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TRYPSEQ-RO

Roche

Grado per il sequenziamento della tripsina

from bovine pancreas

Sinonimo/i:

tripsina

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About This Item

Classificazione EC (Enzyme Commission):
Codice UNSPSC:
12352200

Origine biologica

bovine pancreas

Livello qualitativo

Forma fisica

lyophilized (salt-free)

Attività specifica

≥80 units/mg protein

PM

Mr 23.5 kDa

Confezionamento

pkg of 4 × 100 μg (11047841001)
pkg of 4 × 25 μg (11418475001)

Produttore/marchio commerciale

Roche

pH ottimale

8.0

Temperatura di conservazione

2-8°C

Descrizione generale

La tripsina per sequenziamento è isolata da pancreas bovino come proteasi altamente purificata e specifica. La tripsina per sequenziamento è una serina endopeptidasi. Scinde specificamente i legami peptidici sul lato carbossilico degli aminoacidi basici Arg e Lys. Vengono scissi anche i legami ammidici ed esteri di Arg e Lys.

Specificità

La specificità della tripsina per sequenziamento viene verificata con la catena B ossidata dell′insulina (insulina Box) come substrato. Elevate concentrazioni di tripsina per sequenziamento (1 parte in peso dell′enzima con 18 parti in peso di insulina Box) vengono incubate per 18 ore per rilevare tracce di chimotripsina come impurezza.

Specificità (HPLC, con insulina Box):
Scissione dopo 1 ora: ≥90%
Prodotti aspecifici della scissione dopo 18 ore: ≤10%

Applicazioni

La tripsina per sequenziamento è usata per la digestione di proteine in soluzione, in gel o su membrane di blotting.
L′enzima è usato per studi di risoluzione della struttura proteica, mappatura triptica, fingerprinting, analisi della sequenza e traslocazione. La tripsina per sequenziamento genera glicopeptidi da glicoproteine purificate ed è adatta alla digestione delle proteine in gel di poliacrilammide.

Qualità

Purezza: esente da impurezze che possano interferire con la separazione dei peptidi nella HPLC a fase inversa.

Nota sulla preparazione

Stabilizzatori: La tripsina è stabile in 4 M.
Concentrazione di lavoro: da 1/100 a 1/20 della proteina in peso (in soluzione); 1-5 μg/100 μL (per la digestione in gel)
Condizioni di conservazione (soluzione di lavoro): per non più di una settimana, se conservata tra 2 e 8 °C, si può usare una soluzione in 0,01% di acido trifluoroacetico (TFA), (v/v) o 1 mM di HCl. Incubando le proteine in soluzione a un pH neutro o leggermente basico può avere luogo una parziale autolisi. Per questa applicazione Roche raccomanda tripsina, modificata, per sequenziamento.

Ricostituzione

Per la stabilità della soluzione è necessaria la ricostruzione in acido: Si raccomandano 0,01% di TFA (v/v), 1 mM di HCl o 0,1% di acido acetico.

Altre note

Da utilizzare solo per ricerca nelle scienze naturali. Non usare in procedure diagnostiche.

Pittogrammi

Exclamation markHealth hazard

Avvertenze

Danger

Indicazioni di pericolo

Classi di pericolo

Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3

Organi bersaglio

Respiratory system

Codice della classe di stoccaggio

11 - Combustible Solids

Classe di pericolosità dell'acqua (WGK)

WGK 1

Punto d’infiammabilità (°F)

does not flash

Punto d’infiammabilità (°C)

does not flash


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