FPCRN-RO

Taq DNA Polimerasi FastStart^™ , dNTPack

• Codice UNSPSC: 41106300
• NACRES: NA.21

Proprietà

• Grado: Molecular Biology
• Livello qualitativo: 100
• Forma fisica: liquid
• impiego: sufficient for ≤1,250 reactions (04738403001); sufficient for ≤2,500 reactions (04738420001); sufficient for ≤250 reactions (04738357001); sufficient for ≤50 reactions (04738314001); sufficient for ≤500 reactions (04738381001)
• Attività specifica: 5 U/μL
• Confezionamento: pkg of 1,000 U (04738381001 [4x250 U]); pkg of 2,500 U (04738403001 [10x250 U]); pkg of 5,000 U (04738420001 [20x250 U]); pkg of 100 U (04738314001); pkg of 500 U (04738357001 [2x250 U])
• Produttore/marchio commerciale: Roche
• Concentrazione: 40 U/mL; 55 U/mL
• Parametri: 72 °C optimum reaction temp.
• tecniche: DNA amplification: suitable; PCR: suitable
• Colore: colorless
• pH: 8.0-9.0
• Solubilità: water: miscible
• Compatibilità: suitable for molecular biology
• applicazioni: life science and biopharma
• Attività estranea: nicking activity, none detected (up to 10U w.pBR 322-DNA); ribonuclease, none detected; unspecified endonuclease, none detected
• Temperatura di conservazione: −20°C

Descrizione

Descrizione generale

Il dNTPack comprende la Taq DNA polimerasi FastStart e una soluzione pronta all′uso di nucleotidi di grado PCR. La Taq DNA polimerasi FastStart è un enzima versatile utilizzabile per un′ampia gamma di applicazioni e su più piattaforme strumentali. Si tratta di una Taq DNA polimerasi ricombinante modificata termostabile che è inattiva a temperature inferiori a +75 °C ma può essere attivata mediante uno step di attivazione con calore di 2 - 4 minuti a +95 °C. Essendo inattiva a basse temperature, la Taq DNA polimerasi FastStart non può allungare gli ibridi di primer/DNA stampo che potrebbero formarsi a tali temperature. Sono anche forniti un sistema tamponato ottimizzato per PCR e una soluzione GC-RICH per consentire all'enzima di funzionare con un'ampia gamma di DNA stampi.

Applicazioni

La Taq DNA Polimerasi FastStart^™ è una forma termostabile e chimicamente modificata della Taq DNA polimerasi ricombinante. L'enzima è inattivo a temperature comprese tra +15 e +25°C, quindi durante la fase di preparazione della PCR, mentre viene attivato a +95°C, durante la denaturazione iniziale. Questo enzima offre risultati superiori grazie alle sue esclusive caratteristiche enzimatiche e al sistema di tamponi ottimizzato. La taq DNA polimerasi FastStart è ideale per la hot start PCR, poiché l'enzima rimane inattivo durante la preparazione della mix di PCR e prima della fase di denaturazione iniziale. Può essere impiegata per PCR:

• Hot Start PCR fino a 3 kb
• Hot Start RT-PCR fino a 3 kb
• PCR Multiplex
• templati difficili ad es.strutture secondarie o sequenze ricche di GC
• PCR automatizzata, ad es.nel caso di manipolazione a temperatura ambiente
• PCR quantitativa (qPCR)

Per la massima comodità, scegliere la PCR Master FastStart in concentrazione 2x pronta per l′uso.

Caratteristiche e vantaggi

Attività per volume: 5 U/μL
Ciascun dNTPack contiene i nucleotidi (sali di sodio) privi di additivi 10 mM, sotto forma di miscela pronta all′uso.

• Specificità, sensibilità e rese superiori.

La PCR hot start facilita la messa a punto della reazione di PCR.

• Impiego di sistemi robotizzati.

Questa miscela di enzimi è stabile per 24 ore tra +15 e +25°C.

• Previene la contaminazione da carryover nella PCR.

L′incorporazione di dUTP e l′impiego di uracil-DNA glicosilasi per pretrattare le master mix impediscono le contaminazioni con prodotti di precedenti PCR.

• Conveniente

La comoda soluzione premiscelata di dNTP per PCR offre la massima efficienza in termini di costi.

Confezionamento

1 kit contenente 6 componenti

Qualità

Ciascun lotto è testato funzionalmente usando DNA del genoma umano e iniziatori specifici per il frammento 365 bp del gene umano tPA gene e un frammento di 284 bp del gene E contenente il 74% di GC. Ciascun lotto è anche analizzato per l′assenza di eso/endonucleasi e attività di incisione.
Per i dettagli riferirsi alla rispettive Istruzioni per l′uso.

Definizione di unità

Una unità di Taq DNA Polimerasi è definita come la quantità di enzima che incorpora 10 nmoli di desossiribonucleosidetrifosfati totali in DNA precipitabile in acidi entro 30 minuti a +75 °C nelle condizioni di analisi sotto riportate.

Saggio dell′attività enzimatica 1 μg di M13mp9ss DNA, 0,3 μg di M13 primer di sequenziamento e 0,1 μCi [α-³²P] dCTP sono incubati con quantità variabili di unità di Taq DNA polimerasi FastStart in 50 μL di tampone di incubazione a 65 °C per 60 minuti. Si determina la quantità di dNTP incorporati.

Attività per volume: 5 U/μL

Stoccaggio e stabilità

Tenere il contenitore ben chiuso in luogo asciutto e ben ventilato.

Altre note

Esclusivamente per ricerche life science. Non usare in procedure diagnostiche.

I protocolli Hot Start migliorano la specificità, la sensibilità e la resa della PCR. Gruppi bloccanti termolabili rendono l′enzima modificato inattivo da +15 a +25 °C. Pertanto, non vi è alcun allungamento durante la fase in cui i primer possono legarsi in modo non specifico. L′enzima è attivato grazie alla rimozione dei gruppi bloccanti a +95 °C per 2 - 6 minuti. I prodotti della PCR contengono 3′-single A overhangs e sono quindi ideali per il clonaggio T/A. Per prevenire la contaminazione con prodotti di precedenti PCR, usare la miscela di nucleotidi per PCR Mix^PLUS e uracil-DNA glicosilasi termolabile.

Note legali

AVVISO ALL′ACQUIRENTE: LICENZA LIMITATA<br />L′utilizzo di questo prodotto è coperto dal brevetto USA n. 6.127.155 e dalle corrispondenti rivendicazioni di brevetto al di fuori degli Stati Uniti.  L′acquisto di questo prodotto include un'immunità limitata e non trasferibile contro le azioni legali ai sensi delle suddette rivendicazioni di brevetto per l'esclusivo impiego di questa quantità di prodotto ai fini della ricerca interna dell'acquirente.  Non è conferito espressamente, implicitamente o per preclusione alcun diritto ai sensi di qualsiasi altra rivendicazione di brevetto, alcun diritto a eseguire metodi brevettati e alcun diritto a prestare servizi commerciali di qualsiasi tipo, inclusa, ma non solo, la comunicazione dei risultati delle attività degli acquirenti a fronte di un pagamento o di altro corrispettivo commerciale.  Questo prodotto è destinato esclusivamente a scopi di ricerca. Gli usi diagnostici in campo umano e veterinario coperti da rivendicazione di brevetto Roche richiedono una licenza separata da parte di Roche.  Tutti gli usi diversi dalla ricerca interna e gli usi diagnostici in campo umano e veterinario sotto rivendicazione di brevetto da parte di Roche, richiedono una licenza aggiuntiva da parte di Thermo Fisher Scientific. Ulteriori informazioni sull'acquisto di licenze da Roche possono essere ottenute contattando il Licensing Department of Roche Molecular Systems, Inc., 4300 Hacienda Drive, Pleasanton, California 94588, USA o Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, 68305 Mannheim, Germania.  Per ulteriori informazioni sull'acquisto di licenze da Thermo Fisher Scientific, contattare il Licensing Department of  Thermo Fisher Scientific, 5791 Van Allen Way, Carlsbad, California 92008, USA.</ br>NOTA PER L'ACQUIRENTE: LICENZA LIMITATA<br />L′utilizzo di questo prodotto è coperto dai brevetti USA N° 5.677.152 e 5.773.258 e dalle corrispondenti rivendicazioni di brevetto al di fuori degli Stati Uniti.  L′acquisto di questo prodotto include un'immunità limitata e non trasferibile contro le azioni legali ai sensi delle suddette rivendicazioni di brevetto per l'esclusivo impiego di questa quantità di prodotto ai fini della ricerca interna dell'acquirente.  Non è conferito espressamente, implicitamente o per preclusione alcun diritto ai sensi di qualsiasi altra rivendicazione di brevetto, alcun diritto a eseguire metodi brevettati e alcun diritto a prestare servizi commerciali di qualsiasi tipo, inclusa, ma non solo, la comunicazione dei risultati delle attività degli acquirenti a fronte di un pagamento o di altro corrispettivo commerciale.  Questo prodotto è destinato esclusivamente a scopi di ricerca.  Gli usi diagnostici in campo umano e veterinario coperti da rivendicazione di brevetto Roche richiedono una licenza separata da parte di Roche.  Tutti gli usi diversi dalla ricerca interna e gli usi diagnostici in campo umano e veterinario sotto rivendicazione di brevetto da parte di Roche, richiedono una licenza aggiuntiva da parte di Thermo Fisher Scientific. Ulteriori informazioni sull'acquisto di licenze da Roche possono essere ottenute contattando il Licensing Department of Roche Molecular Systems, Inc., 4300 Hacienda Drive, Pleasanton, California 94588, USA o Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, 68305 Mannheim, Germania.  Per ulteriori informazioni sull'acquisto di licenze da Thermo Fisher Scientific, contattare il Licensing Department of  Thermo Fisher Scientific, 5791 Van Allen Way, Carlsbad, California 92008, USA.

FastStart is a trademark of Roche

Solo come componenti del kit

• FastStart Taq DNA Polymerase, in storage and dilution buffer 5 U/μl
• PCR Reaction Buffer, with 20 mM MgCl₂ 10x concentrated
• PCR Reaction Buffer, without MgCl₂ 10x concentrated
• MgCl₂ Stock Solution 25 mM
• GC-RICH Solution 5x concentrated
• PCR Nucleotide Mix

Informazioni sulla sicurezza

• Codice della classe di stoccaggio: 12 - Non Combustible Liquids
• Classe di pericolosità dell'acqua (WGK): WGK 1
• Punto d’infiammabilità (°F): does not flash
• Punto d’infiammabilità (°C): does not flash