-idrossichinolina.
Qualità
Contiene anche clostripaina, una proteasi neutra non specifica e attività triptiche.
Definizione di unità
Una unità di digestione del collagene (CDU) libera peptidi da collagene proveniente da tendine d′Achille bovino equivalente in colore ninidrina a 1,0 μmole di leucina in 5 ore a pH 7,4 a 37 °C in presenza di ioni calcio. Una unità di idrolisi FALGPA idrolizza 1,0 μmole di furilacriloil-Leu-Gly-Pro-Ala per minuto a 25 °C. Una unità di proteasi neutra idrolizza caseina e produce colore equivalente a 1,0 μmole di tirosina per 5 ore a pH 7,5 a 37 °C. Una unità di clostripaina idrolizza 1,0 μmole of BAEE per minuto a pH 7,6 a 25 °C in presenza di DTT.
Nota sulla preparazione
Si può preparare una soluzione madre dissolvendo 0,05-0,1 mg/mL di collagenasi in 50 mM di tampone TES contenente 0,36 mM di cloruro di calcio (TESCA), pH 7,4, a 37 °C.
Substrato
N° Catalogo
Descrizione
Determinazione del prezzo
Avvertenze
Danger
Indicazioni di pericolo
Consigli di prudenza
Classi di pericolo
Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
Organi bersaglio
Respiratory system
Codice della classe di stoccaggio
11 - Combustible Solids
Classe di pericolosità dell'acqua (WGK)
WGK 1
Punto d’infiammabilità (°F)
Not applicable
Punto d’infiammabilità (°C)
Not applicable
Dispositivi di protezione individuale
dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves
Certificati d'analisi (COA)
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Protocolli
This procedure may be used for Collagenase products.
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