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COLLD-RO

Roche

Collagenasi D

from Clostridium histolyticum

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About This Item

Classificazione EC (Enzyme Commission):
Codice UNSPSC:
12352204

Origine biologica

Clostridium histolyticum

Livello qualitativo

Sterilità

non-sterile

Forma fisica

lyophilized

collagenase activity

>0.15 U/mg lyophilizate

Confezionamento

pkg of 100 mg (11088858001)
pkg of 2.5 g (11088882001)
pkg of 500 mg (11088866001)

Produttore/marchio commerciale

Roche

Concentrazione

(working concentration: 0.5 - 2.5 mg/ml)

tecniche

tissue processing: suitable

Colore

light brown

pH ottimale

6.0-8.0

Solubilità

water: soluble

N° accesso NCBI

applicazioni

cell analysis

Attività estranea

Clostripain 0.060 U/mg
Proteases 8 U/mg ( Azocoll)
Trypsin <0.2 U/mg (with BAEE)

Temperatura di conservazione

2-8°C

Descrizione generale

La collagenasi D è preparata da colture di Clostridium histolyticum per filtrazione, precipitazione con solfato di ammonio, dialisi e liofilizzazione.

Specificità

La collagenasi degrada il collagene nativo. Clostripaina, enzimi simil-tripsina e proteasi neutre degradano anche altre proteine.

Applicazioni

La collagenasi da Clostridium histolyticum è molto usata per la disgregazione di vari tipi di tessuti (per esempio, polmonare, cardiaco, muscolare, osseo, adiposo, epatico, renale, cartilagineo, delle ghiandole mammarie, placentari, dei vasi sanguigni, cerebrale, tumorale, del cordone ombelicale) e per la preparazione di sospensioni monocellulari per costituire sistemi di coltura di cellule primarie. La Collagenasi D è raccomandata quando la funzionalità e integrità delle proteine sulla superficie della cellule sono importanti.
La collagenasi da Clostridium Roche è stata usata per preparare cellule da molti tipi di tessuti come epatociti, adipociti, isole pancreatiche, cellule dei muscoli e endoteliali ecc.. Tuttavia la capacità di ogni lotto di enzima di attaccare un particolare tessuto si deve determinare empiricamente.

Caratteristiche e vantaggi

Contenuto
Liofilizzato, non sterile

Definizione di unità

La collagenasi Roche è stimata in unità Wünsch (1 μmoli di prodotto formate per minuto a +25 °C con substrato Wünsch).
Spesso l′attività della collagenasi è data in unità Mandl (1 μmoli di leucina liberate da collagene in 5 ore a +37 °C).
Purtroppo non c′è un fattore di conversione affidabile fra le due unità di attività perché l′unità Mandl dipende in parte dalla concentrazione delle proteasi contaminanti nella preparazione della collagenasi e questa è una variabile indefinibile. Una preparazione di collagenasi più pura darebbe in realtà una attività specifica minore in unità Mandl rispetto ad una preparazione grezza. Le preparazioni da Clostridium in genere mostrano fattori di conversione di circa 1:1800 (ad es., un particolare lotto di collagenasi da Clostridium conteneva circa 0,15 U/mg Wünsch e 250 U/mg Mandl).

Stato fisico

Liofilizzato, non sterile.

Nota sulla preparazione

Attivatore: Ca2+
Concentrazione di lavoro: 0,5 - 2,5 mg/mL
Condizioni di stoccaggio (soluzione di lavoro): da -15 a -25 °C
Roche raccomanda di ricostituire solo la quantità di liofilizzato da usarsi immediatamente. La soluzione ricostituita può essere conservata a temperature da -15 a -25°C al massimo per una settimana. Si raccomanda di evitare cicli ripetuti di congelamento/scongelamento perché l′attività diminuisce dopo la ricostituzione.

Inibitori

Inibitori della collagenasi: EDTA, EGTA, Cys, His, DTT, 2-mercaptoetanolo
La collagenasi non viene inibita dal siero.
Inibitori della clostripaina: TLCK
Inibitori della tripsina: aprotinina, inibitore della tripsina (albume, soia)

Attività enzimatica
Attività della collagenasi: >0,15 U/mg (secondo Wünsch) (+25 °C, 4-fenil-azobenzil-ossicarbonil-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg come substrato)
Attività enzimatiche contaminanti: tripsina, clostripaina e attività proteolitica totale
La collagenasi D mostra attività collagenasica da normale ad alta e bassissima attività triptica (normalmente <0,2 unità/mg con BAEE come substrato).

Ricostituzione

Ricostituzione in qualsiasi soluzione salina bilanciata (ad es., HBSS)

Stoccaggio e stabilità

Tenere al riparo dalla luce.

Altre note

Esclusivamente per ricerche life science. Non usare in procedure diagnostiche.

Pittogrammi

Exclamation markHealth hazard

Avvertenze

Danger

Indicazioni di pericolo

Classi di pericolo

Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3

Organi bersaglio

Respiratory system

Codice della classe di stoccaggio

11 - Combustible Solids

Classe di pericolosità dell'acqua (WGK)

WGK 1

Punto d’infiammabilità (°F)

does not flash

Punto d’infiammabilità (°C)

does not flash


Certificati d'analisi (COA)

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